Neutralizing CXCL10 reverses established vitiligo.

Vitiligo is an autoimmune disease of the skin causing disfiguring patchy depigmentation of the epidermis and, less commonly, hair. Therapeutic options for vitiligo are limited, reflecting in part limited knowledge of disease pathogenesis. Existing mouse models of vitiligo consist of hair depigmentation but lack prominent epidermal involvement, which is the hallmark of human disease. They are thus unable to provide a platform to fully investigate disease mechanisms and treatment. CD8(+) T cells have been implicated in the pathogenesis of vitiligo, and expression of IFN-γ is increased in the lesional skin of patients, however, it is currently unknown what role IFN-γ has in disease. Here, we have developed an adoptive transfer mouse model of vitiligo using melanocyte-specific CD8(+) T cells, which recapitulates the human condition by inducing epidermal depigmentation while sparing the hair. Like active lesions in human vitiligo, histology of depigmenting skin reveals a patchy mononuclear infiltrate and single-cell infiltration of the epidermis. Depigmentation is accompanied by accumulation of autoreactive CD8(+) T cells in the skin, quantifiable loss of tyrosinase transcript, and local IFN-γ production. Neutralization of IFN-γ with antibody prevents CD8(+) T-cell accumulation and depigmentation, suggesting a therapeutic potential for this approach.

Vitiligo is a chronic autoimmune disorder characterized by depigmented patches of the skin.To evaluate the efficacy and safety of ritlecitinib, an oral JAK3 (Janus kinase)/TEC (tyrosine kinase expressed in hepatocelluar carcinoma) inhibitor, in patients with active nonsegmental vitiligo in a phase 2b trial (NCT03715829).Patients were randomized to once-daily oral ritlecitinib ± 4-week loading dose (200/50 mg, 100/50 mg, 30 mg, or 10 mg) or placebo for 24 weeks (dose-ranging period). Patients subsequently received ritlecitinib 200/50 mg daily in a 24-week extension period. The primary efficacy endpoint was percent change from baseline in Facial-Vitiligo Area Scoring Index at week 24.A total of 364 patients were treated in the dose-ranging period. Significant differences from placebo in percent change from baseline in Facial-Vitiligo Area Scoring Index were observed for the ritlecitinib 50 mg groups with (-21.2 vs 2.1; P < .001) or without (-18.5 vs 2.1; P < .001) a loading dose and ritlecitinib 30 mg group (-14.6 vs 2.1; P = .01). Accelerated improvement was observed after treatment with ritlecitinib 200/50 mg in the extension period (n = 187). No dose-dependent trends in treatment-emergent or serious adverse events were observed across the 48-week treatment.Patients with stable vitiligo only were excluded.Oral ritlecitinib was effective and well tolerated over 48 weeks in patients with active nonsegmental vitiligo.

To the Editor: Vitiligo is a chronic autoimmune disease resulting in patches of depigmented skin1Taïeb A. Picardo M. Clinical practice. Vitiligo.N Engl J Med. 2009; 360: 160-169Crossref PubMed Scopus (281) Google Scholar and reduced quality of life.2Morrison B. Burden-Teh E. Batchelor J.M. Mead E. Grindlay D. Ratib S. Quality of life in people with vitiligo: a systematic review and meta-analysis.Br J Dermatol. 2017; 177: e338-e339Crossref PubMed Scopus (17) Google Scholar In a randomized, dose-ranging phase 2 study (NCT03099304) in 157 adult patients, the Janus kinase (JAK) 1/JAK2 inhibitor ruxolitinib cream produced substantial repigmentation of facial and total body vitiligo lesions after 24 weeks, with continued improvement through week 52, and was well tolerated.3Rosmarin D. Pandya A.G. Lebwohl M. et al.Ruxolitinib cream for treatment of vitiligo: a randomised, controlled, phase 2 trial.Lancet. 