In an RNAi screen targeting chromatin regulators, Vakoc and colleagues find that maintenance of acute myeloid leukaemia (AML) requires Brd4, which binds to acetylated histones to influence gene transcription. Brd4 regulates expression of the oncogene Myc and a Myc-driven gene-expression program that permits leukaemia cells to self-renew. JQ1, a small molecule that inhibits Brd4 function, has anti-leukaemic effects in a mouse model and inhibits the proliferation of primary human AML cells, suggesting a therapeutic approach in patients with AML. Epigenetic pathways can regulate gene expression by controlling and interpreting chromatin modifications. Cancer cells are characterized by altered epigenetic landscapes, and commonly exploit the chromatin regulatory machinery to enforce oncogenic gene expression programs1. Although chromatin alterations are, in principle, reversible and often amenable to drug intervention, the promise of targeting such pathways therapeutically has been limited by an incomplete understanding of cancer-specific dependencies on epigenetic regulators. Here we describe a non-biased approach to probe epigenetic vulnerabilities in acute myeloid leukaemia (AML), an aggressive haematopoietic malignancy that is often associated with aberrant chromatin states2. By screening a custom library of small hairpin RNAs (shRNAs) targeting known chromatin regulators in a genetically defined AML mouse model, we identify the protein bromodomain-containing 4 (Brd4) as being critically required for disease maintenance. Suppression of Brd4 using shRNAs or the small-molecule inhibitor JQ1 led to robust antileukaemic effects in vitro and in vivo, accompanied by terminal myeloid differentiation and elimination of leukaemia stem cells. Similar sensitivities were observed in a variety of human AML cell lines and primary patient samples, revealing that JQ1 has broad activity in diverse AML subtypes. The effects of Brd4 suppression are, at least in part, due to its role in sustaining Myc expression to promote aberrant self-renewal, which implicates JQ1 as a pharmacological means to suppress MYC in cancer. Our results establish small-molecule inhibition of Brd4 as a promising therapeutic strategy in AML and, potentially, other cancers, and highlight the utility of RNA interference (RNAi) screening for revealing epigenetic vulnerabilities that can be exploited for direct pharmacological intervention.

We have generated a large, unique database that includes morphologic, clinical, cytogenetic, and follow-up data from 2124 patients with myelodysplastic syndromes (MDSs) at 4 institutions in Austria and 4 in Germany. Cytogenetic analyses were successfully performed in 2072 (97.6%) patients, revealing clonal abnormalities in 1084 (52.3%) patients. Numeric and structural chromosomal abnormalities were documented for each patient and subdivided further according to the number of additional abnormalities. Thus, 684 different cytogenetic categories were identified. The impact of the karyotype on the natural course of the disease was studied in 1286 patients treated with supportive care only. Median survival was 53.4 months for patients with normal karyotypes (n = 612) and 8.7 months for those with complex anomalies (n = 166). A total of 13 rare abnormalities were identified with good (+1/+1q, t(1q), t(7q), del(9q), del(12p), chromosome 15 anomalies, t(17q), monosomy 21, trisomy 21, and −X), intermediate (del(11q), chromosome 19 anomalies), or poor (t(5q)) prognostic impact, respectively. The prognostic relevance of additional abnormalities varied considerably depending on the chromosomes affected. For all World Health Organization (WHO) and French-American-British (FAB) classification system subtypes, the karyotype provided additional prognostic information. Our analyses offer new insights into the prognostic significance of rare chromosomal abnormalities and specific karyotypic combinations in MDS.

