Environmental stresses negatively influence survival, biomass and grain yield of most crops. Towards functionally clarifying the role of heat responsive genes in Pearl millet under high temperature stress, the present study were carried out using semi quantitative RT- PCR for transcript expression profiling of hsf and hsps in 8 different inbred lines at seedling stage, which was earlier identified as thermo tolerant/susceptible lines through initial screening for thermo tolerance using membrane stability index among 38 elite genotypes. Transcript expression pattern suggested existence of differential response among different genotypes in response to heat stress in the form of accumulation of heat shock responsive gene transcripts. Genotypes WGI 126, TT-1 and MS 841B responded positively towards high temperature stress for transcript accumulation for both Pgcp70 and Pghsf and also had better growth under heat stress, whereas PPMI 69 showed the least responsiveness to transcript induction supporting the membrane stability index data for scoring thermotolerance, suggesting the efficacy of transcript expression profiling as a molecular based screening technique for identification of thermotolerant genes and genotypes at particular crop growth stages. As to demonstrate this, a full length cDNA of Pghsp 16.97 was cloned from the thermotolerant cultivar, WGI 126 and characterized for thermotolerance. The results of demonstration set forth the transcript profiling for heat tolerant genes can be a very useful technique for high throughput screening of tolerant genotypes at molecular level from large cultivar collections at seedling stage.

Non-chimeric regeneration via in vitro mutagenesis is one of the niche areas in perennial fruit crops to shorten the breeding cycle. However, the recovery of M1 population is a major hurdle due to lack of efficient protocols. Hence the present experiment was conducted during 2021–23 at ICAR-Indian Agricultural Research Institute, New Delhi on EMS induced in vitro mutagenesis and its validation in kinnow mandarin (Citrus nobilis Loureiro × Citrus deliciosa Tenora). The specialized direct somatic embryogenesis (DSE) protocol was standardized and the optimized explants (in ovulo nucellus) were treated with 3 EMS concentration of 0.1, 0.5 and 1.0% for 1, 3 and 5 h. Based on explant survival, probit analysis was calculated and results revealed that the LD50 for in ovulo nucellus explants was 0.3% for 5 h. For a dose rate higher than LD50 i.e. E8 (0.5% for 5 h) and as compared to control, the embryogenesis efficiency was reduced to 65%, likewise embryo production (23.64%), germination (46.15%), conversion (22.76%), establishment (25.85%) and acclimatization (19.44%) showed reducing trend. The EMS derived M1 population showed variability both at morphological and molecular level. Among the markers tested, random amplification of polymorphic DNA (RAPD) and simple sequence repeats (SSR) could demarcate the mutants from mother plant. The origin of homohistont was confirmed from the morphology of observed chlorophyll defective mutants. Thus the optimized EMS dose using DSE system can be effectively used for production of trait specific solid mutants and the morphological and molecular screening protocols have practical value in early selection of M1 population.