Abstract Effective function of CD8 + T cells and enhanced innate activation of dendritic cells (DC) in response to HIV-1 is linked to protective antiviral immunity in controllers. Manipulation of DC targeting the master regulator TANK-binding Kinase 1 (TBK1) might be useful to acquire controller-like properties. Here, we evaluated the impact of TBK1-primed DC inducing protective CD8 + T cell responses in lymphoid tissue and peripheral blood and their association with reduced HIV-1 disease progression in vivo in the humanized bone marrow, liver and thymus (hBLT) mouse model. A higher proportion of hBLT-mice vaccinated with TBK1-primed DC exhibited less severe CD4 + T cell depletion following HIV-1 infection compared to control groups. This was associated with infiltration of CD8 + T cells in the white pulp from the spleen, reduced spread of infected p24 + cells to secondary lymphoid organs and with preserved abilities of CD8 + T cells from the spleen and blood of vaccinated animals to induce specific polyfunctional responses upon antigen stimulation. Therefore, TBK1-primed DC might be an useful tool for subsequent vaccine studies. Author summary Emulating protective immunological characteristics from individuals capable of spontaneously controlling HIV-1 infection might be useful for the development of a protective vaccine. Enhanced function of dendritic cells (DC) in these HIV-1 controllers depends on the activation of TANK-binding Kinase 1 (TBK1) and might associate with protective T cells. Our study evaluated the ability of DCs trained through TBK1 activation inducing protective adaptive immune responses against HIV-1 and reducing disease progression in vivo , using a humanized mouse model. Our data indicate that mice vaccinated with tailored DC exhibit delayed disease progression, increased induction of protective CD8+ T lymphocyte subsets in the lymphoid tissue and blood upon antigen recognition. Therefore, trained-DC might be an useful tool for future HIV-1 vaccine designs.

ABSTRACT Dysfunction of CD8+ T cells in people living with HIV-1 (PLWH) receiving anti-retroviral therapy (ART) has restricted the efficacy of dendritic cell (DC)-based immunotherapies against HIV-1. Heterogeneous immune exhaustion and metabolic states of CD8+ T cells might differentially associate with dysfunction. However, specific parameters associated to functional restoration of CD8+ T cells after DC treatment have not been investigated in detail. Here, we studied the association of ART duration with memory subsets, exhaustion and metabolic profiles of CD8+ T cells from PLWH and improvement of polyfunctional and effector HIV-1 specific responses after stimulation with Gag-adjuvant-primed DC. HIV-1-specific CD8+ T cell responses from a larger proportion PLWH on ART for more than 10 years (LT-ARTp) improved polyfunctionality and capacity to eliminate autologous p24+ infected CD4+ T cells in vitro . In contrast, CD8+ T cells from PLWH on ART for less than a decade (ST-ARTp) were less responsive to DC treatment and functional improvement was limited in this group. This was associated with lower frequencies of central memory CD8+ T cells, increased co-expression of PD1 and TIGIT and reduced mitochondrial respiration and glycolytic induction upon TCR activation. In contrast, CD8+ T cells from LT-ARTp showed increased frequencies of TIM3+PD1-cells and preserved induction of glycolysis. Treatment of dysfunctional CD8+ T cells from ST-ARTp with combined anti-PD1 and anti-TIGIT antibodies plus a glycolysis promoting drug restored their ability to eliminate infected CD4+ T cells. Together, our study identifies specific immunometabolic parameters for different PLWH subgroups potentially useful for future personalized DC-based HIV-1 vaccines.

ABSTRACT Objective Primary Sjögren’s syndrome (pSS) is an inflammatory autoimmune disorder characterized by damage of exocrine glands and linked to IFN responses and the induction of autoreactive adaptive immune cells. However, the role of innate immune cells in pSS pathology remains understudied. Methods We studied differential phenotypical characteristics of different NK cell, conventional dendritic cell (cDC) and monocyte subsets in the blood and salivary glands from pSS individuals. Transcriptional patterns of circulating cDC and Mo from pSS and healthy controls were also compared. Finally, in vivo alterations in these cell populations in the salivary gland were investigated in a mouse model. Results Here, we identified CD16+ CD56hi NK cells enriched in pSS patients which associates with higher natural cytotoxic function and increased proportions of circulating CD64+ CD1c+ cDC exhibiting antiviral transcriptional IFN signatures. CD64hi cDC and NK cell were detected infiltrated into the salivary glands from pSS patients and a murine SS model. CD1c+ cDC from patients with pSS expressed high levels of ligands for activating NK receptors and increased ability to activate NK cells ex vivo . Finally, the antiviral RIG-I and DDX60 sensors regulated the expression of NK cell receptor ligands on CD1c+ cDC. Conclusions Therefore, the interplay of CD1c+ cDCs and NK cells could contribute to pSS pathology.

ABSTRACT Natural Killer (NK) cells are promising tools for the development of immunotherapies targeting persistently infected CD4+ T cells to potentially achieve remission in people with HIV-1 (PWH). However, the chronicity of HIV-1 infection limits the functional properties of NK cells, and additional approaches are needed to potentiate their cytotoxic activity against HIV-1-infected cells. In the present study, we analyzed the reinvigoration of functional NK cells from PWH after priming with autologous dendritic cells (DC) stimulated with nanoparticles containing Poly I:C (Nano-PIC). We show that improved natural cytotoxic function in NK cell from PWH associates with increased proportions of NKG2C+CD57- precursors of memory NK, which eliminate HIV-1 infected CD4+ T cells mainly through the TRAIL receptor. In addition, expression of TIGIT but not TIM3 limited increase in NKG2C+ memory NK cell precursors and associated with persistent dysfunctionality of NK cells after stimulation with Nano PIC-DC. Blockade of TIGIT restored functional capacities of NK cell from PWH eliminating HIV-1 infected cells in vitro . Moreover, combining of NK cell and Nano-PIC-DC with anti-TIGIT mAbs immunotherapy limited the expansion of HIV-1 infected cells in humanized immunodeficient NSG mice transplanted with CD4+ T cells from PWH in vivo . Such viral control was associated with preserved NKG2C memory NK cell precursors, increased expression of granzyme B and TRAIL on NK in tissue from transplanted NSG mice. Together, combination of Nano-PIC DC and anti-TIGIT antibodies may be a promising strategy to increase the efficacy of immunotherapies aimed at HIV-1 cure. One sentence summary Stimulation of memory NK with a combination of DC and anti-TIGIT antibodies increase their ability to eliminate HIV-1 infected CD4+ T cells in vitro and in vivo .