ABSTRACT Although the impact of gender-affirming hormone therapy (GAHT) on spermatogenesis in trans women has already been studied, data on its precise effects on the testicular environment is poor. Therefore, this study aimed to characterize, through histological and transcriptomic analysis, the spermatogonial stem cell niche of 106 trans women who underwent standardized GAHT, comprising estrogens and cyproterone acetate. A partial dedifferentiation of Sertoli cells was observed, marked by the co-expression of androgen receptor and anti-Müllerian hormone which mirrors the situation in peripubertal boys. The Leydig cells also exhibited a distribution analogous to peripubertal tissue, accompanied by a reduced insulin-like factor 3 expression. Although most peritubular myoid cells expressed alpha-smooth muscle actin 2, the expression pattern was disturbed. Besides this, fibrosis was particularly evident in the tubular wall and the lumen was collapsing in most participants. A spermatogenic arrest was also observed in all participants. The transcriptomic profile of transgender tissue confirmed a loss of mature characteristics - a partial rejuvenation - of the spermatogonial stem cell niche and, in addition, detected inflammation processes occurring in the samples. The present study shows that GAHT changes the spermatogonial stem cell niche by partially rejuvenating the somatic cells and inducing fibrotic processes. These findings are important to further understand how estrogens and testosterone suppression affect the testis environment, and in the case of orchidectomized testes as medical waste material, their potential use in research.

Abstract Extracellular RNAs present in biofluids have emerged as potential biomarkers for disease. Where most studies focus on plasma or serum, other biofluids may contain more informative RNA molecules, depending on the type of disease. Here, we present an unprecedented atlas of messenger, circular and small RNA transcriptomes of a comprehensive collection of 20 different human biofluids. By means of synthetic spike-in controls, we compared RNA content across biofluids, revealing a more than 10 000-fold difference in RNA concentration. The circular RNA fraction is increased in nearly all biofluids compared to tissues. Each biofluid transcriptome is enriched for RNA molecules derived from specific tissues and cell types. In addition, a subset of biofluids, including stool, sweat, saliva and sputum, contains high levels of bacterial RNAs. Our atlas enables a more informed selection of the most relevant biofluid to monitor particular diseases. To verify the biomarker potential in these biofluids, four validation cohorts representing a broad spectrum of diseases were profiled, revealing numerous differential RNAs between case and control subjects. Taken together, our results reveal novel insights in the RNA content of human biofluids and may serve as a valuable resource for future biomarker studies. All spike-normalized data is publicly available in the R2 web portal and serve as a basis to further explore the RNA content in biofluids.