Abstract Global amphibian declines are largely driven by deadly disease outbreaks caused by the chytrid fungus, Batrachochytrium dendrobatidis ( Bd ). In the time since these disease outbreaks were first discovered, much has been learned about the roles of amphibian skin-produced antimicrobial components and skin microbiomes in controlling Bd . Yet almost nothing is known about the roles of skin-resident immune cells in anti- Bd defenses. Notably, mammalian mast cells reside within and serve as key immune sentinels in barrier tissues like the skin. Thus, they are critical to immune recognition of pathogens and to orchestrating the ensuing immune responses. Accordingly, we investigated the roles of Xenopus laevis frog mast cells during Bd infections. Our findings indicate that enrichment of X. laevis skin mast cells confers significant anti- Bd protection and ameliorates the inflammation-associated skin damage caused by Bd infection. Moreover, enriching X. laevis mast cells promotes greater mucin content within cutaneous mucus glands and protects frogs from Bd -mediated changes to their skin microbiomes. Together, this work underlines the importance of amphibian skin-resident immune cells in anti- Bd defenses and introduces a novel approach for investigating amphibian host-chytrid pathogen interactions.

Abstract Background Arboviral diseases including dengue and chikungunya are major public health concern in Bangladesh, with unprecedented levels of transmission reported in recent years. The primary approach to control these diseases is control of Aedes aegypti using pyrethroid insecticides. Although chemical control is long-practiced, no comprehensive analysis of Ae. aegypti susceptibility to insecticides has previously been conducted. This study aimed to determine the insecticide resistance status of Ae. aegypti in Bangladesh and investigate the role of detoxification enzymes and altered target site sensitivity as resistance mechanisms. Methods Aedes eggs were collected using ovitraps from five districts across the country and in eight neighborhoods of the capital city Dhaka from August to November 2017. CDC bottle bioassays were conducted for permethrin, deltamethrin, malathion, and bendiocarb using 3-5-day old F 0 -F 2 non-blood fed female mosquitoes. Biochemical assays were conducted to detect metabolic resistance mechanisms and real-time PCR was performed to determine the frequencies of the knockdown resistance ( kdr ) mutations Gly1016, Cys1534, and Leu410. Results High levels of resistance to permethrin were detected in all Ae. aegypti populations, with mortality ranging from 0 – 14.8% at the diagnostic dose. Substantial resistance continued to be detected against higher (2X) doses of permethrin (5.1 – 44.4% mortality). Susceptibility to deltamethrin and malathion varied between populations while complete susceptibility to bendiocarb was observed in all populations. Significantly higher levels of esterase and oxidase activity were detected in most of the test populations as compared to the susceptible reference Rockefeller strain. A significant association was detected between permethrin resistance and the presence of Gly1016 and Cys1534 homozygotes. The frequency of kdr alleles varied across the Dhaka populations, and Leu410 was not detected in any of the tested populations. Conclusions The detection of widespread pyrethroid resistance and multiple mechanisms highlights the urgency for implementing alternate Ae. aegypti control strategies. In addition, implementing routine monitoring of insecticide resistance in Ae. aegypti in Bangladesh will lead to a greater understanding of susceptibility trends over space and time, thereby enabling the development of improved control strategies.