Summary Antigen classes other than proteins can be presented to T cells by near-monomorphic antigen-presenting molecules such as CD1, MR1, and butyrophilin 3A1. We sought to define the roles of donor unrestricted T (DURT) cells, including MR1-reactive MAIT cells, CD1b-reactive glucose monomycolate (GMM)-specific T cells, CD1d-reactive NKT cells, and γδ T cells, in vaccination against Mycobacterium tuberculosis . We characterized DURT cells following primary bacille Calmette-Guerin (BCG) vaccination in infants or BCG-revaccination in adults. BCG (re)vaccination did not modulate peripheral blood frequencies, T cell activation or memory profiles of MAIT cells, CD1b-restricted GMM-specific and germline-encoded mycolyl-reactive (GEM) cells or CD1d- restricted NKT cells. By contrast, BCG vaccination was associated with increased frequencies of γδ T cells as well as a novel subset of IFN-γ-expressing CD4 + T cells with a CD26 + CD161 + TRAV1-2 − phenotype in infants. More studies are required to understand the full potential of DURT cells in new TB vaccine strategies.

MR1-restricted T cells (MR1Ts) are a T cell subset that recognizes and mediate host immune responses to a broad array of microbial pathogens, including Mycobacterium tuberculosis . Here, we sought to characterize development of circulating human MR1T cells, defined by MR1-5-OP-RU tetramer labelling and expression of TRAV1-2/CD26/CD161. We analyzed postnatal expansion, maturation and functionality of peripheral blood MR1T cells in cohorts from three different geographic settings with different TB vaccination practices, levels of exposure to and infection with M. tuberculosis . Early after birth, frequencies of MR1-5-OP-RU tetramer-defined MR1T cells increased rapidly by several fold. This coincided with marked phenotypic changes, from a predominantly CD4+ and TRAV1-2- phenotype in neonates, to predominantly TRAV1-2+CD8+ MR1T cells that also expressed CD26 and CD161. We also observed that tetramer+ MR1T cells that expressed TNF upon mycobacterial stimulation were very low in neonates, but increased ~10-fold in the first year of life. These functional MR1Ts in all age groups were MR1-5-OP-RU tetramer+, TRAV1-2+ cells and expressed CD26 and CD161, markers that appeared to signal phenotypic and functional maturation of this cell subset. This age-associated maturation was also marked by the loss of naïve T cell markers on tetramer+ TRAV1-2+ MR1T cells more rapidly than tetramer+TRAV1-2- MR1T cells and non-MR1T cells. These data suggest that neonates have infrequent populations of MR1T cells with diverse phenotypic attributes and that exposure to the environment rapidly and preferentially expands the MR1-5-OP-RU tetramer+TRAV1-2+ population of MR1T cells, which becomes the predominant population of functional MR1T cells early during childhood.### Competing Interest StatementThe authors have declared no competing interest.