MB
Michael Boland
Author with expertise in Molecular Mechanisms of Synaptic Plasticity and Neurological Disorders
Achievements
Cited Author
Open Access Advocate
Key Stats
Upvotes received:
0
Publications:
10
(70% Open Access)
Cited by:
464
h-index:
14
/
i10-index:
18
Reputation
Biology
< 1%
Chemistry
< 1%
Economics
< 1%
Show more
How is this calculated?
Publications
0

Modeling and treatingGRIN2Adevelopmental and epileptic encephalopathy in mice

Ariadna Amador et al.Aug 16, 2019
ABSTRACT NMDA receptors (NMDAR) play crucial roles in excitatory synaptic transmission. Rare variants of GRIN2A , which encodes the GluN2A NMDAR subunit, are associated with several intractable neurodevelopmental disorders, including developmental and epileptic encephalopathy (DEE). A de novo missense variant, p.Ser644Gly (c.1930A>G), was identified in a child with DEE, and Grin2a knockin mice were generated to model and extend understanding of this intractable childhood disease. Homozygous and heterozygous mutant mice exhibit altered hippocampal morphology at two weeks of age, and homozygotes exhibit lethal tonic-clonic seizures in the third week. Heterozygous adult mice display a variety of distinct features, including resistance to electrically induced partial seizures, as well as hyperactivity and repetitive and reduced anxiety behaviors. Multielectrode recordings of mutant neuronal networks reveal hyperexcitability and altered bursting and synchronicity. When expressed in heterologous cells, mutant receptors exhibit enhanced NMDAR agonist potency and slow deactivation following rapid removal of glutamate, as occurs at synapses. Consistent with these observations, NMDAR-mediated synaptic currents in hippocampal slices from mutant mice show a prolonged deactivation time course. Standard antiepileptic drug monotherapy was ineffective in the patient, but combined treatment of NMDAR antagonists with antiepileptic drugs substantially reduced the seizure burden albeit without appreciable developmental improvement. Chronic treatment of homozygous mutant mouse pups with NMDAR antagonists delayed the onset of lethal seizures but did not prevent them. These studies illustrate the power of modeling severe neurodevelopmental seizure disorders using multiple experimental modalities and suggest their extended utility in identifying and evaluating new therapies.
0
Citation1
0
Save
0

meaRtools: an R Package for the Analysis of Neuronal Networks Recorded on Microelectrode Arrays

Sahar Gelfman et al.Jan 2, 2018
Abstract Here we present an open-source R package ‘meaRtools’ that provides a platform for analyzing neuronal networks recorded on Microelectrode Arrays (MEAs). Cultured neuronal networks monitored with MEAs are now being widely used to characterize in vitro models of neurological disorders and to evaluate pharmaceutical compounds. meaRtools provides core algorithms for MEA spike train analysis, feature extraction, statistical analysis and plotting of multiple MEA recordings with multiple genotypes and treatments. meaRtools functionality covers novel solutions for spike train analysis, including algorithms to assess electrode cross-correlation using the spike train tiling coefficient (STTC), mutual information, synchronized bursts and entropy within cultured wells. Also integrated is a solution to account for bursts variability originating from mixed-cell neuronal cultures. The package provides a statistical platform built specifically for MEA data that can combine multiple MEA recordings and compare extracted features between different genetic models or treatments. We demonstrate the utilization of meaRtools to successfully identify epilepsy-like phenotypes in neuronal networks from Celf4 knockout mice. The package is freely available under the GPL license (GPL>=3) and is updated frequently on the CRAN web-server repository. The package, along with full documentation can be downloaded from: https://cran.r-project.org/web/packages/meaRtools/ . Author summary Cultured neuronal networks are widely used to study and characterize neuronal network activity. Among the many uses of neuronal cultures are the capabilities to evaluate neurotoxicity and the effects of pharmacological compounds on cellular physiology. Multi-well microelectrode arrays (MEAs) can collect high-throughput data from multiple neuronal cultures simultaneously, and thereby make possible hypotheses-driven inquiries into neurobiology and neuropharmacology. The analysis of MEA-derived information presents many computational challenges. High frequency data recorded simultaneously from hundreds of electrodes can be difficult to handle. The need to compare network activity across various drug treatments or genotypes recorded on the same plate from experiments lasting several weeks presents another challenge. These challenges inspired us to develop meaRtools; an MEA data analysis package that contains new methods to characterize network activity patterns, which are illustrated here using examples from a genetic mouse model of epilepsy. Among the highlights of meaRtools are novel algorithms designed to characterize neuronal activity dynamics and network properties such as bursting and synchronization, options to combine multiple recordings and use a robust statistical framework to draw appropriate statistical inferences, and finally data visualizations and plots. In summary, meaRtools provides a platform for the analyses of singular and longitudinal MEA experiments.
1

