Abstract Anorexia nervosa (AN) is a complex metabolic and psychological disorder that is influenced by both heritable genetic components and environmental factors. Exposure to various environmental influences can lead to epigenetically induced changes in gene expression. Epigenetic research in AN is still in its infancy, and studies to date are limited in determining clear, valid links to disease onset and progression are limited. Therefore, the aim of this systematic review was to compile and critically evaluate the available results of epigenetic studies specifically in AN and to provide recommendations for future studies. In accordance with the PRISMA guidelines, a systematic literature search was performed in three different databases (PubMed, Embase, and Web of Science) through May 2023. Twenty-three original papers or conference abstracts on epigenetic studies in AN were collected. Epigenome-wide association studies (EWASs), which analyze DNA methylation across the genome in patients with AN and identify potential disease-relevant changes in promoter/regulatory regions of genes, are the most promising for future research. To date, five EWASs on AN have been published, suggesting a potential reversibility of malnutrition-induced epigenetic changes once patients recover. Hence, determining differential DNA methylation levels could serve as a biomarker for disease status or early diagnosis and might be involved in disease progression or chronification. For future research, EWASs with a larger sample size, longitudinal study design and uniform methods should be performed to contribute to the understanding of the pathophysiology of AN, the development of individual interventions and a better prognosis for affected patients.

Abstract Homozygosity for pathogenic variants in the leptin gene leads to congenital leptin deficiency causing early-onset extreme obesity. This monogenic form of obesity has mainly been detected in patients from consanguineous families. Prevalence estimates for the general population using the Exome Aggregation Consortium (ExAC) database reported a low frequency of leptin mutations. One in approximately 15 million individuals will be homozygous for a deleterious leptin variant. With the present study, we aimed to extend these findings utilizing the augmented Genome Aggregation Database (gnomAD) v2.1.1 including more than 140,000 samples. In total, 68 non-synonymous and 7 loss-of-function (LoF) leptin variants were deposited in gnomAD. By predicting functional implications with the help of in silico tools, like SIFT, PolyPhen2 and MutationTaster2021, the prevalence of hetero- and homozygosity for putatively pathological variants (n = 32; pathogenic prediction by at least two tools) in the leptin gene were calculated. Across all populations, the estimated prevalence for heterozygosity for functionally relevant variants was approximately 1:2,100 and 1:17,860,000 for homozygosity. This prevalence deviated between the individual populations. Accordingly, people from South Asia were at greater risk to carry a possibly damaging leptin variant than individuals of other ancestries. Generally, this study emphasises the scarcity of deleterious leptin variants in the general population with varying prevalence for distinct study groups.

Abstract The C-terminal binding protein 2 ( CTBP2 ) gene (translational isoforms: CTBP2-L/S, RIBEYE) had been identified by a cross-trait analysis of genome-wide association studies for anorexia nervosa (AN) and body mass index (BMI). Here, we did a mutation analysis in CTBP2 by performing polymerase chain reactions with subsequent Sanger-sequencing to identify variants relevant for AN and body weight regulation and ensued functional studies. Analysis of the coding regions of CTBP2 in 462 female patients with AN (acute or recovered), 490 children and adolescents with severe obesity, 445 healthy-lean adult individuals and 168 healthy adult individuals with normal body weight detected 24 variants located in the specific exon of RIBEYE. In the initial analysis, three of these were rare non-synonymous variants (NSVs) detected heterozygously in patients with AN (p.Arg72Trp - rs146900874; p.Val289Met -rs375685611 and p.Gly362Arg - rs202010294). Four NSVs and one heterozygous frameshift variant were exclusively detected in children and adolescents with severe obesity (p.Pro53Ser - rs150867595; p.Gln175Arg fs Ter45 - rs141864737; p.Leu310Val - rs769811964; p.Pro397Ala - rs76134089 and p.Pro402Ser - rs113477585). Ribeye mRNA was detected in mouse hypothalamus. No effect of fasting or overfeeding on murine hypothalamic Ribeye expression was determined. Yet, increased Ribeye expression was detected in hypothalami of leptin-treated Lep ob/ob mice. This increase was not related to reduced food intake and leptin-induced weight loss. We detected rare and frequent variants in the RIBEYE specific exon in both patients with AN and in children and adolescents with severe obesity. Our data suggest RIBEYE as a relevant gene for weight regulation.

Background: The incidence of melanoma is increasing in patients of both sexes. It is known that women and men have differences in their innate and acquired immune systems. Knowing these differences, it is reasonable to hypothesize that the reagibility of the immune system and hereby the efficacy of tumor therapies might be dependent on sex. This study assessed sex-based differences in the outcome to different treatment strategies in metastatic melanoma. Methods: Patients with advanced (stage IV, AJCCv8) metastatic melanoma who were first-line treated with either PD-1-based immune checkpoint inhibition (ICI) as monotherapy or combination, or targeted therapy (TT) with BRAF plus MEK inhibitors were identified from the prospective multicenter skin cancer registry ADOREG. The study endpoints were best overall response (BOR), progression-free survival (PFS), and overall survival (OS); all endpoints were evaluated univariately and multivariately with focus on sex differences. Results: 2032 evaluable patients were identified who were treated with ICI or TT. Of those, 1274 (62.7%) were male and 758 (37.3%) were female. Median age was 66 years (range: 20-96) in the ICI cohort, and 60 years (range: 20-90) in the TT cohort. Most patients (n=1484 (73%); m: 941, f: 534) received ICI therapy; 548 patients (27%; m: 333, f: 215) were treated with TT. There were no sex-specific differences in BOR (ICI: p=0.83; TT: p=0.52), PFS (ICI: p=0.46; TT: p=0.21), and OS (ICI: p=0.20; TT: p=0.30). There were also no significant sex-specific differences in OS when patients were separately investigated by serum LDH (normal LDH: p=0.41; elevated LDH: p=0.39) or BRAF status (BRAF wt: p=0.15; BRAF mut: p=0.82). The multivariate analyses likewise showed no sex-specific differences in BOR, PFS and OS. However, LDH and ECOG were confirmed as independent influencing variables in terms of PFS and LDH, ECOG and type of therapy in terms of OS. Conclusions: There were no sex differences in first-line treatment outcomes in terms of response and survival in patients with advanced metastatic melanoma, irrespective of whether they received ICI or TT. There were also no sex differences in treatment response when BRAF status or LDH levels were measured.