Eosinophilia is an important indicator of various neoplastic and nonneoplastic conditions. Depending on the underlying disease and mechanisms, eosinophil infiltration can lead to organ dysfunction, clinical symptoms, or both. During the past 2 decades, several different classifications of eosinophilic disorders and related syndromes have been proposed in various fields of medicine. Although criteria and definitions are, in part, overlapping, no global consensus has been presented to date. The Year 2011 Working Conference on Eosinophil Disorders and Syndromes was organized to update and refine the criteria and definitions for eosinophilic disorders and to merge prior classifications in a contemporary multidisciplinary schema. A panel of experts from the fields of immunology, allergy, hematology, and pathology contributed to this project. The expert group agreed on unifying terminologies and criteria and a classification that delineates various forms of hypereosinophilia, including primary and secondary variants based on specific hematologic and immunologic conditions, and various forms of the hypereosinophilic syndrome. For patients in whom no underlying disease or hypereosinophilic syndrome is found, the term hypereosinophilia of undetermined significance is introduced. The proposed novel criteria, definitions, and terminologies should assist in daily practice, as well as in the preparation and conduct of clinical trials. Eosinophilia is an important indicator of various neoplastic and nonneoplastic conditions. Depending on the underlying disease and mechanisms, eosinophil infiltration can lead to organ dysfunction, clinical symptoms, or both. During the past 2 decades, several different classifications of eosinophilic disorders and related syndromes have been proposed in various fields of medicine. Although criteria and definitions are, in part, overlapping, no global consensus has been presented to date. The Year 2011 Working Conference on Eosinophil Disorders and Syndromes was organized to update and refine the criteria and definitions for eosinophilic disorders and to merge prior classifications in a contemporary multidisciplinary schema. A panel of experts from the fields of immunology, allergy, hematology, and pathology contributed to this project. The expert group agreed on unifying terminologies and criteria and a classification that delineates various forms of hypereosinophilia, including primary and secondary variants based on specific hematologic and immunologic conditions, and various forms of the hypereosinophilic syndrome. For patients in whom no underlying disease or hypereosinophilic syndrome is found, the term hypereosinophilia of undetermined significance is introduced. The proposed novel criteria, definitions, and terminologies should assist in daily practice, as well as in the preparation and conduct of clinical trials. Eosinophilia is observed in patients with various inflammatory and allergic conditions, as well as diverse hematologic malignancies.1Gleich G.J. Leiferman K.M. The hypereosinophilic syndromes: still more heterogeneity.Curr Opin Immunol. 2005; 17: 679-684Crossref PubMed Scopus (37) Google Scholar, 2Tefferi A. Patnaik M.M. Pardanani A. Eosinophilia: secondary, clonal and idiopathic.Br J Haematol. 2006; 133: 468-492Crossref PubMed Scopus (227) Google Scholar, 3Bain B.J. Fletcher S.H. Chronic eosinophilic leukemias and the myeloproliferative variant of the hypereosinophilic syndrome.Immunol Allergy Clin North Am. 2007; 27: 377-388Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (66) Google Scholar In hematopoietic stem cell and myeloid neoplasms, eosinophils originate from a malignant clone, whereas in other conditions and disorders, (hyper)eosinophilia is considered a nonneoplastic process triggered by eosinophilopoietic cytokines or by other as yet unknown processes.1Gleich G.J. Leiferman K.M. The hypereosinophilic syndromes: still more heterogeneity.Curr Opin Immunol. 