Single Cell transcriptional analysis ofex vivomodels of cortical and hippocampal development identifies unique longitudinal trends

Daniel Krizay et al.Dec 12, 2022
Summary Postnatal cortical and hippocampal mouse primary neuronal cultures are powerful and widely-used models of neuronal activity and neurological disease. While this model is frequently used to recapitulate what is seen in vivo , how the transcriptomic profiles of neuronal networks change over development is not fully understood. We use single-cell transcriptomics to provide a view of neuronal network establishment and maturation. Our data highlight region-specific differences and suggest how cell populations program the transcriptome in these brain regions. We demonstrate that patterns of expression markedly differ between and within neurological diseases, and explore why these differences are found and how well they compare to other models. In particular, we show significant expression differences between genes associated with epilepsy, autism spectrum disorder, and other neurological disorders. Collectively, our study provides novel insights on this popular model of development and disease that will better inform design for drug discovery and therapeutic intervention. Abstract Figure Graphical Abstract (A) Schematic representing select gene expression progression through neuronal network maturation from human cortical organoids (3- and 6-Month Organoid), newborn mice (P0 Mouse), immature ex vivo cortex derived cultures (DIV 3 ex vivo ), functionally mature ex vivo cortex derived cultures (DIV15-31 ex vivo ), and adult mice (P56 Mouse). Color represents proportion of excitatory neurons with detectable expression for selected representative genes Mapk10, Igfbp2 , which increase and decrease through network maturation, respectively. (B) Schematic representing divergent expression patterns between genes associated with epilepsy and ASD through network maturation between the organoids and ex vivo cultures shown in (A). Color scales represent the change in the percentile, in respect to all genes, of the proportion of excitatory neurons with detectable expression.
0

Precision genetic cellular models identify therapies protective against endoplasmic reticulum stress

Irina Lebedeva et al.Jun 4, 2020
Abstract Congenital disorders of glycosylation (CDG) and deglycosylation (CDDG) are a collection of rare pediatric disorders with symptoms that range from mild to life threatening. They typically affect multiple organ systems and usually present with neurological abnormalities including hypotonia, cognitive impairment, and intractable seizures. Several genes have been implicated in the thirty-six types of CDG, but currently NGLY1 is the only known CDDG gene. A common biological mechanism among CDG types and in CDDG is endoplasmic reticulum (ER) stress. Here, we develop two isogenic human cellular models of CDG ( PMM2 , the most prevalent type of CDG, and DPAGT1 ) and of the only CDDG ( NGLY1 ) in an effort to identify drugs that can alleviate ER stress. Systematic phenotyping identified elevated ER stress and autophagy levels among other cellular and morphological phenotypes in each of the cellular models. We screened a complex drug library for compounds able to correct aberrant morphological phenotypes in each of the models using an agnostic phenotypic cell painting assay based on >300 cellular features. The image-based screen identified multiple candidate compounds able to correct aberrant morphology, and we show a subset of these are able to correct cellular and molecular defects in each of the models. These results provide new directions for the treatment of rare diseases of glycosylation and deglycosylation and a framework for new drug screening paradigms for more common neurodegenerative diseases characterized by ER stress. Summary sentence Novel drug screening modality identifies compounds that correct aberrant molecular phenotypes in precision cellular models of glycosylation defects.
1

Neurodevelopmental deficits and cell-type-specific transcriptomic perturbations in a mouse model of HNRNPU haploinsufficiency

