Summary

 Diet modulates the gut microbiome, which in turn can impact the immune system. Here, we determined how two microbiota-targeted dietary interventions, plant-based fiber and fermented foods, influence the human microbiome and immune system in healthy adults. Using a 17-week randomized, prospective study (n = 18/arm) combined with -omics measurements of microbiome and host, including extensive immune profiling, we found diet-specific effects. The high-fiber diet increased microbiome-encoded glycan-degrading carbohydrate active enzymes (CAZymes) despite stable microbial community diversity. Although cytokine response score (primary outcome) was unchanged, three distinct immunological trajectories in high-fiber consumers corresponded to baseline microbiota diversity. Alternatively, the high-fermented-food diet steadily increased microbiota diversity and decreased inflammatory markers. The data highlight how coupling dietary interventions to deep and longitudinal immune and microbiome profiling can provide individualized and population-wide insight. Fermented foods may be valuable in countering the decreased microbiome diversity and increased inflammation pervasive in industrialized society.

Abstract Diet modulates the gut microbiome, and gut microbes, in turn, can impact the immune system. Here, we used two gut microbiota-targeted dietary interventions, plant-based fiber or fermented foods, to determine how each influences the human microbiome and immune system in healthy adults. Using a 17-week randomized, prospective study design combined with -omics measurements of microbiome and host, including extensive immune profiling, we found distinct effects of each diet. High-fiber consumers showed increased gut microbiome-encoded glycan-degrading CAZymes despite stable community diversity. Three distinct immunological trajectories in high fiber-consumers corresponded to baseline microbiota diversity. Alternatively, the high-fermented food diet steadily increased microbiota diversity and decreased inflammatory markers. The data highlight how coupling dietary interventions to deep and longitudinal immune and microbiome profiling can provide individualized and population-wide insight. Our results indicate that fermented foods may be valuable in countering the decreased microbiome diversity and increased inflammation pervasive in the industrialized society.

The gut microbiome is a key modulator of immune and metabolic health. Human microbiome data is biased towards industrialized populations, providing limited understanding of the distinct and diverse non-industrialized microbiomes. Here, we performed ultra-deep metagenomic sequencing and strain cultivation on 351 fecal samples from the Hadza, hunter-gatherers in Tanzania, and comparative populations in Nepal and California. We recover 94,971 total genomes of bacteria, archaea, bacteriophages, and eukaryotes, 43% of which are absent from existing unified datasets. Analysis of in situ growth rates, genetic pN/pS signatures, high-resolution strain tracking, and 124 gut-resident species vanishing in industrialized populations reveals differentiating dynamics of the Hadza gut microbiome. Industrialized gut microbes are enriched in genes associated with oxidative stress, possibly a result of microbiome adaptation to inflammatory processes. This unparalleled view of the Hadza gut microbiome provides a valuable resource that expands our understanding of microbes capable of colonizing the human gut and clarifies the extensive perturbation brought on by the industrialized lifestyle.

Summary Mechanistic understanding of the impacts of the gut microbiota on human health has been hampered by limited throughput in animal models. To enable systematic interrogation of gut-relevant microbial communities, here we generated hundreds of in vitro communities cultured from diverse stool samples in various media. Species composition revealed stool-derived communities that are phylogenetically complex, diverse, stable, and highly reproducible. Community membership depended on both medium and initial inoculum, with certain media preserving inoculum compositions. Different inocula yielded different community compositions, indicating their potential for personalized therapeutics. Communities were robust to freezing and large-volume culturing, enabling future translational applications. Defined communities were generated from isolates and reconstituted growth and composition similar to those of communities derived from stool inocula. Finally, in vitro experiments probing the response to ciprofloxacin successfully predicted many changes observed in vivo , including the resilience and sensitivity of each Bacteroides species. Thus, stool-derived in vitro communities constitute a powerful resource for microbiota research.

ABSTRACT Resident microbes (microbiota) can shape host organismal function and adaptation in the face of environmental change. Invasion of new habitats exposes hosts to novel selection pressures, but little is known about the impact of invasion on microbiota and the host-microbiome relationship after this transition (e.g., how rapidly symbioses are formed, whether microbes influence invasion success). We used high-throughput 16S rRNA sequencing of New Zealand (native) and European (invasive) populations of the freshwater snail Potamopyrgus antipodarum and found that while invaders do carry over some core microbial taxa from New Zealand, most of their microbial community is distinct. This finding highlights that invasions can result in the formation of novel symbioses. We further show that the native microbiome is composed of fewer core microbes than the microbiome of invasive snails, suggesting that the microbiota is streamlined to essential members. Together, our findings demonstrate that microbiota comparisons across native and invasive populations can reveal the impact of a long coevolutionary history and specialization of microbes in the native host range, as well as new associations occurring after invasion. We lay essential groundwork for understanding how microbial relationships affect invasion success and how microbes may be utilized in the control of invasive hosts.