2005; 17: 679-684Crossref PubMed Scopus (37) Google Scholar, 2Tefferi A. Patnaik M.M. Pardanani A. Eosinophilia: secondary, clonal and idiopathic.Br J Haematol. 2006; 133: 468-492Crossref PubMed Scopus (227) Google Scholar, 3Bain B.J. Fletcher S.H. Chronic eosinophilic leukemias and the myeloproliferative variant of the hypereosinophilic syndrome.Immunol Allergy Clin North Am. 2007; 27: 377-388Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (66) Google Scholar Peripheral blood eosinophilia can be transient, episodic, or persistent. In patients with chronic (persistent) eosinophilia, tissue infiltration and the effects of eosinophil-derived effector molecules might result in clinically relevant organ pathology or even in (irreversible) organ damage.4Gleich G.J. Mechanisms of eosinophil-associated inflammation.J Allergy Clin Immunol. 2000; 105: 651-663Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (689) Google Scholar, 5Ackerman S.J. Bochner B.S. Mechanisms of eosinophilia in the pathogenesis of hypereosinophilic disorders.Immunol Allergy Clin North Am. 2007; 27: 357-375Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (89) Google Scholar, 6Hogan S.P. Rosenberg H.F. Moqbel R. Phipps S. Foster P.S. Lacy P. et al.Eosinophils: biological properties and role in health and disease.Clin Exp Allergy. 2008; 38: 709-750Crossref PubMed Scopus (650) Google Scholar Notably, among a range of effects on multiple organs, endomyocardial fibrosis, thrombosis, or both might be life-threatening consequences in patients with sustained eosinophilia. In other patients eosinophilia can be persistent but does not lead to measurable organ dysfunction. In these patients the clinical course and outcome remain uncertain; therefore they should be followed for potential disease progression. Several neoplastic conditions are associated with eosinophilia. Myeloid neoplasms variably accompanied by eosinophilia are chronic myeloid leukemia (CML), other myeloproliferative neoplasms (MPNs), distinct variants of acute myeloid leukemia, rare forms of myelodysplastic syndromes (MDSs), some MDS/MPN overlap disorders, and a subset of patients with (advanced) systemic mastocytosis (SM).7Bain B.J. Relationship between idiopathic hypereosinophilic syndrome, eosinophilic leukemia, and systemic mastocytosis.Am J Hematol. 2004; 77: 82-85Crossref PubMed Scopus (68) Google Scholar, 8Valent P. Pathogenesis, classification, and therapy of eosinophilia and eosinophilic disorders.Blood Rev. 2009; 23: 157-165Crossref PubMed Scopus (67) Google Scholar, 9Tefferi A. Skoda R. Vardiman J.W. Myeloproliferative neoplasms: contemporary diagnosis using histology and genetics.Nat Rev Clin Oncol. 2009; 6: 627-637Crossref PubMed Scopus (110) Google Scholar These differential diagnoses have to be considered in cases of unexplained eosinophilia, especially when signs of myeloproliferation are present. In such patients a thorough hematologic workup, including bone marrow (BM) cytology, histology and immunohistochemistry, cytogenetics, molecular analyses, and staging of potentially affected organ systems, should be initiated. In patients with eosinophilic leukemia, hypereosinophilia (HE) is a consistent and predominant feature. Most serious complications of HE (ie, endomyocardial fibrosis, thrombosis, or both) are particularly prone to develop in these patients, especially in the setting of fusion genes involving platelet-derived growth factor receptor α (PDGFRA). This is important clinically because imatinib is usually an effective therapy in patients with PDGFRA fusion genes and leads to complete hematologic and molecular remission in a high proportion of cases.2Tefferi A. Patnaik M.M. Pardanani A. Eosinophilia: secondary, clonal and idiopathic.Br J Haematol. 2006; 133: 468-492Crossref PubMed Scopus (227) Google Scholar, 3Bain B.J. Fletcher S.H. Chronic eosinophilic leukemias and the myeloproliferative variant of the hypereosinophilic syndrome.Immunol Allergy Clin North Am. 2007; 27: 377-388Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (66) Google Scholar, 8Valent P. Pathogenesis, classification, and therapy of eosinophilia and eosinophilic disorders.Blood Rev. 2009; 23: 157-165Crossref PubMed Scopus (67) Google Scholar, 9Tefferi A. Skoda R. Vardiman J.W. Myeloproliferative neoplasms: contemporary diagnosis using histology and genetics.Nat Rev Clin Oncol. 