Background Constitutional DICER1 mutations were recently reported to cause familial pleuropulmonary blastoma (PPB). Aim To investigate the contribution and phenotypic spectrum of constitutional and somatic DICER1 mutations to cancer. Methods and results The authors sequenced DICER1 in constitutional DNA from 823 unrelated patients with a variety of tumours and in 781 cancer cell lines. Constitutional DICER1 mutations were identified in 19 families including 11/14 with PPB, 2/3 with cystic nephroma, 4/7 with ovarian Sertoli–Leydig-type tumours, 1/243 with Wilms tumour (this patient also had a Sertoli–Leydig tumour), 1/1 with intraocular medulloepithelioma (this patient also had PPB), 1/86 with medulloblastoma/infratentorial primitive neuroectodermal tumour, and 1/172 with germ cell tumour. The inheritance was investigated in 17 families. DICER1 mutations were identified in 25 relatives: 17 were unaffected, one mother had ovarian Sertoli–Leydig tumour, one half-sibling had cystic nephroma, and six relatives had non-toxic thyroid cysts/goitre. Analysis of eight tumours from DICER1 mutation-positive patients showed universal retention of the wild-type allele. DICER1 truncating mutations were identified in 4/781 cancer cell lines; all were in microsatellite unstable lines and therefore unlikely to be driver mutations. Conclusion Constitutional DICER1 haploinsufficiency predisposes to a broad range of tumours, making a substantial contribution to PPB, cystic nephroma and ovarian Sertoli–Leydig tumours, but a smaller contribution to other tumours. Most mutation carriers are unaffected, indicating that tumour risk is modest. The authors define the clinical contexts in which DICER1 mutation testing should be considered, the associated tumour risks, and the implications for at-risk individuals. They have termed this condition ‘ DICER1 syndrome’. Accession numbers The cDNA Genbank accession number for the DICER1 sequence reported in this paper is NM_030621.2.

ABSTRACT Paediatric high grade glioma and diffuse midline glioma (including DIPG) are comprised of multiple biological and clinical subgroups, the majority of which urgently require novel therapies. Patient-derived in vitro primary cell cultures represent potentially useful tools for mechanistic and preclinical investigation based upon their retention of key features of tumour subgroups under experimental conditions amenable to high-throughput approaches. We present 17 novel primary cultures derived from patients in London, Dublin and Belfast, and together with cultures established or shared from Barcelona, Brisbane, Rome and Stanford, assembled a panel of 52 models under 2D (laminin matrix) and/or 3D (neurospheres) conditions, fully credentialed by phenotypic and molecular comparison to the original tumour sample (methylation BeadArray, panel/exome sequencing, RNAseq). In screening a subset of these against a panel of ~400 approved chemotherapeutics and small molecules, we identified specific dependencies associated with tumour subgroups and/or specific molecular markers. These included MYCN -amplified cells and ATM/DNA-PK inhibitors, and DIPGs with PPM1D activating truncating mutations and inhibitors of MDM2 or PARP1. Specific mutations in PDGFRA were found to confer sensitivity to a range of RTK inhibitors, though not all such mutations conferred sensitivity to targeted agents. Notably, dual PDGFRA/FGFR and downstream pathway MEK inhibitors showed profound effects against both PDGFRA-sensitising mutant and FGFR1-dependent non-brainstem pHGG and DIPG. In total, 85% cells were found to have at least one drug screening hit in short term assays linked to the underlying biology of the patient’s tumour, providing a rational approach for individualised clinical translation.

Abstract INTRODUCTION Low-grade gliomas (LGG) present 10-year overall survival rates of 90%. However, many require multiple lines of treatment. Bevacizumab/Irinotecan is the standard third line treatment for recurrent LGG in the UK; with targeted therapies being accessible only as a fourth or subsequent line for most cases. Access to targeted therapies may also be limited by the need for tumour tissue, which isn’t always available for LGG cases. Bevacizumab is effective in LGG, but between 65 and 90% regrow within 5-8 months from treatment discontinuation [Hwang 2013; Green 2023]. In this context and based on preliminary evidence from the group in Marseille (France) [Heng, 2016; Roux 2021], we explored if Vinblastine could extend the progression-free survival (PFS) after Bevacizumab. METHODS Institutional review of patients aged 1-25 years with relapsed LGG treated between 2018 and 2022 with Bevacizumab/Irinotecan followed by Vinblastine (24 weekly doses) at the discretion of the treating physician. The primary endpoint was PFS post-Bevacizumab (PFS-pB) measured at 8 months from last dose of Bevacizumab to allow for comparison with the results of a recently published national case series of paediatric LGG treated with Bevacizumab-based regimes [Green 2023]. RESULTS Ten LGG cases received Bevacizumab/Irinotecan. One progressed on treatment, leaving 9 evaluable (8 completed 12 cycles, 1 discontinued treatment due to toxicity): of which 6 received Vinblastine. The PFS-pB at 8 months was 66% (4/6) with Vinblastine vs 35% in the national UK case series. CONCLUSIONS In this limited case series, Vinblastine delayed tumour progression following completion of Bevacizumab-based regimes compared to a national UK case series. Vinblastine could be considered as a holding strategy after Bevacizumab where targeted therapies are not readily available. Further prospective studies are required to validate this hypothesis.

ABSTRACT Background Ganglioneuroblastoma intermixed (GNBi) and ganglioneuroma (GN) represent benign variants of peripheral neuroblastic tumours. While historically surgical resection was recommended, watchful active observation has become the accepted management for a subset of patients. Objectives To review clinical features, biology, natural history and management of a retrospective UK CCLG study cohort of GN and GNBi, and compare outcomes of patients treated with surgical resection or watchful active observation. Methods Retrospective review of histologically confirmed non‐metastatic GN and GNBi diagnosed between 1990 and 2020. Results A total of 259 patients were identified (163 GN, 93 GNBi, median age 62 months). In all 201 (78%) had initial surgery and 58 (22%) were observed. Overall survival was 98%. Twenty‐one of 58 observed (36%) required subsequent surgery due to progressive tumour growth (52%). Gross total resection (GTR) was achieved in 79% of patients with a 19% complication rate. GTR was obtained in a similar proportion of patients having initial surgery (65%) and delayed surgery (76%). Patients obtaining GTR were more likely to have complete symptom(s) control (43% vs. 24%). In 45 cases (39%), surgical pathology was different from pathology at biopsy, and in 14 (12%) the pathology changed from GN/GNBi to neuroblastoma/GNB nodular. Conclusion Watchful active observation can be a safe approach, with surgical resection reserved for symptomatic patients. However, a small proportion of patients in the observation group had their diagnosis revised to malignant at surgery. Careful assessment of surgical risk and expected benefits, after considering an initial period of observation, will allow clinicians to make optimal decisions for patients and their families.