Abstract The mechanistic target of rapamycin (mTORC1) is a nutrient responsive protein kinase complex that helps co-ordinate anabolic processes across all tissues. There is evidence that signaling through mTORC1 in skeletal muscle may be a determinant of energy expenditure and aging and therefore components downstream of mTORC1 signaling may be potential targets for treating obesity and age-associated metabolic disease. Here, we generated mice with Ckmm-Cre driven ablation of Tsc1 , which confers constitutive activation of mTORC1 in skeletal muscle and performed unbiased transcriptional analyses to identify pathways and candidate genes that may explain how skeletal muscle mTORC1 activity regulates energy balance and aging. Activation of skeletal muscle mTORC1 produced a striking resistance to diet-and age-induced obesity without inducing systemic insulin resistance. We found that increases in energy expenditure following a high fat diet were mTORC1-dependent and that elevated energy expenditure caused by ablation of Tsc1 coincided with the upregulation of skeletal muscle-specific thermogenic mechanisms that involve sarcolipin-driven futile cycling of Ca 2+ through SERCA2. Additionally, we report that constitutive activation of mTORC1 in skeletal muscle reduces lifespan. These findings support the hypothesis that activation of mTORC1 and its downstream targets, specifically in skeletal muscle, may play a role in nutrient-dependent thermogenesis and aging.

Abstract Obesity is associated with chronic multi-system bioenergetic stress that may be improved by increasing the number of healthy mitochondria available across organ systems. However, treatments capable of increasing mitochondrial content are generally limited to endurance exercise training paradigms, which are not always sustainable long-term, let alone feasible for many patients with obesity. Recent studies have shown that local transfer of exogenous mitochondria from healthy donor tissues can improve bioenergetic outcomes and alleviate the effects of tissue injury in recipients with organ specific disease. Thus, the aim of this project was to determine the feasibility of systemic mitochondrial transfer for improving energy balance regulation in the setting of diet-induced obesity. We found that transplantation of mitochondria from lean mice into mice with diet-induced obesity attenuated adiposity gains by increasing energy expenditure and promoting the mobilization and oxidation of lipids. Additionally, mice that received exogenous mitochondria demonstrated improved glucose uptake, greater insulin responsiveness, and complete reversal of hepatic steatosis. These changes were, in part, driven by adaptations occurring in white adipose tissue. Together, these findings are proof-of-principle that mitochondrial transplantation is an effective therapeutic strategy for limiting the deleterious metabolic effects of diet-induced obesity in mice.

Abstract Insufficient physical activity is associated with increased relative risk of cardiometabolic disease and is an independent risk factor for mortality. Experimentally reducing physical activity rapidly induces insulin resistance, impairs glucose handling, and drives metabolic inflexibility. These adaptations manifest during the early stages of physical inactivity, even when energy balance is maintained, suggesting that inactivity‐mediated metabolic reprogramming is an early event that precedes changes in body composition. To identify mechanisms that promote metabolic adaptations associated with physical inactivity, we developed a mouse model of physical activity reduction that permits the study of inactivity in animals prior to the onset of overt changes in body composition. Adult mice were randomized into three groups: an inactive control group (standard rodent housing), an active control group (treadmill running 5 d/week for 6‐weeks), and an activity reduction group (treadmill running for 4‐weeks, followed by 2‐weeks of inactivity). Transcriptional profiling of gastrocnemius muscle identified seven transcripts uniquely altered by physical activity reduction compared to the inactive and active control groups. Most identified transcripts had reported functions linked to bioenergetic adaptation. Future studies will provide deeper characterization of the function(s) of each the identified transcripts while also determining how inactivity affects transcriptional regulation in other tissues.

