Abstract Extracellular vesicles (EVs) have great potential as novel drug carriers for the treatment of various diseases. These lipid bilayer vesicles are naturally abundant in mammalian tissues and circulation, can be loaded with therapeutic small molecule drugs, (si)RNA, proteins and CRISPR/Cas9, and may be engineered for retention by specific tissues. However, many questions remain on the optimal dosing, administration route, and pharmacokinetics of EVs. Previous studies have addressed biodistribution and pharmacokinetics in rodents, but little evidence is available from larger animals. Here, we investigated the pharmacokinetics and biodistribution of Expi293F-derived EVs labelled with a highly sensitive nanoluciferase reporter (palmGRET) in a non-human primate model (Macaca nemestrina), comparing intravenous (IV) and intranasal (IN) administration over a 125-fold dose range. We report that EVs administered IV had markedly longer circulation times in plasma than previously reported in mice, and were detectable in cerebrospinal fluid (CSF) after 30-60 minutes. Already after one minute following IV administration, we observed EV uptake by PBMCs, most notably B-cells. EVs were detected in liver and spleen within one hour of IV administration. None of the IN doses resulted in readily detectable EV levels in plasma, CSF, or organs, suggesting that IN delivery of EVs in large animals including humans may require reconsideration or pretreatment approaches. Furthermore, EV circulation times strongly decreased after repeated IV administration, possibly due to immune responses and with clear implications for xenogeneic EV-based therapeutics. We hope that our findings from this baseline study in macaques will help to inform future research and therapeutic development of EVs.

While social distancing is a key response to viral pandemics, social stress has been implicated in adverse health outcomes. A comprehensive understanding of the direct physiologic effects of social stress on viral pathophysiology is needed. To determine the effect of social stress on HIV pathogenesis during acute viral infection without sociobehavioral confounders inherent in human cohorts, we compared commonly measured parameters of HIV progression between singly and socially housed SIV-infected pigtailed macaques (Macaca nemestrina). Singly housed macaques demonstrated lower CD4/CD8 ratios, greater CD4 T cell declines and greater T cell activation compared to socially housed macaques during acute SIV infection. Singly housed macaques furthermore had higher viral loads in the plasma and cerebrospinal fluid throughout acute infection. These data demonstrate that social stress directly impacts the pathogenesis of acute lentiviral infection and imply that social stress has a direct effect on the pathogenesis of HIV and potentially other viral infections.### Competing Interest StatementThe authors have declared no competing interest.

Abstract Extracellular vesicles (EVs) can be loaded with therapeutic cargo and engineered for retention by specific body sites; therefore, they have great potential for targeted delivery of biomolecules to treat diseases. However, the pharmacokinetics and biodistribution of EVs in large animals remain relatively unknown, especially in primates. We recently reported that when cell culture-derived EVs are administered intravenously to Macaca nemestrina (pig-tailed macaques), they differentially associate with specific subsets of peripheral blood mononuclear cells (PBMCs). More than 60% of CD20 + B cells were observed to associate with EVs for up to 1 hr post-intravenous administration. To investigate these associations further, we developed an ex vivo model of whole blood collected from healthy pig-tailed macaques. Using this ex vivo system, we found that labeled EVs preferentially associate with B cells in whole blood at levels similar to those detected in vivo . This study demonstrates that ex vivo blood can be used to study EV-blood cell interactions.