For women, menopausal transition is a time of significant hormonal changes, which may contribute to altered body composition and regional adipose tissue accumulation. Excess adiposity, and especially adipose tissue accumulation in the central body region, increases women's risk of cardiovascular and metabolic conditions and affects physical functioning. We investigated the associations between menopausal progression and total and regional body adiposity measured with dual-energy X-ray absorptiometry and computed tomography in two longitudinal cohort studies of women aged 47-55 (n = 230 and 148, mean follow-up times 1.3 ± 0.7 and 3.9 ± 0.2 years, mean baseline BMI 25.5 kg/m2 ). We also examined associations between menopausal progression and skeletal muscle fiber characteristics, as well as adipose tissue-derived adipokines. Relative increases of 2%-14% were observed in regional and total body adiposity measures, with a pronounced fat mass increase in the android area (4% and 14% during short- and long-term follow-ups). Muscle fiber oxidative and glycolytic capacities and intracellular adiposity were not affected by menopause, but were differentially correlated with total and regional body adiposity at different menopausal stages. Menopausal progression and regional adipose tissue masses were positively associated with serum adiponectin and leptin, and negatively associated with resistin levels. Higher diet quality and physical activity level were also inversely associated with several body adiposity measures. Therefore, healthy lifestyle habits before and during menopause might delay the onset of severe metabolic conditions in women.

Abstract Aims and methods Our aim was to characterise the methylation level of a polymorphically imprinted gene, VTRNA2-1 / nc886 , in human populations and somatic tissues. We utilised 48 datasets, consisting of >30 different tissues and >30 000 individuals. Results We show that the nc886 methylation status is associated with twin status and ethnic background, but the variation between populations is limited. Monozygotic twin pairs present concordant methylation, while ∼30% of dizygotic twin pairs present discordant methylation in the nc886 locus. The methylation levels of nc886 are uniform across somatic tissues, except in cerebellum and skeletal muscle. Conclusion We hypothesize that the nc886 imprint is established in the oocyte and that after implantation, the methylation status is stable, excluding a few specific tissues.

SUMMARY Decreased systemic estrogen levels (i.e., menopause) affect metabolic health. However, the detailed mechanisms underlying this process remain unclear. Both estrogens and exercise have been shown to improve metabolic health, which may be partly mediated by circulating microRNA (c-miR) signaling. In recent years, extracellular vesicles (EV) have increased interest in the field of tissue crosstalk. However, in many studies on EV-carried miRs, the co-isolation of high-density lipoprotein (HDL) particles with EVs has not been considered, potentially affecting the results. Here, we demonstrate that EV and HDL particles have distinct small RNA (sRNA) content, including both host and nonhost sRNAs. Exercise caused an acute increase in relative miR abundancy in EVs, whereas in HDL particles, it caused an increase in transfer RNA-derived sRNA. Furthermore, we demonstrate that estrogen deficiency caused by menopause blunts acute exercise-induced systemic miR-response in both EV and HDL particles. HIGHLIGHTS Extracellular vesicles and HDL particles have a distinct sRNA content Extracellular vesicles and HDL particles carry both host and nonhost sRNA cargo Estrogen deficiency blunts the c-miR-response induced by acute exercise Exercise responsive miRs in HT users may regulate the choice of energy substrate