Abstract Infant microbiome assembly is intensely studied in infants from industrialized nations, but little is known about this process in populations living non-industrialized lifestyles. In this study we deeply sequenced infant stool samples from the Hadza hunter-gatherers of Tanzania and analyzed them in a global meta-analysis. Infant microbiomes develop along lifestyle-associated trajectories, with over twenty percent of genomes detected in the Hadza infant gut representing phylogenetically diverse novel species. Industrialized infants, even those who are breastfed, have microbiomes characterized by a paucity of Bifidobacterium infantis and gene cassettes involved in human milk utilization. Strains within lifestyle-associated taxonomic groups are shared between mother-infant dyads, consistent with early-life inheritance of lifestyle-shaped microbiomes. The population-specific differences in infant microbiome composition and function underscore the importance of studying microbiomes from people outside of wealthy, industrialized nations. Recognition of work on indigenous communities Research involving indigenous communities is needed for a variety of reasons including to ensure that scientific discoveries and understanding appropriately represent all populations and do not only benefit those living in industrialized nations. Special considerations must be made to ensure that this research is conducted ethically and in a non-exploitative manner. In this study we performed deep metagenomic sequencing on fecal samples that were collected from Hadza hunter-gatherers in 2013/2014 and were analyzed in previous publications using different methods ( 1, 2 ). A material transfer agreement with the National Institute for Medical Research in Tanzania ensures that stool samples collected are used solely for academic purposes, permission for the study was obtained from the National Institute of Medical Research (MR/53i 100/83, NIMR/HQ/R.8a/Vol.IX/1542) and the Tanzania Commission for Science and Technology, and verbal consent was obtained from the Hadza after the study’s intent and scope was described with the help of a translator. The publications that first described these samples included several scientists and Tanzanian field-guides as co-authors for the critical roles they played in sample collection, but as no new samples were collected in this study, only scientists who contributed to the analyses described here were included as co-authors in this publication. It is currently not possible for us to travel to Tanzania and present our results to the Hadza people, however we intend to do so once the conditions of the COVID-19 pandemic allow it.

Background: The neonatal intensive care unit (NICU) contains a unique cohort of patients with underdeveloped immune systems and nascent microbiome communities. Patients often spend several months in the same room and it has been previously shown that the gut microbiomes of these infants often resemble the microbes found in the NICU. Little is known, however, about the identity, persistence and absolute abundance of NICU room-associated bacteria over long stretches of time. Here we couple droplet digital PCR (ddPCR), 16S rRNA gene surveys, and recently published metagenomics data from infant gut samples to infer the extent to which the NICU microbiome is shaped by its room occupants. Results: Over 2,832 swabs, wipes, and air samples were collected from sixteen private-style NICU rooms housing very low birthweight (<1,500 g), premature (<31 weeks' gestation) infants. For each infant, room samples were collected daily, Monday through Friday, for one month. The first samples from the first infant and last samples from the last infant were collected 383 days apart. Twenty-two NICU locations spanning room surfaces, hands, electronics, sink basins, and air were collected. Results point to an incredibly simple room community where 5-10 taxa, mostly skin associated, account for over 50% of 16S reads. Biomass estimates reveal 4-5 orders of magnitude difference between the least to the most dense microbial communities, air and sink basins, respectively. Biomass trends from bioaerosol samples and petri dish dust collectors suggest occupancy to be a main driver of suspended biological particles within the NICU. Using a machine learning algorithm to classify the origin of room samples, we show that each room has a unique microbial fingerprint. Several important taxa driving this model were dominant gut colonizers of infants housed within each room. Conclusions: Despite regular cleaning of hospital surfaces, bacterial biomass was detectable at varying densities. A room specific microbiome signature was detected, suggesting microbes seeding NICU surfaces are sourced from reservoirs within the room and that these reservoirs contain actively dividing cells. Collectively, the data suggests that hospitalized infants, in combination with their caregivers, shape the microbiome of NICU rooms.

Abstract Microbiota-accessible carbohydrates (MACs) are powerful modulators of microbiota composition and function. These substrates are often derived from diet, such as complex polysaccharides from plants or human milk oligosaccharides (HMOs) during breastfeeding. Host-derived mucus glycans on gut-secreted mucin proteins may serve as a continuous endogenous source of MACs for resident microbes; here we investigate the potential role of purified, orally-administered mucus glycans in maintaining a healthy microbial community. In this study, we liberated and purified O -linked glycans from porcine gastric mucin and assessed their efficacy in shaping the recovery of a perturbed microbiota in a mouse model. We found that porcine mucin glycans (PMGs) and HMOs enrich for taxonomically similar resident microbes. We demonstrate that PMGs aid recovery of the microbiota after antibiotic treatment, suppress C. difficile abundance, delay the onset of diet-induced obesity, and increase relative abundance of resident Akkermansia muciniphila. In silico analysis revealed that genes associated with mucus utilization are abundant and diverse in prevalent gut commensals and rare in enteric pathogens, consistent with these glycan-degrading capabilities being selected for during host development and throughout evolution of the host-microbe relationship. Importantly, we identify mucus glycans as a novel class of prebiotic compounds that can be used to mitigate perturbations to the microbiota and provide benefits to host physiology.