Abstract The trans -translation pathway for rescuing stalled ribosomes is conserved and essential in bacterial pathogens but has no mammalian homolog, making it an ideal target for new antibiotics. We previously reported the discovery of a family of acylaminooxadiazoles that selectively inhibit trans -translation, resulting in broad-spectrum antibiotic activity. Optimization of the pharmacokinetic and antibiotic properties of the acylaminooxadiazoles produced MBX-4132, which cleared multiple-drug resistant Neisseria gonorrhoeae infection in mice after a single oral dose. Cryo-EM studies of non-stop ribosomes showed that acylaminooxadiazoles bind to a unique site near the peptidyl-transfer center and significantly alter the conformation of ribosomal protein L27, suggesting a novel mechanism for specific inhibition of trans -translation by these molecules. One Sentence Summary Ribosome rescue inhibitors reveal a new conformation of the ribosome and kill drug-resistant Neisseria gonorrhoeae in vivo .

Abstract The spectinamides are novel, narrow-spectrum semisynthetic analogs of spectinomycin, modified to avoid intrinsic efflux by Mycobacterium tuberculosis . Spectinamides, including lead MBX-4888A (Lee-1810), exhibit promising therapeutic profiles in mice, as single drugs and as partner agents with other anti-tuberculosis antibiotics including rifampin and/or pyrazinamide. To demonstrate that this translates to more effective cure, we first confirmed the role of rifampin, with or without pyrazinamide, as essential to achieve effective bactericidal responses and sterilizing cure in the current standard of care regimen in chronically infected C3HeB/FeJ mice compared to BALB/c mice. Thus, demonstrating added value in testing clinically relevant regimens in murine models of increasing pathologic complexity. Next we show that MBX-4888A, given by injection with the front-line standard of care regimen, is treatment shortening in multiple murine tuberculosis infection models. The positive treatment responses to MBX-4888A combination therapy in multiple mouse models including mice exhibiting advanced pulmonary disease can be attributed to favorable distribution in tissues and lesions, retention in caseum, along with favorable effects with rifampin and pyrazinamide under conditions achieved in necrotic lesions. This study also provides an additional data point regarding the safety and tolerability of spectinamide MBX-4888A in long-term murine efficacy studies.