Abstract MicroRNAs (miRs) are non-coding RNA-molecules that regulate gene expression. Global circulating miR (c-miR) expression patterns (c-miRnome) change with carcinogenesis in various sporadic cancers. Therefore, aberrantly expressed c-miRs could have diagnostic, predictive and prognostic potential in molecular profiling of cancers. c-miR functions in carriers of inherited pathogenic mismatch-repair gene variants ( path_MMR ), also known as Lynch syndrome (LS), have remained understudied. LS cohort provides an ideal population for biomarker mining due to increased lifelong cancer risk and excessive cancer occurrence. Using high-throughput sequencing and bioinformatic approaches, we conducted an exploratory analysis to characterize systemic c-miRnomes of path_MMR carriers. Our discovery cohort included 81 healthy path_MMR carriers and 37 non-LS controls. Our analysis also included cancer cohort comprised of 13 path_MMR carriers with varying cancers and 24 sporadic rectal cancer patients. We showed for the first time that c-miRnome can discern healthy path_MMR carriers from non-LS controls but does not distinguish healthy path_MMR carriers from cancer patients with or without path_MMR . Our c-miR expression analysis combined with in silico tools suggest ongoing alterations of biological pathways shared in LS and sporadic carcinogenesis. We observed that these alterations can produce a c-miR signature which can be used to track oncogenic stress in cancer-free path_MMR carriers. Thus, c-miRs hold potential in monitoring which cancer patients would require more intensive surveillance or clinical management. Significance C-miRnome can discern between healthy persons with or without path_MMR but does not distinguish healthy path_MMR carriers from cancer patients with or without path_MMR , indicating an ongoing alteration of biological pathways that can be used to track oncogenic stress at cancer-free state.

ABSTRACT Context It remains uncertain whether aging before late adulthood and menopause are associated with fat-free mass and fat mass–adjusted resting energy expenditure (REE adj ). Objectives We investigated whether REE adj differs between middle-aged and younger women and between middle-aged women with different menopausal statuses. We repeated the age group comparison between middle-aged mothers and their daughters to partially control for genotype. We also explored whether serum estradiol and follicle-stimulating hormone concentrations explain REE adj in midlife. Methods We divided 120 women, including 16 mother–daughter pairs, into age groups; group I ( n = 26) consisted of participants aged 17–21, group II ( n = 35) of those aged 22–38 and group III ( n = 59) of those aged 41–58 years. The women in group III were further categorized as pre- or perimenopausal ( n = 19), postmenopausal ( n = 30) or postmenopausal hormone therapy users ( n = 10). REE was assessed using indirect calorimetry, body composition using dual-energy X-ray absorptiometry and hormones using immunoassays. Results The REE adj of group I was 126 kcal/d (95% CI: 93–160) higher than that of group III, and the REE adj of group II was 88 kcal/d (95% CI: 49–127) higher. Furthermore, daughters had a 100 kcal/d (95% CI: 63–138 kcal/d) higher REE adj than their middle-aged mothers (all P < 0.001). In group III, REE adj was not lower in postmenopausal women and did not vary by sex hormone concentrations. Conclusions We demonstrated that REE adj declines with age in women before late adulthood, also when controlling partially for genetic background, and that menopause may not contribute to this decline.

Menopause is associated with unfavorable changes in body composition. Skeletal muscle cells are targets of hormonal regulation and are affected by the interplay between coding and non-coding RNAs. Muscle transcriptome, including messenger-RNA (mRNA), long non-coding RNAs (lncRNAs) and microRNAs (miRNAs) has not previously been studied in women during the menopausal transition. Thus, we took a multi-RNA omics approach to get insight into transcriptome-wide events of menopause. Our study included baseline and follow-up muscle samples from seven early (EarlyMT) and 17 late perimenopausal (LateMT) women transitioning to early postmenopause during the study. Total RNA was sequenced and differential expression (DE) of the transcriptome was investigated. The potential gene functions were investigated with pathway analyses and protein level expression with Western Blot. We found 30 DE mRNA genes in EarlyMT and 19 in LateMT participating in pathways controlling cell death, growth, and interactions with external environment. Lack of protein level changes may indicate a specific role of the regulatory RNAs during menopause. Ten DE lncRNA transcripts were identified but did not result in DE lncRNAs genes. No DE miRNAs were found. Despite the lack of DE findings in regulatory RNAs, we identified putative regulatory networks, likely to be affected by estradiol availability. The changes in gene expression were correlated with observed changes in body composition variables, indicating muscularity and adiposity regulators to be affected by menopausal transition. In essence, the observed DE genes and their regulatory networks may offer novel mechanistic insights on factors affecting body composition during and after menopause.

