We describe the adaptation into Spanish of the St George's Respiratory Questionnaire (SGRQ), a self-administered questionnaire developed by Jones et al. (1991) covering three domains of health in airways disease patients: symptoms, activity and impacts. For the adaptation, the forward and back-translation method by bilinguals was used, together with professional committee and lay panel. Once tested for feasibility and comprehension, 318 male chronic obstructive pulmonary disease (COPD) patients with a wide range of disease severity completed the Spanish version of the SGRQ. The clinical status of the patients was evaluated concurrently with the measurement of health status. Lung function was assessed in the 2 months before or after the questionnaire administration. The Spanish version of the SGRQ was acceptable and easy to understand. Cronbach's alpha reliability coefficient was 0.94 for the overall scale and 0.72 for "Symptoms", 0.89 for "Activity", and 0.89 for "Impacts" subscales. Correlation coefficients between the overall score and dyspnoea and % forced expiratory volume in one second (FEV1) were 0.59 and -0.45, respectively, and these correlations were higher than those observed between the clinical variables and the Nottingham Health Profile, a generic measure of health-related quality of life. Results of the study suggest that the Spanish version of the SGRQ is conceptually equivalent to the original, and similarly reliable and valid. Although further studies should complete the adaptation work, results suggest that the SGRQ may already be used in Spain and in international studies involving Spanish respiratory patients. According to the present approach, it appears to be feasible to adapt a specific questionnaire on health-related quality of life in respiratory disease to another language and culture.

To assess whether generic and specific health-related quality of life (HRQL) are independently associated with total and specific mortality in patients with chronic obstructive pulmonary disease (COPD), we followed until 1999 a cohort of 321 male patients with COPD, recruited in 1993–1994 at outpatient respiratory clinics. Baseline characteristics recorded under stable clinical conditions included forced spirometry, arterial blood gas tensions, dyspnea scales, 11 comorbid conditions, St. George's Respiratory Questionnaire (SGRQ), and SF-36 Health Survey. Vital status was assessed through reinterviews, the Mortality Register, and clinical records. Subjects who died (106) were older (69.8 versus 62.5 years) (p < 0.001), had lower body mass index (BMI) (25.4 versus 27.1) (p < 0.01), were more impaired in the clinical characteristics studied (%FEV1, 34.0 versus 51.0) (p < 0.001), and had long-term oxygen therapy more frequently (31% versus 7%) (p < 0.001). Survival was shorter when worse HRQL was reported. SGRQ total and SF-36 physical summary scores were independently associated with total and respiratory mortality in Cox models, including age, FEV1, and BMI. The total mortality-standardized hazard ratios for both HRQL measures were 1.3, whereas those for FEV1 were 1.6. HRQL measures provide independent and relevant information on the health status of male patients with COPD. Their use should be considered for a more thorough evaluation and staging of patients with COPD.

MicroRNAs (miRNAs) have been identified as promising prognostic markers in non-small-cell lung cancer (NSCLC) since they play an important role in oncogenesis. The miR-34 family is composed of three miRNAs (miR-34a, miR-34b and miR-34c) that are part of the p53 network and whose expression is directly induced by p53 in response to DNA damage or oncogenic stress. We have analyzed the impact of miR-34 expression on relapse and overall survival in surgically resected NSCLC patients. For this purpose, we used stem-loop reverse transcription–polymerase chain reaction to analyze the expression of the miR-34 family in paired tumor and normal tissue from 70 surgically resected NSCLC patients who received no postsurgical treatment until relapse. In addition, in patients with sufficient tumor tissue, we assessed p53 mutations and the methylation status of the MIRN34A gene promoter region and correlated these findings with miR-34a expression. Molecular findings were correlated with relapse and overall survival. The miR-34 family was downregulated in tumor compared with normal tissue, and low levels of miR-34a expression were correlated with a high probability of relapse ( P = 0.04). A relation was also found between MIRN34A methylation and miR-34a expression ( P = 0.008). Patients with both p53 mutations and low miR-34a levels had the highest probability of relapse ( P = 0.001). In the multivariate analysis, miR-34a expression emerged as an independent prognostic marker for relapse. In summary, we have identified miR-34a as a novel prognostic marker in NSCLC patients, providing a potential mechanism for estimating a patient's risk of disease recurrence and a useful tool to help guide treatment decisions.

