Indirect immunofluorescence of certain human sera demonstrated an antigen(s) in the cytoplasm of 1--5% of the cells of a T-cell line, MT-1, from a patient with adult T-cell leukemia (ATL), which is endemic in southwestern Japan. The antigen was not detected in other human lymphoid cell lines, including six T-cell lines, seven B-cell lines, and four non-T non-B cell lines. The antigen did not show cross antigenicity with that of herpesviruses, including Epstein--Barr virus, herpes simplex virus, cytomegalovirus, varicella-zoster virus, herpesvirus saimiri, and Marek disease virus. The proportion of antigen-bearing cells was increased by a factor of approximately 5 on culture in the presence of 5-iodo-2'-deoxyuridine. Antibodies against the antigen in MT-1 cells were found in all 44 patients with ATL examined and in 32 of 40 patients with malignant T-cell lymphomas (most of them had diseases similar to ATL except that leukemic cells were not found in the peripheral blood). The antibodies were also detected in 26% of the healthy adults examined from ATL-endemic areas but in only a few of those examined from ATL-non-endemic areas. On electron microscopy, extracellular type C virus particles were detected in pelleted MT-1 cells cultured in the presence of 5-iodo-2'-deoxyuridine.

Abstract Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a major neurodegenerative disease for which there is currently no effective treatment. The main feature of the disease is the loss of motor neurons in the central nervous system (CNS), but other CNS components and the immune system also appear to be involved in the pathogenesis of the disease. The blood-brain barrier (BBB) is formed by specialized brain microvascular endothelial cells (BMECs) and plays a crucial role in maintaining homeostasis within the central nervous system (CNS). Autopsy studies have reported BBB abnormalities in ALS patients, and studies in animal models suggest that BBB breakdown may precede neurodegeneration. However, the difficulty of obtaining patient samples has hampered further studies. We used the method of differentiating BMEC-like cells from human induced pluripotent stem cells (hiPSCs), which have robust barrier functions and express adhesion molecules necessary for immune cell adhesion, to investigate BBB functions in ALS patients. We also established a method using automated analysis techniques to analyze immune cell adhesion to the BBB in multiple samples simultaneously and with minimal bias. BMEC-like cells derived from ALS patients carrying TARDBP N345K/WT mutations exhibited increased permeability to small molecules due to loss of tight junction, as well as increased expression of cell surface adhesion molecules, leading to enhanced immune cell adhesion. BMEC-like cells derived from hiPSCs with other types of TARDBP gene mutations ( TARDBP K263E/K263E and TARDBP G295S/G295S ) introduced by genome editing technology did not show such BBB dysfunction compared to the isogenic control. These results indicate that our model can recapitulate BBB abnormalities reported in ALS patients using patient ( TARDBP N345K/WT ) -derived hiPSCs and that two types of missense mutation, TARDBP K263E/K263E and TARDBP G295S/G295S , do not contribute to the BBB dysfunction. This novel ALS patient-derived BBB model is useful for the challenging analysis of the involvement of BBB dysfunction in the pathogenesis and to promote therapeutic drug discovery.

SERCA2b is a Ca2+-ATPase that pumps Ca2+ from the cytosol into the ER and maintains the cellular calcium homeostasis. Herein, we present cryo-EM structures of human SERCA2b in E1·2Ca2+-AMPPCP and E2-BeF3- states at 2.9 and 2.8 Å resolutions, respectively. The structures revealed that the luminal extension tail (LE) characteristic of SERCA2b runs parallel to the lipid-water boundary near the luminal ends of transmembrane (TM) helices TM10 and TM7, and approaches the luminal loop flanked by TM7 and TM8. Upon deletion of the LE, the cytosolic- and TM-domain arrangement of SERCA2b resembled that of SERCA1a, resulting in multiple conformations. The LE regulates the conformational transition between the E1·2Ca2+-ATP and E2P states, explaining the different kinetic properties of SERCA2b from other isoforms lacking the LE.