Abstract Microglia provide protection against a range of brain infections, but how these glial cells respond to fungi is poorly understood. We investigated the role of microglia in the context of cryptococcal meningitis, the most common cause of fungal brain infections in humans. Using a series of transgenic- and chemical-based microglia depletion methods we found that, contrary to their protective role during other infections, microglia supported cryptococcal fungal brain infection. We show that microglia become hosts for intracellular fungal growth and are a site in which the fungus accesses the restricted micronutrient copper. We developed a reporter fungal strain to track copper starvation responses by the fungus and found that yeast were protected from copper starvation within microglia. Lastly, we show that stimulation of microglia with IFNγ causes restriction of phagosomal copper to intracellular fungi. These data provide a mechanistic explanation for why microglia depletion has a therapeutic effect in the context of this life-threatening fungal infection and is one of the few examples of microglia acting to promote infection. Our data demonstrate how tissue-resident phagocytes can support cryptococcal infections by acting as intracellular reservoirs and sites of microbial nutrient acquisition, and how these mechanisms may be blocked by IFNγ immunotherapy.

Synthetic glucocorticoids are used to treat many chronic and acute inflammatory conditions. Frequent adverse effects of prolonged exposure to glucocorticoids include disturbances of glucose homeostasis, caused by changes of glucose traffic and metabolism in muscle, liver and adipose tissues. Macrophages are important targets for the anti-inflammatory actions of glucocorticoids. These cells rely on aerobic glycolysis to support various pro-inflammatory and antimicrobial functions. Employing a potent pro-inflammatory stimulus in two commonly-used model systems (mouse bone marrow-derived and human monocyte-derived macrophages), we showed that the synthetic glucocorticoid dexamethasone inhibited lipopolysaccharide-mediated activation of the hypoxia-inducible transcription factor HIF-1α, a critical driver of glycolysis. In both cell types, dexamethasone-mediated inhibition of HIF-1α reduced the expression of the glucose transporter GLUT1, which imports glucose to fuel aerobic glycolysis. Aside from this conserved response, other metabolic effects of lipopolysaccharide and dexamethasone differed between human and mouse macrophages. These findings suggest that glucocorticoids exert anti-inflammatory effects by impairing HIF-1α-dependent glucose uptake in activated macrophages. Furthermore, harmful and beneficial (anti-inflammatory) effects of glucocorticoids may have a shared mechanistic basis, depending on alteration of glucose utilisation.

PLX5622 is a small molecular inhibitor of the CSF1 receptor (CSF1R) and is widely used to deplete macrophages within the central nervous system (CNS). We investigated the impact of PLX5622 treatment in wild-type C57BL/6 mice and discovered that one-week treatment with PLX5622 was sufficient to deplete interstitial macrophages in the lung and brain-infiltrating Ly6C