Disorders of sex development (DSD) are congenital conditions in which chromosomal, gonadal, or phenotypic sex is atypical. Clinical management of DSD is often difficult and currently only 13% of patients receive an accurate clinical genetic diagnosis. To address this we have developed a massively parallel sequencing targeted DSD gene panel which allows us to sequence all 64 known diagnostic DSD genes and candidate genes simultaneously. We analyzed DNA from the largest reported international cohort of patients with DSD (278 patients with 46,XY DSD and 48 with 46,XX DSD). Our targeted gene panel compares favorably with other sequencing platforms. We found a total of 28 diagnostic genes that are implicated in DSD, highlighting the genetic spectrum of this disorder. Sequencing revealed 93 previously unreported DSD gene variants. Overall, we identified a likely genetic diagnosis in 43% of patients with 46,XY DSD. In patients with 46,XY disorders of androgen synthesis and action the genetic diagnosis rate reached 60%. Surprisingly, little difference in diagnostic rate was observed between singletons and trios. In many cases our findings are informative as to the likely cause of the DSD, which will facilitate clinical management. Our massively parallel sequencing targeted DSD gene panel represents an economical means of improving the genetic diagnostic capability for patients affected by DSD. Implementation of this panel in a large cohort of patients has expanded our understanding of the underlying genetic etiology of DSD. The inclusion of research candidate genes also provides an invaluable resource for future identification of novel genes.

Congenital adrenal hyperplasia (CAH) due to 21-hydroxylase deficiency (21OHD) or 11-hydroxylase deficiency (11OHD) is characterized by underproduction of cortisol and overproduction of adrenal androgens. These androgens lead to a variable degree of virilization of the female external genitalia in 46,XX individuals. Especially in developing countries, diagnosis is often delayed and 46,XX patients might be assigned as males. This study aims to describe the clinical and biochemical characteristics of a unique cohort of untreated male-reared 46,XX classic CAH patients from Indonesia and discusses treatment challenges.

Background: Infertility affects 15% of couples worldwide, with 40-50% of cases attributed to unhealthy lifestyle factors in men, such as smoking, alcohol consumption, drug use, obesity,poordietaryhabits,coffeeintake,andpsychologicalstress.Smokinghasanegative impactonreproductivehealthandreducesthechancesofhavingchildren.Smokingleadsto oxidative stress, lowers antioxidant levels in the testes, thereby disrupting spermatozoa formation. The antioxidant content in pineapple is expected to prevent and repair damage caused by oxidative stress. Objective: To investigate the effects of pineapple juice administration on sperm viability in Wistar rats exposed to cigarette smoke. Methods: Anexperimentalstudywasconductedwithapost-testonlygroupdesigninvolving 25maleWistarratsdividedinto5groups:K(notreatment),K+(exposuretocigarettesmoke only),T1(exposuretocigarettesmokeand1mlofpineapplejuiceperday),T2(exposureto cigarettesmokeand2.5mlofpineapplejuiceperday),andT3(exposuretocigarettesmoke and 4 ml of pineapple juice per day). All groups received treatment for 28 days. Results: ThemeanpercentageofspermatozoaviabilityinWistarratswasK=90.00;K(+)= 76.80; T1 = 76.80; T2 = 89.20; T3 = 93.40. Significant differences were observed between groupsKandK+andT1,withrespectivep-valuesof0.005.Significantdifferenceswerealso found between groups K+ and T2 (p = 0.008) and T3 (p = 0.001), while no significant difference was observed in group T1 (p = 1.000). Furthermore, there were significant differencesbetweengroupsT1andT2(p=0.008)andT3(p=0.001).Finally,nosignificant difference was found between groups T2 and T3 (p = 0.331). Conclusion and Recommendations: Pineapple juice can prevent and inhibit spermatozoa damage caused by free radicals from cigarette smoke. Further research should measure oxidative stress, provide exposure to each rat, and use varying doses for optimal effectiveness

Hyperglycemia is an uncontrolled condition of DM in the body, which causes a decrease in cell functions due to an increase in free radicals (ROS). This study explored the effects of Chlorogenic Acid found in coffee on mitigating MDA levels and augmenting testosterone in the context of Diabetes Mellitus (DM). Chlorogenic Acid, recognized for its substantial antioxidative properties, may ameliorate cellular impairments resulting from high glucose concentrations, consequently elevating Testosterone levels. The methodology employed was a Randomized Control Posttest Group Design involving 20 male Rattus norvegicus rats, aged 8-12 weeks, divided equally into four distinct groups. DM was simulated by administering 40mg/KgBB of streptozotocin and verifying the onset of Hyperglycemia through blood glucose evaluations three days post-administration. Following the confirmation of Hyperglycemia, a 14-day intervention with Robusta Coffee was initiated, with subsequent blood sampling on the fifteenth day to measure MDA and Testosterone concentrations. Results indicated that the groups KP, KP1, and KP2 exhibited notable variations in their responses when contrasted with KP, achieving statistical relevance Of ANOVA (p<0.05). However, no marked difference was observed in Testosterone levels between KP1 and KP2 (p>0.05). The investigation corroborated that Chlorogenic Acid in coffee plays a crucial role in reducing MDA and increasing testosterone hormone levels in DM conditions.