Abstract A lack of models that recapitulate the complexity of human bone marrow has hampered mechanistic studies of normal and malignant hematopoiesis and the validation of novel therapies. Here, we describe a step-wise, directed-differentiation protocol in which organoids are generated from iPSCs committed to mesenchymal, endothelial and hematopoietic lineages. These 3-dimensional structures capture key features of human bone marrow - stroma, lumen-forming sinusoidal vessels and myeloid cells including pro-platelet forming megakaryocytes. The organoids supported the engraftment and survival of cells from patients with blood malignancies, including cancer types notoriously difficult to maintain ex vivo . Fibrosis of the organoid occurred following TGFβ stimulation and engraftment with myelofibrosis but not healthy donor-derived cells, validating this platform as a powerful tool for studies of malignant cells and their interactions within a human bone marrow-like milieu. This enabling technology is likely to accelerate discovery and prioritization of novel targets for bone marrow disorders and blood cancers. Significance Statement We present a 3D, vascularised human bone marrow organoid that supports growth of primary cells from patients with myeloid and lymphoid blood cancers. This model allows for mechanistic studies of blood cancers in the context of their microenvironment, and provides a much-needed , ex vivo tool for prioritization of new therapeutics.

Reduced left atrial PITX2 is associated with atrial cardiomyopathy and atrial fibrillation. PITX2 is restricted to left atrial cardiomyocytes in the adult heart. The links between PITX2 deficiency, atrial cardiomyopathy and atrial fibrillation are not fully understood.

In specialised cells, the expression of specific tubulin isoforms and their subsequent post-translational modifications drive and coordinate unique morphologies and behaviours. The mechanisms by which β 1 tubulin, the platelet and megakaryocyte (MK) lineage restricted tubulin isoform, drives platelet production and function remains poorly understood. We investigated the roles of two key post-translational polymodifications (polyglutamylation and polyglycylation) on these processes using a cohort of thrombocytopenic patients, human induced pluripotent stem cell (iPSC) derived MKs, and healthy human donor platelets. We find distinct patterns of polymodification in MKs and platelets, mediated by the antagonistic activities of the cell specific expression of Tubulin Tyrosine Ligase Like (TTLLs) and Cytosolic Carboxypeptidae (CCP) enzymes. The resulting microtubule patterning spatially regulates motor proteins to drive proplatelet formation in megakaryocytes, and the cytoskeletal reorganisation required for thrombus formation. This work is the first to show a reversible system of polymodification by which different cell specific functions are achieved.Key Points ### Competing Interest StatementThe authors have declared no competing interest.

Abstract (1) Aims Atrial fibrillation (AF) is the most common cardiac arrhythmia. Pathogenic variants in genes encoding ion channels are associated with familial AF. The point mutation M1875T in the SCN5A gene, which encodes the α-subunit of the cardiac sodium channel Na v 1.5, has been associated with increased atrial excitability and familial AF. (2) Methods We designed a new murine model carrying the Scn5a -M1875T mutation enabling us to study the effects of the Na v 1.5 mutation in detail in vivo and in vitro using patch clamp and microelectrode recording of atrial cardiomyocytes, optical mapping, ECG, echocardiography, gravimetry, histology and biochemistry. (3) Results Atrial cardiomyocytes from newly generated adult Scn5a -M1875T +/- mice showed a selective increase in the early (peak) cardiac sodium current, larger action potential amplitude and a faster peak upstroke velocity. Conduction slowing caused by the sodium channel blocker flecainide was less pronounced in Scn5a -M1875T +/- compared to wildtype atria. Overt hypertrophy or heart failure in Scn5a -M1875T +/- mice could be excluded. (4) Conclusion The Scn5a -M1875T point mutation causes gain-of-function of the cardiac sodium channel. Our results suggest increased atrial peak sodium current as a potential trigger for increased atrial excitability and thus AF. What’s new The point mutation M1875T in the C-terminal domain of the cardiac sodium channel Na v 1.5 causes an increase in early peak sodium current in left atria. The observed changes induced by this point mutation suggest an increase in peak sodium current as a cause of familial atrial fibrillation (AF). Our findings provide a possible explanation for the variable effectiveness of sodium channel blockers in patients with AF. Carriers of such sodium channel gain-of-function mutations may benefit more from tailored treatments. Graphical abstract