2020; 396: 110-120Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (70) Google Scholar Here, we present treatment response subanalyses from the phase 2 trial. The proportion of patients receiving 1.5% ruxolitinib cream twice daily who achieved ≥50% improvement in facial Vitiligo Area Scoring Index (F-VASI50) at week 24 was assessed by demographics and baseline clinical characteristics. Additionally, the proportion of patients initially randomized to 1.5% ruxolitinib cream once daily or twice daily who achieved ≥50% and ≥75% improvement from baseline in total VASI (T-VASI50 and T-VASI75, respectively) at week 52 was assessed by affected body area. Because the ruxolitinib cream application was limited to ≤20% of total body surface area (T-BSA; the limit for the practicality of application), total body analyses were conducted only in patients with vitiligo affecting ≤20% of T-BSA at baseline. Data were analyzed using descriptive statistics. Among the 33 patients who received 1.5% ruxolitinib cream twice daily, a larger proportion of F-VASI50 responders at 24 weeks were aged ≤50 years compared with >50 years (58.8% vs 31.3%; Fig 1). A larger proportion of women versus men (60.0% vs 33.3%) were F-VASI50 responders. A larger proportion of responders had ≤1.5% affected baseline facial BSA, disease duration >20 years, and previous treatment with phototherapy. There were no substantial differences between responders based on race, skin type, baseline T-BSA, or disease status. Among patients with vitiligo affecting ≤20% of T-BSA at baseline, both doses of ruxolitinib cream (1.5% once daily and twice daily) produced notable T-VASI50 and T-VASI75 responses at week 52 (Table I). The 1.5% ruxolitinib cream twice-daily dose produced the highest proportion of T-VASI50 responders in the head/neck region (60.0%), followed by the upper and lower extremities (52.9% and 52.6%, respectively). T-VASI50 of the hands and feet was noted for 15.0% and 29.4% of patients, respectively, who received 1.5% ruxolitinib cream twice daily.Table IProportion of patients who applied 1.5% ruxolitinib cream and achieved T-VASI50 or T-VASI75 responses at week 52∗T-VASI50 and T-VASI75 responses are reported for the subset of patients with baseline T-BSA ≤20% because treatment was limited to lesions constituting ≤20% of T-BSA.Ruxolitinib creamResponders, n/N (%)1.5% once daily1.5% twice dailyT-VASI50†Percentage change from baseline differs for each body region, and the value for all body regions is based on the sum of all regions; binary outcomes (ie, yes/no) for T-VASI50 may not follow the distribution of percentage change from baseline.7/19 (36.8)9/20 (45.0) Head/neck6/19 (31.6)12/20 (60.0) Trunk7/18 (38.9)5/17 (29.4) Upper extremities7/18 (38.9)9/17 (52.9) Lower extremities6/18 (33.3)10/19 (52.6) Hands4/19 (21.1)3/20 (15.0) Feet5/19 (26.3)5/17 (29.4)T-VASI75†Percentage change from baseline differs for each body region, and the value for all body regions is based on the sum of all regions; binary outcomes (ie, yes/no) for T-VASI50 may not follow the distribution of percentage change from baseline.2/19 (10.5)3/20 (15.0) Head/neck5/19 (26.3)11/20 (55.0) Trunk4/18 (22.2)2/17 (11.8) Upper extremities3/18 (16.7)4/17 (23.5) Lower extremities3/18 (16.7)5/19 (26.3) Hands4/19 (21.1)1/20 (5.0) Feet4/19 (21.1)3/17 (17.6)T-BSA, Total body surface area; T-VASI50, ≥50% improvement from baseline in total Vitiligo Area Scoring Index; T-VASI75, ≥75% improvement from baseline in total Vitiligo Area Scoring Index.∗ T-VASI50 and T-VASI75 responses are reported for the subset of patients with baseline T-BSA ≤20% because treatment was limited to lesions constituting ≤20% of T-BSA.† Percentage change from baseline differs for each body region, and the value for all body regions is based on the sum of all regions; binary outcomes (ie, yes/no) for T-VASI50 may not follow the distribution of percentage change from baseline. Open table in a new tab T-BSA, Total body surface area; T-VASI50, ≥50% improvement from baseline in total Vitiligo Area Scoring Index; T-VASI75, ≥75% improvement from baseline in total Vitiligo Area Scoring Index. In summary, ruxolitinib cream demonstrated trends for clinical activity for treating vitiligo across demographics and clinical characteristics, including in patients with longstanding and extensive disease. F-VASI50 responses were observed in >40% of patients previously treated with topical corticosteroids or topical calcineurin inhibitors and in two-thirds of patients who received prior phototherapy. Ruxolitinib cream also produced a clinically meaningful repigmentation of all body areas, including acral areas, which are notoriously difficult to repigment.4Esmat S.M. El-Tawdy A.M. Hafez G.A. et al.Acral lesions of vitiligo: why are they resistant to photochemotherapy?.J Eur Acad Dermatol Venereol. 