Apoptosis and clearance of apoptotic cells via efferocytosis are evolutionarily conserved processes that drive tissue repair. However, the mechanisms by which recognition and clearance of apoptotic cells regulate repair are not fully understood. Here, we use single-cell RNA sequencing to provide a map of the cellular dynamics during early inflammation in mouse skin wounds. We find that apoptotic pathways and efferocytosis receptors are elevated in fibroblasts and immune cells, including resident Lyve1 + macrophages, during inflammation. Interestingly, human diabetic foot wounds upregulate mRNAs for apoptotic genes and display increased and altered efferocytosis signaling via the receptor Axl. During early inflammation in mouse wounds, we detect upregulation of Axl in dendritic cells and fibroblasts via TLR3-independent mechanisms. Inhibition studies in vivo in mice reveal that Axl signaling is required for wound repair but is dispensable for efferocytosis. By contrast, inhibition of another efferocytosis receptor, Timd4, in mouse wounds decreases efferocytosis and abrogates wound repair. These data highlight the distinct mechanisms by which apoptotic cell detection coordinates tissue repair and provides potential therapeutic targets for chronic wounds in diabetic patients.

Melanomas display high numbers of tumor-associated macrophages (TAMs), which correlate with worse prognosis. Harnessing macrophages for therapeutic purposes has been particularly challenging due to their heterogeneity, based on their ontogeny and function and driven by the tissue-specific niche. In the present study, we used the YUMM1.7 model to better understand melanoma TAM origin and dynamics during tumor progression, with potential therapeutic implications. We identified distinct TAM subsets based on F4/80 expression, with the F4/80 high fraction increasing over time and displaying tissue-resident-like phenotype. While skin-resident macrophages showed mixed on-togeny, F4/80 + TAM subsets in i.d. YUMM1.7 tumors originated almost exclusively from bone-marrow precursors. Mul-tiparametric analysis of macrophage phenotype showed a temporal divergence of F4/80 + TAM subpopulations, which also differed from skin-resident subsets, and from their monocytic precursors. Overall, F4/80 + TAMs displayed co-ex-pression of M1- and M2-like canonical markers, while RNA-seq and pathway analysis showed differential immunosup-pressive and metabolic profiles. GSEA showed F4/80 high TAMs to rely on oxidative phosphorylation, with increased proliferation and protein secretion while F4/80 low cells had high pro-inflammatory and intracellular signaling pathways, with lipid and polyamine metabolism. Overall, the present in-depth characterization provides further evidence of the ontogeny of the evolving melanoma TAMs, whose gene expression profiles matched recently-identified TAM clusters in other tumor models and human cancers. These findings provide evidence for potentially targeting specific immunosup-pressive TAMs in advanced tumor stages.