2009; 6: 627-637Crossref PubMed Scopus (110) Google Scholar, 10Gotlib J. Cross N.C. Gilliland D.G. Eosinophilic disorders: molecular pathogenesis, new classification, and modern therapy.Best Pract Res Clin Haematol. 2006; 19: 535-569Crossref PubMed Scopus (62) Google Scholar During the past 2 decades, several different classifications of eosinophilic disorders have been proposed in various fields of medicine.11Roufosse F. Goldman M. Cogan E. Hypereosinophilic syndrome: lymphoproliferative and myeloproliferative variants.Semin Respir Crit Care Med. 2006; 27: 158-170Crossref PubMed Scopus (38) Google Scholar, 12Tefferi A. Vardiman J.W. Classification and diagnosis of myeloproliferative neoplasms: the 2008 World Health Organization criteria and point-of-care diagnostic algorithms.Leukemia. 2008; 22: 14-22Crossref PubMed Scopus (843) Google Scholar, 13Simon H.U. Rothenberg M.E. Bochner B.S. Weller P.F. Wardlaw A.J. Wechsler M.E. et al.Refining the definition of hypereosinophilic syndrome.J Allergy Clin Immunol. 2010; 126: 45-49Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (243) Google Scholar, 14Gotlib J. Eosinophilic myeloid disorders: new classification and novel therapeutic strategies.Curr Opin Hematol. 2010; 17: 117-124Crossref PubMed Scopus (22) Google Scholar Although respective criteria and definitions partially overlap, no multidisciplinary global consensus has been developed. In addition, the recent identification of several new molecular and immunologic mechanisms lends greater understanding to the disorders and therefore to logical taxonomy. To update and refine the criteria and definitions for eosinophilic disorders and to merge classifications in a multidisciplinary consensus, we organized the Year 2011 Working Conference on Eosinophil Disorders and Syndromes (Vienna, Austria; May 27-28, 2011). Experts from the fields of immunology, allergy, hematology, pathology, and molecular medicine contributed to this project. All faculty members actively participated in preconference and postconference discussions (from October 2010 to August 2011). The final outcomes of these discussions were formulated into consensus statements and into a contemporary multidisciplinary classification of eosinophilic disorders and related syndromes together with proposed criteria that are summarized in this article. Under normal physiologic conditions, eosinophil production is tightly controlled by the cytokine network.4Gleich G.J. Mechanisms of eosinophil-associated inflammation.J Allergy Clin Immunol. 2000; 105: 651-663Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (689) Google Scholar, 5Ackerman S.J. Bochner B.S. Mechanisms of eosinophilia in the pathogenesis of hypereosinophilic disorders.Immunol Allergy Clin North Am. 2007; 27: 357-375Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (89) Google Scholar, 8Valent P. Pathogenesis, classification, and therapy of eosinophilia and eosinophilic disorders.Blood Rev. 2009; 23: 157-165Crossref PubMed Scopus (67) Google Scholar The normal eosinophil count in peripheral blood ranges between 0.05 and 0.5 × 109/L. Normal values for BM eosinophils also have been proposed, and in textbooks normal values of eosinophils in BM aspirates commonly range between 1% and 6%. Eosinophils are not normally present in other human tissues and organs, with the exception of the thymus, spleen, lymph nodes, uterus, and gastrointestinal tract from the stomach through the large intestine. The normal physiologic range of eosinophils in these organs is less well defined.4Gleich G.J. Mechanisms of eosinophil-associated inflammation.J Allergy Clin Immunol. 