2012; 26: 1097-1104Crossref PubMed Scopus (34) Google Scholar Overall, these findings support the use of ruxolitinib cream for treating vitiligo. Reported analyses were descriptive, and sample sizes were small, warranting confirmation of results in larger populations. Dr Hamzavi has served as an advisory board member for AbbVie; a consultant for Incyte Corporation, Pfizer, and UCB; a principal investigator for AbbVie, Allergan, Bayer, Clinuvel Pharmaceuticals, Estée Lauder, Ferndale Laboratories, Galderma Laboratories LP, GE Healthcare, Incyte Corporation, Janssen, Janssen Biotech, Johnson & Johnson, Lenicura, LEO Pharma, Pfizer, and Unigen; a subinvestigator for Amgen, Bristol Myers Squibb, Foamix Pharmaceuticals, and Janssen; president of the HS Foundation; and cochair of the Global Vitiligo Foundation. Dr Rosmarin has received honoraria as a consultant for AbbVie, Celgene, Dermavant Sciences, Dermira, Eli Lilly and Company, Janssen, Kyowa Kirin, Novartis, Pfizer, Regeneron Pharmaceuticals, Sanofi, Sun Pharmaceuticals, UCB, and VielaBio; research support from AbbVie , Amgen , Bristol Myers Squibb , Celgene , Dermira , Eli Lilly and Company , Incyte Corporation , Janssen , Merck , Novartis , Pfizer , and Regeneron Pharmaceuticals ; and has served as a paid speaker for AbbVie, Celgene, Eli Lilly and Company, Janssen, Novartis, Pfizer, Regeneron Pharmaceuticals, and Sanofi. Dr Harris has served as a consultant for AbbVie, Aclaris Therapeutics, BiologicsMD, EMD Serono, Genzyme/Sanofi, Janssen, Pfizer, Rheos Medicines, Sun Pharmaceuticals, TeVido BioDevices, The Expert Institute, 3rd Rock Ventures, and Villaris Therapeutics; has served as an investigator for Aclaris Therapeutics, Celgene, Dermira, EMD Serono, Genzyme/Sanofi, Incyte Corporation, LEO Pharma, Pfizer, Rheos Medicines, Stiefel/GSK, Sun Pharmaceuticals, TeVido BioDevices, and Villaris Therapeutics; holds equity in Rheos Medicines, TeVido BioDevices, and Villaris Therapeutics; is a scientific founder of Villaris Therapeutics; and has patents pending for IL-15 blockade for treating vitiligo, JAK inhibition with light therapy for vitiligo, and CXCR3 antibody depletion for the treatment of vitiligo. Dr Pandya has served as an investigator for Aclaris Therapeutics, Immune Tolerance Network, Incyte Corporation, and Pfizer; a consultant for Arcutis, Avita Medical, Chromaderm, Immune Tolerance Network, Incyte Corporation, Pfizer, Viela Bio, and Villaris; and a board member who also holds stock options for Clarify Medical and Tara Medical. Dr Lebwohl is an employee of Mount Sinai Hospital, which receives research funds from AbbVie , Amgen , Arcutis , Avotres , Boehringer Ingelheim , Dermavant , Eli Lilly , Incyte Corporation , Janssen Research & Development , LLC, Ortho Dermatologics , Regeneron , and UCB , Inc; and is a consultant for Aditum Bio, Almirall, AnaptysBio, Arcutis, Aristea, Arrive Technology, Avotres Therapeutics, BioMX, Boehringer Ingelheim, Bristol Myers Squibb, Cara Therapeutics, Castle Biosciences, Corrona, Dermavant Sciences, Dr. Reddy's Laboratories, Evelo, Evommune, Facilitate International Dermatologic Education, Forte, Foundation for Research and Education in Dermatology, Helsinn, LEO Pharma, Meiji Seika Pharma, Mindera, Pfizer, and Verrica. Dr Gottlieb has received honoraria as an advisory board member and consultant for AnaptysBio, Avotres Therapeutics, Beiersdorf, Boehringer Ingelheim, Bristol Myers Squibb, Eli Lilly, Incyte Corporation, Janssen, LEO Pharma, Novartis, Sun Pharmaceuticals, and UCB; has stock options in Xbiotech; and has received institutional research/educational grants from Boehringer Ingelheim , Incyte Corporation , Janssen , Novartis , UCB , Xbiotech , and Sun Pharmaceuticals to Mount Sinai School of Medicine. Drs Butler, Kuo, and Sun are employees and shareholders of Incyte Corporation. Dr Grimes has served as a consultant for Aclaris Therapeutics, Clarify Medical, DermaForce, Incyte Corporation, Proctor & Gamble, and Versicolor Technologies and a principal investigator for Aclaris Therapeutics, Allergan/SkinMedica, Clinuvel Pharmaceuticals, Incyte Corporation, Johnson & Johnson, L'Oreal, Merz Pharma, Pfizer, Thync Global Inc, and VT Cosmetics. The study was funded by Incyte Corporation (Wilmington, DE). Writing assistance was provided by Laurie Orloski, PharmD, of ICON (North Wales, PA) and was funded by Incyte Corporation.

