The control of transcription is crucial for homeostasis in mammals. A previous selective sweep analysis of horse racing performance revealed a 19.6 kb candidate regulatory region 50 kb downstream of the Endothelin3 ( EDN3 ) gene. Here, the region was narrowed to a 5.5 kb span of 14 SNVs, with elite and sub-elite haplotypes analyzed for association to racing performance, blood pressure and plasma levels of EDN3 in Coldblooded trotters and Standardbreds. Comparative analysis of human HiCap data identified the span as an enhancer cluster active in endothelial cells, interacting with genes relevant to blood pressure regulation. Coldblooded trotters with the sub-elite haplotype had significantly higher blood pressure compared to horses with the elite performing haplotype during exercise. Alleles within the elite haplotype were part of the standing variation in pre-domestication horses, and have risen in frequency during the era of breed development and selection. These results advance our understanding of the molecular genetics of athletic performance and vascular traits in both horses and humans.

Abstract Apolipoprotein-B (APOB) containing lipoproteins are causative for atherosclerotic cardiovascular disease. Whether the vasculature is the initial responding site or if atherogenic-dyslipidemia effects other organs simultaneously is unknown. We set out to discover how the liver responds to a dyslipidemic insult through the creation of inducible mouse models based on human familial hypercholesterolemia mutations and in vivo tracing of APOB. An acute transition to atherogenic APOB-lipoprotein plasma levels resulted in rapid accumulation of triglycerides and cholesterol in the liver. Single cell RNA-seq and flow cytometry disclosed that multiple immune cells have the ability to engulf APOB-lipoproteins. However bulk RNA-seq of the liver revealed an inflammatory Kupffer cell-specific transcriptional program that could not be activated by a western diet alone. Depletion of Kupffer cells through clodronate liposomes or CD8 T cell targeting rapidly raised plasma lipoprotein levels, indicating that these liver macrophages help restrain and buffer atherogenic lipoproteins, whilst simultaneously secreting pro-atherosclerotic factors into plasma. Our results place Kupffer cells as a key gateway in organizing systemic responses at the initiation of atherosclerosis.

Endothelial cells (ECs) are constantly exposed to mechanical forces in the form of fluid shear stress, extracellular stiffness, and cyclic strain. How these forces are sensed by ECs remains an understudied aspect in the homeostatic regulation of the circulatory system. Angiomotin-like 2 (AmotL2) is localised to EC junctions and is required for alignment and actin reorganisation under conditions of high shear stress. Here we show that AmotL2 crucially regulates transcription and promotor activity of the YAP gene. Functionally, density-dependent proliferation of ECs in vitro and proliferation of a subpopulation of ECs within the inner aortic arch, were both reliant on AmotL2 and Yap/Taz endothelial expression in vivo . Mechanistically, depletion of AmotL2 led to altered nuclear morphology, chromatin accessibility and suppression of YAP-promotor activity through increased H3K27me3 mediated by the polycromb repressive complex component EZH2. Our data describe a previously unknown role for junctional mechanotransduction in shaping the epigenetic landscape and transcriptional regulation of YAP in vascular homeostasis.

Abstract Background and objectives Statins are used for metabolic dysfunction‐associated steatotic liver disease (MASLD) (NAFLD) treatment, but their role in this context is unclear. Genetic variants of patatin‐like phospholipase domain containing 3 ( PNPLA3 ) are associated with MASLD susceptibility and statin treatment efficacy. Access to liver biopsies before established MASLD is limited, and statins and PNPLA3 in early liver steatosis are thus difficult to study. Methods Liver biopsies were collected from 261 patients without known liver disease at surgery and stratified based on statin use and criteria for the metabolic syndrome (MS). Genotypes and transcript levels were measured using Illumina and Affymetrix arrays, and metabolic and lipoprotein profiles by clinical assays. Statin effects on PNPLA3, de novo lipogenesis (DNL), and lipid accumulation were further studied in vitro. Results The PNPLA3 I148M genetic variant was associated with significantly lower hepatic levels of cholesterol synthesis‐associated transcripts. Patients with MS had significantly higher hepatic levels of MASLD and lipogenesis‐associated transcripts than non‐MS patients. Patients with MS on statin therapy had significantly higher hepatic levels of PNPLA3 , acetyl‐CoA carboxylase alpha, and ATP citrate lyase, and statin use was associated with higher plasma fasting glucose, insulin, and HbA1c. Exposure of hepatocyte‐like HepG2 cells to atorvastatin promoted intracellular accumulation of triglycerides and lipogenesis‐associated transcripts. Atorvastatin‐exposure of HepG2, sterol O ‐acyltransferase (SOAT) 2 ‐only‐HepG2, primary human hepatic stellate, and hepatic stellate cell‐like LX2 cells significantly increased levels of PNPLA3 and SREBF2‐target genes, whereas knockdown of SREBF2 attenuated this effect. Conclusions Collectively, these observations suggest statin‐associated regulation of PNPLA3 and DNL in liver. The potential interaction between PNPLA3 genotype and metabolic status should be considered in future studies in the context of statin therapy for MASLD.

Abstract Aneurysm rupture is a life-threatening event, yet its underlying mechanisms remain largely unclear. This study investigated the fracture properties of the thoracic aneurysmatic aorta (TAA) using the symmetry-constraint Compact Tension (symconCT) test and compared results to native and enzymatic-treated porcine aortas’ tests. With age, the aortic stiffness increased, and tissues ruptured at lower fracture energy $$D$$ . Patients with bicuspid aortic valves were more sensitive to age, had stronger aortas and required more $$D$$ than tricuspid valves individuals (peak load: axial loading 4.42 $$\pm$$ 1.56 N vs 2.51 $$\pm$$ 1.60 N; circumferential loading 5.76 $$\pm$$ 2.43 N vs 4.82 $$\pm$$ 1.49 N. Fracture energy: axial loading 1.92 $$\pm$$ 0.60 kJ m -2 vs 0.74 $$\pm$$ 0.50 kJ m -2 ; circumferential loading 2.12 $$\pm$$ 2.39 kJ m -2 vs 1.47 $$\pm$$ 0.91 kJ m -2 ). Collagen content partly explained the variability in $$D$$ , especially in bicuspid cases. Besides the primary crack, TAAs and enzymatic-treated porcine aortas displayed diffuse and shear-dominated dissection and tearing. As human tissue tests resembled enzymatic-treated porcine aortas, microstructural degeneration, including elastin loss and collagen degeneration, seems to be the main cause of TAA wall weakening. Additionally, a tortuous crack developing during the symconCT test reflected intact fracture toughening mechanisms and might characterize a healthier aorta.

Motivation: Hemodynamics and circulating biomarkers could offer urgently needed improved risk-stratification in individuals with aortic dilation. Goal(s): To explore correlations between hemodynamics markers measured with 4D Flow MRI and circulating biomarkers in aortic dilation individuals with tricuspid aortic valves. Approach: Wall shear stress (WSS) parameters were assessed from 4D flow MRI in cases with dilation and controls. Blood plasma samples were used to quantify the inflammation biomarker IL-6 and several extracellular matrix biomarkers including collagen type I α1 chain (COL1α1). Results: IL-6 correlated to time-averaged WSS (r=0.54, p<0.001), whereas COL1α1 correlated to the oscillatory shear index (r=0.61, p<0.001). Impact: The observed correlations between 4D Flow MRI-derived wall shear stress and circulating biomarkers of inflammation and collagen synthesis raises the intriguing possibility that altered aortic hemodynamics causes biomarker leakage from the aortic tissue into the circulation.