Abstract Trauma to the knee joint is associated with significant cartilage degeneration and erosion of subchondral bone, which eventually leads to osteoarthritis (OA), resulting in substantial morbidity and healthcare burden. With no disease-modifying drugs in clinics, the current standard of care focuses on symptomatic relief and viscosupplementation. Modulation of autophagy and targeting senescence pathways are emerging as potential treatment strategies. Rapamycin has shown promise in OA disease amelioration by autophagy upregulation, yet its clinical use is hindered by difficulties in achieving therapeutic concentrations, necessitating multiple weekly injections. Here, we have synthesized rapamycin - loaded poly (lactic-co-glycolic acid) microparticles (RMPs) that induced autophagy, prevented senescence and sustained sulphated glycosaminoglycans(sGAG) production in primary human articular chondrocytes from OA patients. RMPs were potent, nontoxic, and exhibited high retention time (up to 35 days) in mice joints. Intra-articular delivery of RMPs effectively mitigated cartilage damage and inflammation in surgery-induced OA when administered as a prophylactic or therapeutic regimen. Together, our studies demonstrate the feasibility of using RMPs as a potential clinically translatable therapy to prevent and treat post-traumatic osteoarthritis. Graphical Abstract

Genetically encoded reporters for magnetic resonance imaging (MRI) offer a valuable technology for making molecular-scale measurements of biological processes within living organisms with high anatomical resolution and whole-organ coverage without relying on ionizing radiation. However, most MRI reporters rely on contrast agents, typically paramagnetic metals and metal complexes, which often need to be supplemented exogenously to create optimal contrast. To eliminate the need for contrast agents, we previously introduced aquaporin-1, a mammalian water channel, as a new reporter gene for the fully autonomous detection of genetically labeled cells using diffusion-weighted MRI. In this study, we aimed to expand the toolbox of diffusion-based genetic reporters by modulating aquaporin membrane trafficking and harnessing the evolutionary diversity of water channels across species. We identified a number of new water channels that functioned as diffusion-weighted reporter genes. In addition, we show that loss-of-function variants of yeast and human aquaporins can be leveraged to design first-in-class diffusion-based sensors for detecting the activity of a model protease within living cells.

Osteoarthritis (OA) is a joint disease that results in progressive destruction of articular cartilage and the adjoining subchondral bone. The current treatment is focused on symptomatic relief due to the absence of disease-modifying drugs. The primary cells of the cartilage, chondrocytes, have limited regenerative capacity and when they undergo stress due to trauma or with aging, they senesce or become apoptotic. Autophagy, a cellular homeostasis mechanism has a protective role in OA during stress but gets downregulated in OA. Rapamycin, a potent immunomodulator, has shown promise in OA treatment by autophagy activation and is known to prevent senescence. However, its clinical translation for OA is hampered due to systemic toxicity as high and frequent doses are required. Hence, there is a need to develop suitable delivery carriers that can result in sustained and controlled release of the drug in the joint. In this study, we have fabricated rapamycin encapsulated poly (lactic-co-glycolic acid) (PLGA) based carriers that induced autophagy and prevented cellular senescence in human chondrocytes. The microparticle (MP) delivery system showed sustained release of drug for several weeks. Rapamycin-microparticles protected in-vitro cartilage mimics from degradation, allowing sustained production of sGAG, and demonstrated a prolonged senescence preventive effect in vitro under oxidative and genomic stress conditions. These microparticles also exhibited a long residence time of more than 19 days in the joint after intra-articular injections in murine knee joints. Such particulate systems are a promising candidate for intra-articular delivery of rapamycin for treatment of osteoarthritis.

Abstract Osteoarthritis (OA) is the most common joint disorder and currently affects > 500 million patients worldwide, with ~60% of them also suffering from obesity. There is no drug approved for human use that changes the course of OA progression. OA is one of the most common comorbidities of obesity, and obesity-related OA (ObOA) is a serious health concern because it shows heightened severity of tissue damage and also predominantly affects the working population. Unresolved inflammation is a major driver of ObOA, thus, resolving disease-associated inflammation is a viable strategy to treat ObOA. Resolvins are highly potent molecules that play a role in the resolution of inflammation and promote tissue healing. However, small molecules (like Resolvin D1; RvD1) have to be administered frequently or prior to injury because they lose their in vivo activity rapidly either by lymphatic clearance, or oxidation-mediated deactivation. In this study, we have encapsulated RvD1 in liposomes and established its efficacy in the mouse model of ObOA at much lower dosages than freely administered RvD1. Liposomal RvD1 (lipo-RvD1) acted as a source of the RvD1 molecules for ~11 days in vitro in synovial fluid derived from patients. When administered prophylactically or therapeutically, lipo-RvD1 suppressed cartilage damage in male C57BL/6 mice compared to untreated and free RvD1 treatments. This efficacy was achieved by increasing the proportion of the proresolution M2 macrophages over proinflammatory M1 macrophages in the synovial membrane. These results show the potential of lipo-RvD1 as an anti-OA agent. Graphical abstract: Mechanism of working of lipo-RvD1 in ObOA joint.