Sarah Dugger et al.May 1, 2020
Abstract Heterozygous de novo loss-of-function mutations in the gene expression regulator HNRNPU cause an early-onset developmental and epileptic encephalopathy. To gain insight into pathological mechanisms and lay the potential groundwork for developing targeted therapies, we characterized the neurophysiologic and cell-type-specific transcriptomic consequences of a mouse model of HNRNPU haploinsufficiency. Heterozygous mutants demonstrated neuroanatomical abnormalities, global developmental delay, impaired ultrasonic vocalizations and increased seizure susceptibility, thus modeling aspects of the human disease. Single-cell RNA-sequencing of hippocampal and neocortical cells revealed widespread, yet modest, dysregulation of gene expression across mutant neuronal subtypes. We observed an increased burden of differentially-expressed genes in mutant excitatory neurons of the subiculum—a region of the hippocampus implicated in temporal lobe epilepsy. Evaluation of transcriptomic signature reversal as a therapeutic strategy highlights the potential importance of generating cell-type-specific signatures. Overall, this work provides insight into HNRNPU -mediated disease mechanisms, and provides a framework for using single-cell RNA-sequencing to study transcriptional regulators implicated in disease.
0

Aberrant Local Synchrony in Distinct Mouse Models of Epileptic Encephalopathy

Andrew Ressler et al.Oct 27, 2023
Abstract Identifying and quantifying synchronous activity of primary neuronal networks using multielectrode arrays (MEAs) can potentially provide a medium-throughput platform to screen potential therapeutics for genetic epileptic encephalopathies (EEs). However, successfully identifying screenable synchrony phenotypes in vitro poses significant experimental and analytical challenges. Primary neuronal cultures quickly become highly synchronous and certain measures of synchrony tend to peak and plateau, while other network activity features remain dynamic. High levels of synchrony may confound the ability to identify reproducible phenotypes in vitro for a subset of EEs. Reducing, or delaying the onset of, high levels of synchrony in vitro may increase the dynamic range of global synchrony measures to identify disease-relevant phenotypes in vitro, but such measures have not been established. We hypothesized that an emphasis on local (nearby) connectivity could elucidate reproducible disease-relevant synchrony phenotypes in cortical cultures not identified by current approaches. We show clear evidence of enriched local synchrony in 48-well MEAs that varies in amplitude during development of neuronal networks. Then, we show new topological-based measures are capable of identifying novel phenotypes of aberrant synchrony in distinct mouse models of EEs. Such topological synchrony measures may provide screenable phenotypes for certain brain diseases and may be further enhanced by experimental innovation reducing global levels of synchrony in primary neuronal networks. Significance In vitro synchrony phenotypes may provide disease-relevant features that can be used for screening potential therapeutic candidates for epileptic encephalopathies. Here, we incorporate inter-electrode distance to generate tools capable of identifying novel synchrony phenotypes in distinct neurodevelopmental disorders. We additionally report robust topological and global in vitro synchrony phenotypes, alongside in vivo synchrony phenotypes in Stxbp1 +/- mice. While singular features of disease in an in vitro model are unlikely to effectively test therapeutic candidates, compounds that reverse a larger subset of distinct features may translate to human patients, suggesting such a model may be ideally suited for therapeutic development using MEAs. Across multiple disease models, the topological tools developed here are complimentary to and expand upon those within meaRtools (Gelfman 2018), which is a suite of computational tools to identify network phenotypes using MEAs.
0

The paradoxical effects of K+ channel gain-of-function are mediated by GABAergic neuron hypoexcitability and hyperconnectivity.

Amy Shore et al.Mar 6, 2020
Gain-of-function (GOF) variants in K+ channels cause severe childhood epilepsies, but there are no mechanisms to explain how increased K+ currents lead to network hyperexcitability. Here, we introduced a human Na+-activated K+ (KNa) channel variant (KCNT1-Y796H) into mice and, using a multiplatform approach, found motor cortex hyperexcitability and early-onset seizures, phenotypes strikingly similar to those of human patients. Although the variant increased KNa currents in cortical excitatory and inhibitory neurons, there was a selective increase in the KNa current across subthreshold voltages in inhibitory neurons, particularly in those with non-fast spiking properties, resulting in impaired excitability and AP generation. We further observed evidence of synaptic rewiring associated with hyperexcitable networks, including increases in homotypic synaptic connectivity and the ratio of excitatory-to-inhibitory synaptic input. These findings support inhibitory neuron-specific mechanisms in mediating the epileptogenic effects of K+ channel GOF, offering cell-type-specific currents and effects as promising targets for therapeutic intervention.