Abstract Pancreatic cancer has the lowest survival rate in all types of cancer. Pancreatic cancer patients are often diagnosed at advanced stages. A better therapeutic development for this devastating disease is urgently needed. Receptor for hyaluronan-mediated motility (RHAMM), not expressed in adult pancreas, has been suggested as a prognostic factor and a potential therapeutic target for pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) and pancreatic neuroendocrine tumor (PNET). In this study, we initially sought to determine whether genetic deletion of RHAMM would slow down pancreatic cancer progression using Rhamm -/- mice. However, we found that Rhamm -/- mice expressed a truncated HMMR Δexon8-16 protein at higher abundance levels than wild-type RHAMM. While HMMR Δexon8-16 did not enable malignant progression of pancreatic intraepithelial neoplasia in p48-Cre ; LSL-KRAS G12D mice, it accelerated the formation of invasive PDAC and shortened the survival of p48-Cre ; LSL-KRAS G12D mice with heterozygous p53 knockout. Kras G12D PDAC mice with homozygous p53 knockout mice died around 10 weeks, and the effect of HMMR Δexon8-16 was not apparent in these mice with short-life span. In addition, HMMR Δexon8-16 shortened the survival of PNET-bearing RIP-Tag mice, which had inactivated p53. In our analysis of TCGA dataset, pancreatic cancer patients with mutant TP53 or loss of one copy of TP53 had higher RHAMM expression, which, combined, predicted worse outcomes. Taken together, by collaborating with dysfunctional p53, high levels of HMMR Δexon8- 16 that lacks the centrosome targeting domain and degrons for interaction with the Anaphase-Promoting Complex (APC) accelerated pancreatic cancer progression.

Abstract Oleocanthal is a phenolic compound found in varying concentrations in extra virgin olive oil Oleocanthal has been shown to be active physiologically, benefiting several diseased states by conferring anti-inflammatory and neuroprotective benefits. Recently, we and other groups have demonstrated its specific and selective toxicity toward cancer cells; however, the mechanism leading to cancer cell death is still disputed. The current study demonstrates that oleocanthal, as well as naturally oleocanthal-rich extra virgin olive oils, induced damage to cancer cells’ lysosomes leading to cellular toxicity in vitro and in vivo . Lysosomal membrane permeabilization following oleocanthal treatment in various cell lines was assayed via three complementary methods. Additionally, we found oleocanthal treatment reduced tumor burden and extended lifespan of mice engineered to develop pancreatic neuroendocrine tumors. Finally, following-up on numerous correlative studies demonstrating consumption of olive oil reduces cancer incidence and morbidity, we observed that extra virgin olive oils naturally rich in oleocanthal sharply reduced cancer cell viability and induced lysosomal membrane permeabilization while oleocanthal-poor oils did not. Our results are especially encouraging since tumor cells often have larger and more numerous lysosomes, making them especially vulnerable to lysosomotropic agents such as oleocanthal.

Abstract We developed cProSite, a website that provides online genomics, proteomics, and phosphoproteomics analysis for the data of The National Cancer Institute’s Clinical Proteomic Tumor Analysis Consortium (CPTAC). This tool focuses on comparisons and correlations between different proteins and mRNAs of tumors and normal tissues. Our website is designed with biologists and clinicians in mind, with a user-friendly environment and fast search engine. The search results of cProSite can be used for clinical data validation and provide useful strategic information to identify drug targets at proteomic, phosphoproteomic, or genomic levels. The site is available at http://cprosite.ccr.cancer.gov . Significance An interactive database for the expression and correlation for proteins, proteomic phosphorylations, and mRNA levels has been developed for analyzing the molecular alterations between tumors and normal tissues of various tumor types.