Fat distribution changes with advancing menopause, which predisposes to metabolic inflammation. However, it remains unclear, how health behaviours, including sleeping, eating and physical activity, or their combinations contribute to metabolic inflammation caused by visceral adipose tissue (VAT). The aim of the present study was to examine whether health behaviours are associated with metabolic inflammation and whether VAT mediates these associations in menopausal women. This cross-sectional study consisted of a sample of middle-aged women (n = 124). Health behaviours were assessed by self-report questionnaire with measures of sleeping, eating (Eating Disorder Examination Questionnaire, EDE-Q), and physical activity behaviours. Metabolic inflammation was measured using GlycA, a composite biomarker of inflammation, and bioimpedance device was used to assess VAT. Structural equation modelling was used to examine the direct and indirect associations of health behaviours with inflammation, as well as the moderation effect of health behaviours on VAT and metabolic inflammation. VAT was directly associated with inflammation. Two indirect pathways were found: eating and physical activity behaviours were both inversely associated with inflammation through VAT, whereas sleeping behaviour was not. Physical activity moderated the association between VAT and metabolic inflammation. The association was stronger in those who were physically less active. Furthermore, eating behaviour and physical activity had an interaction on VAT. Physical activity was negatively associated with VAT among women with normal eating behaviour, but the association was less clear among women with features of disordered eating behaviour. It is possible to impede the menopausal shift to adverse visceral adiposity through increased physical activity and further decrease the risk of metabolic inflammation in menopausal women. The present study offers potential hypotheses for future longitudinal research.

SUMMARY Skeletal muscle mass, strength, and regenerative capacity decline with age, with many measures showing greater deterioration in females about the time estrogen levels decrease at menopause. Here we show that maintenance of muscle stem cells, satellite cells, as well as self-renewal and differentiation into muscle fibers, are severely compromised by estrogen deficiency. Mechanistically, by hormone replacement, use of a selective estrogen-receptor modulator (bazedoxifene), and conditional estrogen receptor knockout, we implicate 17β-estradiol and satellite cell expression of estrogen receptor α (ERα) and show that estrogen signaling through this receptor is necessary to prevent apoptosis of satellite cells. Early data from a biopsy study of women who transitioned from peri-to post-menopause are consistent with the loss of satellite cells coincident with the decline in estradiol in humans. Together, these results demonstrate an important role for estrogen in satellite cell maintenance and muscle regeneration in females.

Abstract Menopause is associated with a proatherogenic shift in serum metabolome and high-density lipoprotein (HDL) particle size distribution. We analyzed lipidomes and proteomes of HDL with nuclear magnetic resonance and mass spectrometry from pre-, peri-, and postmenopausal women to get a deeper insight into the structure of HDL. The S-HDL particles constituted 62% of all HDL particles in perimenopause and 60% in pre- and postmenopause. Perimenopausal HDL had the highest S-HDL lipid content, notably, being enriched in triacylglycerols. This feature is a known risk factor for coronary heart disease. We identified 728 proteins from the purified HDL particles and quantified 44 representing functional classes of lipid metabolism, transport and signaling, immune defense, and regulation of cellular processes. Perimenopausal HDL exhibited fewer apolipoproteins (APOA1, APOA2, APOC1, APOC3, and APOE) per particle than premenopausal. We did not detect menopausal status-associated deteriorations in the LCAT activity or cholesterol efflux capacity, albeit the calculated lipid class ratios suggest defects, especially within perimenopausal XL-HDL particles, potentially affecting the particle size distribution and triacylglycerol content. In summary, menopause is associated with structural differences in HDL potentially compromising the cardioprotective quality of HDL. eTOC summary We found perimenopause to exhibit several summative differences in HDL compared to other menopausal stages, which suggests a compromised anti-atherogenic capacity. This opens a new focus on the perimenopausal phase as a period of change, which may be relevant for the worsened cardiovascular health.