MD
Min Dong
Author with expertise in Biological and Synthetic Hydrogenases: Mechanisms and Applications
Achievements
This user has not unlocked any achievements yet.
Key Stats
Upvotes received:
0
Publications:
3
(33% Open Access)
Cited by:
3
h-index:
15
/
i10-index:
19
Reputation
Biology
< 1%
Chemistry
< 1%
Economics
< 1%
Show more
How is this calculated?
Publications
0

Arsinothricin Biosynthesis Involving a Noncanonical Radical SAM Enzyme for C-As Bond Formation

Yadi Yao et al.Feb 2, 2024
M
J
J
Y
ABSTRACT Arsinothricin is a potent antibiotic secreted by soil bacteria. The biosynthesis of Arsinothricin was proposed to involve two steps. The first step is C-As bond formation between trivalent As and the 3-amino-3-carboxypropyl (ACP) group of S-adenosyl-L-methionine (SAM), which is catalyzed by the protein ArsL. However, the reaction has not been verified in vitro, and ArsL has not been characterized in detail. Interestingly, ArsL contains a CxxxCxxC motif and thus belongs to the radical SAM enzyme superfamily, the members of which cleave SAM and generate a 5′-deoxyadenosyl radical. Here, we found that ArsL cleaves the C γ,Met –S bond of SAM and generates an ACP radical that resembles Dph2, a noncanonical radical SAM enzyme involved in diphthamid biosynthesis. As Dph2 does not contain the CxxxCxxC motif, ArsL is a unique noncanonical radical SAM enzyme that contains this motif but generates an ACP radical. Together with the methyltransferase ArsM, we successfully reconstituted arsinothricin biosynthesis in vitro. ArsL has a conserved RCCLKC motif in the C-terminal sequence and belongs to the RCCLKC-tail radical SAM protein subfamily. By truncation, we showed that this motif binds to the substrate arsenite and is highly important for its activity. Our results suggested that ArsL is a noncanonical radical SAM enzyme with a canonical radical SAM enzyme motif, implying that more noncanonical radical SAM chemistry may exist within the radical SAM enzyme superfamily. TOC
0
Citation2
0
Save
0

Arsinothricin Biosynthesis Involving a Radical SAM Enzyme for Noncanonical SAM Cleavage and C–As Bond Formation

Yadi Yao et al.Jul 25, 2024
M
F
J
Y
Arsinothricin is a potent antibiotic secreted by soil bacteria. The biosynthesis of arsinothricin was proposed to involve a C–As bond formation between trivalent As and the 3-amino-3-carboxypropyl (ACP) group of S-adenosyl-l-methionine (SAM), which is catalyzed by the protein ArsL. However, ArsL has not been characterized in detail. Interestingly, ArsL contains a CxxxCxxC motif and thus belongs to the radical SAM enzyme superfamily, the members of which cleave SAM and generate a 5′-deoxyadenosyl radical. Here, we found that ArsL cleaves the Cγ,Met–S bond of SAM and generates an ACP radical that resembles Dph2, a noncanonical radical SAM enzyme involved in diphthamid biosynthesis. As Dph2 does not contain the CxxxCxxC motif, ArsL is a unique radical SAM enzyme that contains this motif but generates a noncanonical ACP radical. Together with the methyltransferase ArsM, we successfully reconstituted arsinothricin biosynthesis in vitro. ArsL has a conserved RCCLKC motif in the C-terminal sequence and belongs to the RCCLKC-tail radical SAM protein subfamily. By truncation and mutagenesis, we showed that this motif plays an important role in binding to the substrate arsenite and is highly important for its activity. Our results suggested that ArsL has a canonical radical SAM enzyme motif but catalyzes a noncanonical radical SAM reaction, implying that more noncanonical radical SAM chemistry may exist within the radical SAM enzyme superfamily.
0
Citation1
0
Save
0

Contilisant+Tubastatin A Hybrids: Polyfunctionalized Indole Derivatives as New HDAC Inhibitor-Based Multitarget Small Molecules with In Vitro and In Vivo Activity in Neurodegenerative Diseases

Mireia Toledano‐Pinedo et al.Sep 10, 2024
+31
L
A
M
Herein, we describe the design, synthesis, and biological evaluation of 15