The receptor for hyaluronic acid-mediated motility (RHAMM) is upregulated in various cancers. We previously screened genes upregulated in human hepatocellular carcinomas for their metastatic function in a mouse model of pancreatic neuroendocrine tumor (PNET) and identified that human RHAMMB promoted liver metastasis. It was unknown whether RHAMMB is upregulated in pancreatic cancer or contributes to its progression. In this study, we found that RHAMM protein was frequently upregulated in human PNETs. We investigated alternative splicing isoforms, RHAMMA and RHAMMB, by RNA-Seq analysis of primary PNETs and liver metastases. RHAMMB, but not RHAMMA, was significantly upregulated in liver metastases. RHAMMB was crucial for in vivo metastatic capacity of mouse and human PNETs. RHAMMA, carrying an extra 15-amino acid-stretch, did not promote metastasis in spontaneous and experimental metastasis mouse models. Moreover, RHAMMB was substantially higher than RHAMMA in pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC). RHAMMB, but not RHAMMA, correlated with both higher EGFR expression and poorer survival of PDAC patients. Knockdown of EGFR abolished RHAMMB-driven PNET metastasis. Altogether, our findings suggest a clinically relevant function of RHAMMB, but not RHAMMA, in promoting PNET metastasis in part through EGFR signaling. RHAMMB can thus serve as a prognostic factor for pancreatic cancer.

Abstract Besides its mitochondria-based anti-apoptotic role, Bcl-xL also travels to the nucleus to promote cancer metastasis by upregulating global histone H3 trimethyl Lys4 (H3K4me3) and TGFβ transcription. How Bcl-xL is translocated into the nucleus and how nuclear Bcl-xL regulates H3K4me3 modification are not understood. Here, we report that C-terminal Binding Protein 2 (CtBP2) binds Bcl-xL via its N-terminus and translocates Bcl-xL into the nucleus. Knockdown of CtBP2 by shRNA decreases the nuclear portion of Bcl-xL and reverses Bcl-xL-induced cell migration and metastasis in mouse models. Furthermore, knockout of CtBP2 suppresses Bcl-xL transcription. The binding between Bcl-xL and CtBP2 is required for their interaction with MLL1, a histone H3K4 methyltransferase. Pharmacologic inhibition of MLL1 enzymatic activity reverses Bcl-xL-induced H3K4me3 and TGFβ mRNA upregulation as well as cell invasion. Moreover, cleavage under targets and release using nuclease (CUT&RUN) coupled with next generation sequencing reveals that H3K4me3 modifications are particularly enriched in the promotor region of genes encoding TGFβ and its signaling pathway in the cancer cells overexpressing Bcl-xL. Altogether, the metastatic function of Bcl-xL is mediated by its interaction with CtBP2 and MLL1.

Abstract The incidence of pancreatic neuroendocrine tumor (PNET) has continued to rise. Due to their indolent feature, PNET patients often present with incurable, metastatic diseases. Novel therapies are urgently needed. We have previously shown that Receptor for Hyaluronic Acid-Mediated Motility isoform B (RHAMM B ) and Bcl-xL are upregulated in PNETs and both of them promote PNET metastasis. Because RHAMM protein is undetectable in most adult tissues, we hypothesized that RHAMM B could be a gateway for nanomedicine delivery into PNETs. To test this, we developed RHAMM B -targeting nanoparticle. Inside this nanoparticle, we assembled siRNA against Bcl-xL (siBcl-xL) and mitochondria-fusing peptide KLA. We demonstratsed that RHAMM B -positive PNETs picked up the RHAMM B -targeting nanoparticles. siBcl-xL or KLA alone only killed 30% of PNET cells. In contrast, a synergistic killing effect was achieved with the co-delivery of siBcl-xL and KLA peptide in vitro . Unexpectedly, siBcl-xL induced cell death before reducing Bcl-xL protein levels. The systemically-injected RHAMM B -targeting nanoparticles carrying siBcl-xL and KLA peptide significantly reduced tumor burden in mice bearing RHAMM B -positive PNETs. Together, these findings indicate that the RHAMM B -targeting nanotherapy serves as a promising drug delivery system for PNET and possibly other malignancies upregulating RHAMM B . The combination of siBcl-xL and KLA peptide can be a therapy for PNET treatment.