Proteasomes are essential for protein homeostasis in mammalian cells1-4 and in protozoan parasites such as Trichomonas vaginalis (Tv).5Tv and other protozoan 20S proteasomes have been validated as druggable targets.6-8 However, in the case of Tv 20S proteasome (Tv20S), biochemical and structural studies were impeded by low yields and purity of the native proteasome. We successfully made recombinant Tv20S by expressing all seven α and seven β subunits together with the Ump-1 chaperone in insect cells. We isolated recombinant proteasome and showed that it was biochemically indistinguishable from the native enzyme. We confirmed that the recombinant Tv20S is inhibited by the natural product marizomib (MZB)9 and the recently developed peptide inhibitor carmaphycin-17 (CP-17)8,10. Specifically, MZB binds to the β1, β2 and β5 subunits, while CP-17 binds the β2 and β5 subunits. Next, we obtained cryo-EM structures of Tv20S in complex with these covalent inhibitors at 2.8Å resolution. The structures revealed the overall fold of the Tv20S and the binding mode of MZB and CP-17. Our work explains the low specificity of MZB and higher specificity of CP-17 towards Tv20S as compared to human proteasome and provides the platform for the development of Tv20S inhibitors for treatment of trichomoniasis.

Feral cattle (Bos taurus) live in socially stable herds. Due to farm management practices, intensively managed dairy cows experience frequent regrouping, which can disrupt affiliative bonds and induce social stress. This study examines how changes in herd composition affect milk yield and udder health traits in resident dairy cows exposed to the withdrawal of herd members or the introduction of new individuals. Milk yield, electrical conductivity, and blood presence in milk were measured in 798 cows using precision dairy sensors over 9 years. Milk yield decreased significantly (p < 0.001) one day after the removal of familiar herd members, while introducing cows had no effect. A higher number of cows being withdrawn (up to 10) was associated with reduced milk yield (p < 0.001), elevated milk electrical conductivity (p = 0.01), and an increased prevalence of blood presence in milk (p = 0.01), which can indicate potential udder health issues linked to social stress. Holstein Friesian, primiparous, and first-lactation-stage cows were more affected than Czech Simental and multiparous cows later in lactation. These findings underscore the influence of social stability on dairy cow welfare and productivity, emphasising the need for strategies to mitigate stress when herd changes are necessary.

Hunting dogs are exposed to the risk of injury in driven hunts, an often-used method for managing growing wild boar numbers. This study investigated the impact of increased hunting pressure—both across the hunting season and within individual hunting events—on the risk of wild boar attacks on hunting dogs, i.e., the length of the hunting season (2.68 ± 0.76 months, mean ± standard deviation), the number of driven hunts per season (3.99 ± 0.43), the intervals between hunts (17.85 ± 4.83 days), the number of wild boars harvested per season (14.46 ± 13.10), and the number of participants (23.8 ± 10.69) and dogs (4.56 ± 2.66) involved per hunt. The data were collected via a retrospective questionnaire survey. The information-theoretic approach (IT-AIC) and GLMM were employed to estimate the factors’ effects on the number of wild boar attacks on dogs reported in 40 hunting grounds in five consecutive hunting seasons (2.60 ± 5.07 attacks per hunting season in a hunting ground). The number of attacks only increased with the length of the hunting season. The best model did not include other factors, such as shorter intervals between hunts, a higher number of driven hunts, wild boars harvested, or participants. The respondents reported 150 injuries by wild boars during 797 driven hunts. Most injuries were mild (73.8%), with fewer severe (18.8%) and fatal (7.4%) cases. Further investigation into wild boar and hunting dog interactions is necessary for constructing strategies to improve hunting practices and reduce dog injury risks.