BackgroundJanus kinase (JAK) inhibition is a promising approach for treating vitiligo. We aimed to assess the efficacy and safety of upadacitinib, an oral selective JAK inhibitor, in adults with non-segmental vitiligo.MethodsThis was a phase 2, multicentre, randomised, double-blind, placebo-controlled, dose-ranging study completed at 33 clinical centres in the United States, Canada, France, and Japan. Eligible patients were aged 18–65 years with non-segmental vitiligo and had a Facial Vitiligo Area Scoring Index (F-VASI) ≥0.5 and a Total Vitiligo Area Scoring Index (T-VASI) ≥5. Patients were randomly assigned (2:2:2:1:1) using an interactive response technology to receive upadacitinib 6 mg (UPA6), upadacitinib 11 mg (UPA11), upadacitinib 22 mg (UPA22), or placebo (PBO; preassigned to switch to either UPA11 or UPA22 in period 2) once daily for 24 weeks (period 1). For weeks 24–52 (period 2), patients randomly assigned to upadacitinib continued their treatment, and patients receiving PBO switched to their preassigned upadacitinib dose in a blinded fashion. The primary endpoint was the percent change from baseline in F-VASI at week 24. Efficacy was analysed in the intention-to-treat population, and safety was examined in all randomly assigned patients who received at least one dose of study drug. This study is registered with ClinicalTrials.gov, number NCT04927975.FindingsBetween June 16, 2021, and June 27, 2022, 185 patients (including 115 [62%] who were female and 70 [38%] who were male) were randomly assigned to UPA6 (n = 49), UPA11 (n = 47), UPA22 (n = 43), or PBO (n = 46). At week 24, the LS mean difference versus PBO in the percent change from baseline in F-VASI was −7.60 (95% CI −22.18 to 6.97; p = 0.3037) for UPA6, −21.27 (95% CI −36.02 to −6.52; p = 0.0051) for UPA11, and −19.60 (95% CI −35.04 to −4.16; p = 0.0132) for UPA22. The LS mean difference versus PBO in the percent change from baseline in T-VASI was −7.45 (95% CI −16.86 to 1.96; p = 0.1198) for UPA6, −10.84 (95% CI −20.37 to −1.32; p = 0.0259) for UPA11 and −14.27 (95% CI −24.24 to −4.30; p = 0.0053) for UPA22. Ongoing treatment with upadacitinib induced continuous skin repigmentation over time without reaching a plateau through week 52. The rates for study drug discontinuation and serious treatment-emergent adverse events (TEAEs) were higher in the UPA22 group than in the UPA11 and UPA6 groups. Eight serious TEAEs, including one death of unknown cause and one case of infiltrating lobular breast carcinoma, were reported through 52 weeks; only two serious TEAEs (coronary artery arteriosclerosis [UPA6 (n = 1)] and non-fatal ischemic stroke [UPA11 (n = 1)]) were deemed by the investigator to have a reasonable possibility of being related to study drug. The one case of breast cancer in the UPA11 group was deemed unrelated to study drug, and the one death of unknown cause in the UPA22 group was reviewed and adjudicated and was deemed to be unrelated to study drug. The most common TEAEs were COVID-19, headache, acne, and fatigue. No new safety signals were observed.InterpretationUpadacitinib monotherapy led to substantial repigmentation of both facial and total body vitiligo lesions and may offer an effective treatment option for adults with extensive non-segmental vitiligo. Based on these findings, upadacitinib 15 mg is being investigated in adults and adolescents with non-segmental vitiligo in an ongoing phase 3 randomised controlled trial.FundingAbbVie Inc.

