Abstract IL-10 producing group 2 innate lymphoid cells (ILC2 10 ) have immunoregulatory functions, and limit harmful immune responses across various tissues. Despite their crucial roles in maintaining immune homeostasis, the cell therapy potential of human ILC2 10 has not been demonstrated, due to both limited numbers in human peripheral blood and lack of definitive markers for identification. Here, we isolate and expand circulating human ILC2 10 , and assess their cell therapy potential in a humanized model of Graft-versus-Host Disease (GVHD). Cell therapy with human ILC2 10 decreased GVHD severity and prolonged survival of NOD- scid IL2Rγ null (NSG) mice. Adoptive transfer of ILC2 10 inhibited pathogenic T cell proliferation and intestinal infiltration, and suppressed CD4 + Th1 and CD8 + Tc1 cells in an IL-4 and IL-10 dependent manner. Critically, increased proportions of ILC2s did not correlate with higher rates of cancer relapse in HSCT recipients, and adoptive transfer of ILC2 10 did not compromise graft-versus-leukemic (GVL) effects in a humanized model. Finally, we identify CD49d and CD86 as novel markers that discriminate ILC2 10 from conventional ILC2s. Collectively, these findings demonstrate the potential of harnessing ILC2 10 in cell therapies for GVHD and other immune-driven pathologies.

Post-transplant cyclophosphamide (PTCy) is a promising graft-versus-host disease (GvHD) prophylaxis in haploidentical and matched unrelated donor hematopoietic stem cell transplantation (HSCT), but its role in matched sibling donor (MSD) transplants remains unclear.We conducted a retrospective study of 413 MSD-HSCT patients receiving peripheral blood stem cell (PBSC) grafts from January 2010 to January 2023. Patients were categorized into four groups: Group I (CNI + MTX or MMF), Group II (CNI + MTX or MMF + ATG), Group III (PTCy + ATG + CNI), and Group IV (PTCy + CNI + MMF). PTCy was associated with a significant reduction in grade II-IV [HR 0.6, p=0.01] and grade III-IV acute GvHD [HR 0.2, p=0.001] as well as all grade chronic GvHD [HR 0.5, p=0.007] and moderate-severe chronic GvHD [HR 0.4, p=0.001] compared to CNI+MTX (or MMF) containing regimens. PTCy did not increase relapse risk; PTCy reduced NRM [HR 0.3, p<0.002], leading to improved GvHD-free/relapse-free survival (GRFS) [HR 0.4, p<0.001]. PTCy was also associated with improved overall survival [HR 0.56, p=0.01]. Bloodstream infections are increased with PTCy [HR: 1.5, p=0.001]. The addition of ATG to PTCy did not further improve the GRFS and was associated with a higher incidence of clinically significant Cytomegalovirus (CMV) [HR 2.16, p=0.002] and Epstein-Barr virus reactivation (EBV) [HR 9.5, p<0.001] and a numerical increase in NRM [HR 1.7, p=0.2]. PTCy significantly appeared to improve GRFS in the MSD setting using PBSC grafts. The addition of ATG to PTCy increases csCMV and csEBV reactivation without further improving GRFS. Prospective trials and PTCy dose optimization are warranted.