Propolis is a resinous bee product with a very complex composition, which is dependent upon the plant sources that bees visit. Due to the promising antimicrobial activities of red Brazilian propolis, it is paramount to identify the compounds responsible for it, which, in most of the cases, are not commercially available. The aim of this study was to develop a quick and clean preparative-scale methodology for preparing fractions of red propolis directly from a complex crude ethanol extract by combining the extractive capacity of counter-current chromatography (CCC) with preparative HPLC. The CCC method development included step gradient elution for the removal of waxes (which can bind to and block HPLC columns), sample injection in a single solvent to improve stationary phase stability, and a change in the mobile phase flow pattern, resulting in the loading of 2.5 g of the Brazilian red propolis crude extract on a 912.5 mL Midi CCC column. Three compounds were subsequently isolated from the concentrated fractions by preparative HPLC and identified by NMR and high-resolution MS: red pigment, retusapurpurin A; the isoflavan 3(R)-7-O-methylvestitol; and the prenylated benzophenone isomers xanthochymol/isoxanthochymol. These compounds are markers of red propolis that contribute to its therapeutic properties, and the amount isolated allows for further biological activities testing and for their use as chromatographic standards.

Dihydrofolate reductase (DHFR), a key enzyme involved in folate metabolism, is a widely explored target in the treatment of cancer, immune diseases, bacteria and protozoa infections. Although several antifolates have proved successful in the treatment of infectious diseases, none have been developed to combat tuberculosis, despite the essentiality of M. tuberculosis DHFR (MtDHFR). Herein, we describe an integrated fragment-based drug discovery approach to target MtDHFR that has identified hits with scaffolds not yet explored in any previous drug design campaign for this enzyme. The application of a SAR by catalog strategy of an in house library for one of the identified fragments has led to a series of molecules that bind MtDHFR with low micromolar affinities. Crystal structures of MtDHFR in complex with compounds of this series demonstrated a novel binding mode that differs from other DHFR antifolates, thus opening perspectives for the development of novel and relevant MtDHFR inhibitors.

Abstract The Min system is a key spatial regulator of cell division in rod-shaped bacteria and the first FtsZ negative modulator to be recognized. Nevertheless, despite extensive genetic and in vitro studies, the molecular mechanism used by MinC to inhibit Z-ring formation remains incompletely understood. The crystallization of FtsZ in complex with other negative regulators such as SulA and MciZ has provided important structural information to corroborate in vitro experiments and establish the mechanism of Z-ring antagonism by these modulators. However, MinC and FtsZ have so far eluded co-crystallization, probably because their complex is too unstable to be crystallized. To gain structural insight into the mechanism of action of MinC, we determined the solution structure of the N-terminal domain of B. subtilis MinC, and through NMR titration experiments and mutagenesis identified the binding interfaces involved in the MinC N -FtsZ interaction. By using our experimental results as restraints in docking, we also constructed a molecular model for the FtsZ:MinC N complex and validated it by molecular dynamics. The model shows that MinC N binding overlaps with the FtsZ polymerization interface on the C-terminal globular subdomain of FtsZ and, thus, provides a structural basis for MinC N inhibition of FtsZ filament formation. Given that the C-terminal polymerization interface of FtsZ corresponds to the plus end of FtsZ filaments, we propose that capping is the main mechanism employed by MinC to antagonize FtsZ polymerization.

Abstract Background Schizophrenia (SCZ) is a severe mental disorder of multifactorial origin in which the role of amino acids is relatively unknown. Based on the hypothesis that there is an imbalance in amino acid levels in individuals with SCZ compared with healthy controls (HCs), the aim of this study was to identify the 20 proteinogenic amino acids involved in protein synthesis. Methods This study included 43 sex‐ and age‐matched individuals: 20 HCs and 23 with SCZ diagnosed using the Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders criteria. Using proton nuclear magnetic resonance, we identified the serum levels of the 20 amino acids proteinogenic. We perform multivariate statistical exploratory analyzes to identify compounds, quantify, and identify the main biomarkers of SCZ. Results We identified the serum levels of 19 of the 20 amino acids. Cysteine, the main precursor of glutathione, was not detected. Multivariate exploratory analysis identified lysine, Tryptophan (TRP), and glutamate as possible biomarkers of SCZ. Both lysine and TRP levels were lower and glutamate levels were higher in individuals with SCZ than in HCs. The observed reduction in plasma TRP levels in SCZ was attributed to the activation of the kynurenine pathway and has implications for serotonin synthesis. A strong positive correlation was observed between lysine and TRP, and a weak negative correlation between lysine and glutamate. This result is consistent with the lysine catalysis process because lysine degradation generates glutamate and favors an increase in dopamine. Conclusions The results are consistent with the lysine catalysis process because lysine degradation generates glutamate and favors an increase in dopamine. We were unable to identify any studies suggesting a relationship between lysine catabolism and SCZ pathophysiology, but we recognize this association as innovative.