Summary Almost all effective treatments for non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) involve reduction of adiposity, which suggests the metabolic axis between liver and adipose tissue is essential to NAFLD development. Since excessive dietary sugar intake may be an initiating factor for NAFLD, we have characterized the metabolic effects of liquid sucrose intake at concentrations relevant to typical human consumption in mice. We report that sucrose intake induces sexually dimorphic effects in liver, adipose tissue, and the microbiome; differences concordant with steatosis severity. We show that when steatosis is decoupled from impairments in insulin responsiveness, sex is a moderating factor that influences sucrose-driven lipid storage and the contribution of de novo fatty acid synthesis to the overall hepatic triglyceride pool. Our findings provide physiologic insight into how sex influences the regulation of adipose-liver crosstalk and highlight the importance of extrahepatic metabolism in the pathogenesis of diet-induced steatosis and NAFLD.

Objective: To determine the effects of glucocorticoid-induced metabolic dysfunction in the presence of diet-induced obesity. Methods: C57BL/6J adult male lean and diet-induced obese mice were given dexamethasone for different durations and levels of hepatic steatosis, insulin resistance and lipolysis were determined. Results: Obese mice given dexamethasone had significant, synergistic effects on insulin resistance and markers of lipolysis, as well as hepatic steatosis. This was associated with synergistic transactivation of the lipolytic enzyme ATGL. Conclusions: The combination of chronically elevated glucocorticoids and obesity leads to exacerbations in metabolic dysfunction. Our findings suggest lipolysis may be a key player in glucocorticoid-induced insulin resistance and fatty liver in individuals with obesity.

ABSTRACT Genome-wide association studies identified single nucleotide polymorphisms on chromosome 7 upstream of KLF14 to be associated with metabolic syndrome traits and increased risk for Type 2 Diabetes (T2D). The associations were more significant in women than in men. The risk allele carriers expressed lower levels of the transcription factor KLF14 in adipose tissues than non-risk allele carriers. To investigate how adipocyte KLF14 regulates metabolic traits in a sex-dependent manner, we characterized high-fat diet fed male and female mice with adipocyte-specific Klf14 deletion or overexpression. Klf14 deletion resulted in increased fat mass in female mice and decreased fat mass in male mice. Female Klf14- deficient mice had overall smaller adipocytes in subcutaneous fat depots but larger adipocytes in parametrial depots, indicating a shift in lipid storage from subcutaneous to visceral fat depots. They had reduced metabolic rates and increased respiratory exchange ratios consistent with increased utilization of carbohydrates as an energy source. Fasting and isoproterenol-induced adipocyte lipolysis was defective in female Klf14- deficient mice and concomitantly adipocyte triglycerides lipase mRNA levels were downregulated. Female Klf14- deficient mice cleared blood triglyceride and NEFA less efficiently than wild type. Finally, adipocyte-specific overexpression of Klf14 resulted in lower total body fat in female but not male mice. Taken together, consistent with human studies, adipocyte KLF14 deficiency in female but not in male mice causes increased adiposity and redistribution of lipid storage from subcutaneous to visceral adipose tissues. Increasing KLF14 abundance in adipocytes of females with obesity and T2D may provide a novel treatment option to alleviate metabolic abnormalities.

Abstract Alström syndrome (AS) is a rare multi-system disorder for which early-onset childhood obesity is a cardinal feature. Like humans with AS, animal models with Alms1 loss-of-function mutations develop obesity, supporting the notion that ALMS1/Alms1 is required for the regulatory control of energy balance across species. This study aimed to determine which component(s) of energy balance are reliant on Alms1. Here, we performed comprehensive energy balance phenotyping Alms1 tvrm102 mice at both eight- and eighteen-weeks-of-age. We found that adiposity gains occurred early and rapidly in Alms1 tvrm102 male mice but much later in females. Rapid increases in body fat in males was due to a marked reduction in energy expenditure (EE) during early life and not due to any genotype-specific increases in energy intake under chow conditions. Energy intake did increase in a genotype-specific manner when mice were provided a high-fat-diet, exacerbating the effects of reduced EE on obesity progression. The EE deficit observed in male Alms1 tvrm102 mice did not persist as mice aged, suggesting loss of Alms1 either causes a developmental delay in the mechanisms controlling early life EE, or that activation of compensatory mechanisms occurs after obesity is established. Future studies will determine how ALMS1/Alms1 modulates EE and how sex moderates this process.