During pseudoglandular stage of the human lung development the primitive bronchial buds are initially conformed by simple tubules lined by endoderm-derived epithelium surrounded by mesenchyme, which will progressively branch into airways and start to form distal epithelial saculles. For first time alveolar type II (AT2) pneumocytes appears. This study aims to characterize the genes and microRNAs involved in this differentiation process and decipher its role in the starting alveolar differentiation. Gene and microRNA profiling was performed in human embryonic lungs from 7 to 12 post conception weeks (pcw). Protein expression location of candidate genes were analyzed by immunofluorescense in embryonic lung tissue sections. mRNA/miRNA target pairs were identified using computational approaches and their expression was studied in purified epithelial/mesenchymal cell populations and in isolated tips and stalks from the bronchial tree. Additionally, silencing experiments in human embryonic lung mesenchymal cells and in human embryonic tip-derived lung organoids were performed, as well as organoid differentiation studies. AT2 cell markers were studied by qRT-PCR and by immunofluorescence. The TGFB-β phosphorylated pathways was analyzed with membrane protein arrays. Lung explants were cultured in air/liquid interface with/without peptides. We identified 88 differentially expressed genes, including IGFBP3. Although IGFBP3 mRNA was detected in both epithelial and mesenchymal populations, the protein was restricted to the epithelium, indicating post-transcriptional regulation preventing IGFBP3 protein expression in the mesenchyme. MicroRNA profiling identified miR-34a as an IGFBP3 regulator. miR-34a was up-regulated in mesenchymal cells, and its silencing in human embryonic lung mesenchymal cells increased IGFBP3 levels. Additionally, IGFBP3 expression showed a marked downregulation from 7 to 12 pcw, suggesting its involvement in the differentiation process. The differentiation of human tip-derived lung embryonic organoids showed a drastic reduction in IGFBP3, supported by the scRNAseq data. IGFBP3 silencing in organoids activated an alveolar-like differentiation process characterized by stem cell markers downregulation and upregulation of AT2 markers. This process was mediated by TGFβ signalling inhibition and BMP pathway activation. The IGFBP3/miR-34a axis restricts IGFBP3 expression in the embryonic undifferentiated lung epithelium, and the progressive downregulation of IGFBP3 during the pseudoglandular stage is required for alveolar differentiation.

Introduction Patient-derived organoids have emerged as a promising in vitro model for precision medicine, particularly in cancer, but also in non-cancer-related diseases. However, the optimal culture medium for culturing patient-derived lung organoids has not yet been agreed upon. This study aimed to shed light on the optimal selection of a culture media for developing studies using patient-derived lung organoids. Methods Tumor and normal paired tissue from 71 resected non-small cell lung cancer patients were processed for organoid culture. Lung cancer organoids (LCOs) were derived from tumor tissue and normal lung organoids (LNOs) from non-neoplastic lung tissue. Three different culture media were compared: Permissive culture medium (PCM); Limited culture medium (LCM); and Minimum basal medium (MBM). We assessed their effectiveness in establishing organoid cultures, promoting organoid growth and viability, and compared their differential phenotypic characteristics. Results While PCM was associated with the highest success rate and useful for long-term expansion, MBM was the best option to avoid normal organoid overgrowth in the organoid culture. The density, size, and viability of LNOs organoids were reduced using LCM and severely affected with MBM. LNOs cultured in PCM tend to differentiate to bronchospheres, while alveolosphere differentiation can be observed in those cultured with LCM. The morphological phenotype of LCO was influenced by the culture media of election. Mesenchymal cell overgrowth was observed when LCM was used. Conclusion This work highlights the importance of considering the research objectives when selecting the most suitable culture medium for growing patient-derived lung organoids.