Abstract Chemokines play critical roles in the recruitment and activation of immune cells in both homeostatic and pathologic conditions. Here, we examined chemokine ligand-receptor pairs to better understand the immunopathogenesis of cutaneous lupus erythematosus (CLE), a complex autoimmune connective tissue disorder. We used suction blister biopsies to measure cellular infiltrates with spectral flow cytometry in the interface dermatitis reaction, as well as 184 protein analytes in interstitial skin fluid using Olink targeted proteomics. Flow and Olink data concordantly demonstrated significant increases in T cells and antigen presenting cells (APCs). We also performed spatial transcriptomics and spatial proteomics of punch biopsies using digital spatial profiling (DSP) technology on CLE skin and healthy margin controls to examine discreet locations within the tissue. Spatial and Olink data confirmed elevation of interferon (IFN) and IFN-inducible CXCR3 chemokine ligands. Comparing involved versus uninvolved keratinocytes in CLE samples revealed upregulation of essential inflammatory response genes in areas near interface dermatitis, including AIM2 . Our Olink data confirmed upregulation of Caspase 8, IL-18 which is the final product of AIM2 activation, and induced chemokines including CCL8 and CXCL6 in CLE lesional samples. Chemotaxis assays using PBMCs from healthy and CLE donors revealed that T cells are equally poised to respond to CXCR3 ligands, whereas CD14+CD16+ APC populations are more sensitive to CXCL6 via CXCR1 and CD14+ are more sensitive to CCL8 via CCR2. Taken together, our data map a pathway from keratinocyte injury to lymphocyte recruitment in CLE via AIM2-Casp8-IL-18-CXCL6/CXCR1 and CCL8/CCR2, and IFNG/IFNL1-CXCL9/CXCL11-CXCR3. One Sentence Summary We mapped chemokine orchestrators of interface dermatitis in lupus using spatial approaches on archival tissue and confirmed with fresh tissues.

ABSTRACT Despite the central role of IFNγ in vitiligo pathogenesis, systemic IFNγ neutralization is an impractical treatment option due to strong immunosuppression. However, most vitiligo patients present with less than 20% affected body surface area, which provides an opportunity for localized treatments that avoid systemic side effects. After identifying keratinocytes as key cells that amplify IFNγ signaling during vitiligo, we hypothesized that tethering an IFNγ neutralizing antibody to keratinocytes would limit anti-IFNγ effects to the treated skin for the localized treatment. To that end, we developed a bispecific antibody (BsAb) capable of blocking IFNγ signaling while binding to desmoglein expressed by keratinocytes. We characterized the effect of the BsAb in vitro , ex vivo , and in a mouse model of vitiligo. SPECT/CT biodistribution and serum assays after local footpad injection revealed that the BsAb had improved skin retention, faster elimination from the blood, and less systemic IFNγ inhibition than the non-tethered version. Furthermore, the BsAb conferred localized protection almost exclusively to the treated footpad during vitiligo that was not possible by local injection of the non-tethered anti-IFNγ antibody. Thus, keratinocyte-tethering proved effective while significantly diminishing off-tissue effects of IFNγ blockade, offering a new treatment strategy for localized skin diseases, including vitiligo.

Abstract Traditional skin sampling methods include punch or shave biopsies to produce a solid tissue sample for analysis. These biopsy procedures are painful, require anesthesia, and leave permanent scars. This unit describes a suction blister skin biopsy method that can be used in place of traditional biopsy methodologies as a minimally invasive, non‐scarring skin sampling technique. The induction of suction blisters uses an instrument with a chamber that applies negative pressure and gentle heat to the skin. Blister formation occurs within 1 hr, producing up to five blisters, each 10 mm in diameter per biopsy site. Blister fluid can be extracted and centrifuged to retrieve cells from the epidermis and upper dermis for flow cytometry, single‐cell RNA sequencing, cell culture, and more without the need for digestion protocols. In addition, the blister fluid can be used to measure soluble proteins and metabolites. This unit describes the preparation of supplies and subjects, the suction blister biopsy procedure and blister formation, fluid extraction, and post‐blistering care. © 2024 Wiley Periodicals LLC. Basic Protocol 1 : Preparation of supplies and subject Basic Protocol 2 : Suction blister biopsy procedure and formation Basic Protocol 3 : Blister fluid extraction Basic Protocol 4 : Post‐blister care and clean up