Abstract Frog virus 3 (FV3, genera Ranavirus , family Iridoviridae ), a double-stranded DNA virus, results in irreparable damage to biodiversity and significant economic losses to aquaculture. Although the existing FV3 detection methods are of high sensitivity and specificity, the complex procedure and requirement of expensive instruments limit their practical implantation. Herein, we develop a fast, easy-to-implement, highly sensitive, and point-of-care (POC) detection system for FV3. Combining recombinase polymerase amplification (RPA) and CRISPR/Cas12a, we achieve a limit of detection (LoD) of 100 aM (60.2 copies/μL) by optimizing RPA primers and CRISPR RNAs (crRNAs). For POC detection, we build a smartphone microscopy (SPM) and achieve an LoD of 10 aM within 40 minutes. Four positive animal-derived samples with a quantitation cycle (Cq) value of quantitative PCR (qPCR) in the range of 13 to 32 are detectable by the proposed system. In addition, we deploy deep learning models for binary classification (positive or negative samples) and multiclass classification (different concentrations of FV3 and negative samples), achieving 100% and 98.75% accuracy, respectively. Without temperature regulation and expensive equipment, RPA-CRISPR/Cas12a combined with a smartphone readout and artificial intelligence (AI) assisted classification shows great potential for FV3 detection. This integrated system holds great promise for POC detection of aquatic DNA pathogens. Highlights An integrated DNA detection system is developed by combining RPA, CRISPR/Cas12a, smartphone microscopy, and deep learning. The LoD of frog virus 3 is 10 aM within 40 min. The detection system shows good performance on animal-derived samples.

The 1D homochiral coordination polymer (CP-1) {[Co(dTMP)(bpe)

SARS-CoV-2 is a highly contagious pathogen that predominantly caused the COVID-19 pandemic. The persistent effects of COVID-19 are defined as an inflammatory or host response to the virus that begins four weeks after initial infection and persists for an undetermined length of time. Chronic effects are more harmful than acute ones thus, this review explored the long-term effects of the virus on various human organs, including the pulmonary, cardiovascular, and neurological, reproductive, gastrointestinal, musculoskeletal, endocrine, and lymphoid systems and found that SARS-CoV-2 adversely affects these organs of older adults. Regarding diagnosis, the RT-PCR is a gold standard method of diagnosing COVID-19; however, it requires specialized equipment and personnel for performing assays and a long time for results production. Therefore, to overcome these limitations, artificial intelligence employed in imaging and microfluidics technologies is the most promising in diagnosing COVID-19. Pharmacological and non-pharmacological strategies are the most effective treatment for reducing the persistent impacts of COVID-19 by providing immunity to post-COVID-19 patients by reducing cytokine release syndrome, improving the T cell response, and increasing the circulation of activated natural killer and CD8 T cells in blood and tissues, which ultimately reduces fever, nausea, fatigue, and muscle weakness and pain. Vaccines such as inactivated viral, live attenuated viral, protein subunit, viral vectored, mRNA, DNA, or nanoparticle vaccines significantly reduce the adverse long-term virus effects in post-COVID-19 patients; however, no vaccine was reported to provide lifetime protection against COVID-19; consequently, protective measures such as physical separation, mask use, and hand cleansing are promising strategies. This review provides a comprehensive knowledge of the persistent effects of COVID-19 on people of varying ages, as well as diagnosis, treatment, vaccination, and future preventative measures against the spread of SARS-CoV-2.