2000; 105: 651-663Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (689) Google Scholar, 5Ackerman S.J. Bochner B.S. Mechanisms of eosinophilia in the pathogenesis of hypereosinophilic disorders.Immunol Allergy Clin North Am. 2007; 27: 357-375Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (89) Google Scholar, 6Hogan S.P. Rosenberg H.F. Moqbel R. Phipps S. Foster P.S. Lacy P. et al.Eosinophils: biological properties and role in health and disease.Clin Exp Allergy. 2008; 38: 709-750Crossref PubMed Scopus (650) Google Scholar, 15Kato M. Kephart G.M. Talley N.J. Wagner J.M. Sarr M.G. Bonno M. et al.Eosinophil infiltration and degranulation in normal human tissue.Anat Record. 1998; 252: 418-425Crossref PubMed Scopus (177) Google Scholar Similar to other leukocytes, eosinophils originate from CD34+ hematopoietic precursor cells.4Gleich G.J. Mechanisms of eosinophil-associated inflammation.J Allergy Clin Immunol. 2000; 105: 651-663Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (689) Google Scholar, 5Ackerman S.J. Bochner B.S. Mechanisms of eosinophilia in the pathogenesis of hypereosinophilic disorders.Immunol Allergy Clin North Am. 2007; 27: 357-375Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (89) Google Scholar, 8Valent P. Pathogenesis, classification, and therapy of eosinophilia and eosinophilic disorders.Blood Rev. 2009; 23: 157-165Crossref PubMed Scopus (67) Google Scholar The most potent growth factors for eosinophils are IL-5, GM-CSF, and IL-3.4Gleich G.J. Mechanisms of eosinophil-associated inflammation.J Allergy Clin Immunol. 2000; 105: 651-663Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (689) Google Scholar, 5Ackerman S.J. Bochner B.S. Mechanisms of eosinophilia in the pathogenesis of hypereosinophilic disorders.Immunol Allergy Clin North Am. 2007; 27: 357-375Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (89) Google Scholar, 8Valent P. Pathogenesis, classification, and therapy of eosinophilia and eosinophilic disorders.Blood Rev. 2009; 23: 157-165Crossref PubMed Scopus (67) Google Scholar These eosinophilopoietic cytokines are primarily produced by activated T lymphocytes, mast cells, and stromal cells and trigger not only growth but also activation of normal and neoplastic eosinophils.4Gleich G.J. Mechanisms of eosinophil-associated inflammation.J Allergy Clin Immunol. 2000; 105: 651-663Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (689) Google Scholar, 5Ackerman S.J. Bochner B.S. Mechanisms of eosinophilia in the pathogenesis of hypereosinophilic disorders.Immunol Allergy Clin North Am. 2007; 27: 357-375Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (89) Google Scholar, 6Hogan S.P. Rosenberg H.F. Moqbel R. Phipps S. Foster P.S. Lacy P. et al.Eosinophils: biological properties and role in health and disease.Clin Exp Allergy. 2008; 38: 709-750Crossref PubMed Scopus (650) Google Scholar Apart from these classical growth regulators, several other cytokines and chemokines also trigger eosinophil growth and/or function. Reactive eosinophilia is mainly caused by eosinophilopoietic cytokines (IL-3, IL-5, and GM-CSF), whereas clonal eosinophils typically are derived from progenitors containing mutations in oncogenic tyrosine kinase receptors, such as PDGFRA, platelet-derived growth factor receptor β (PDGFRB), or fibroblast growth factor receptor 1 (FGFR1), or other acquired (cyto)genetic lesions.7Bain B.J. Relationship between idiopathic hypereosinophilic syndrome, eosinophilic leukemia, and systemic mastocytosis.Am J Hematol. 2004; 77: 82-85Crossref PubMed Scopus (68) Google Scholar, 8Valent P. Pathogenesis, classification, and therapy of eosinophilia and eosinophilic disorders.Blood Rev. 2009; 23: 157-165Crossref PubMed Scopus (67) Google Scholar, 9Tefferi A. Skoda R. Vardiman J.W. Myeloproliferative neoplasms: contemporary diagnosis using histology and genetics.Nat Rev Clin Oncol. 2009; 6: 627-637Crossref PubMed Scopus (110) Google Scholar, 10Gotlib J. Cross N.C. Gilliland D.G. Eosinophilic disorders: molecular pathogenesis, new classification, and modern therapy.Best Pract Res Clin Haematol. 2006; 19: 535-569Crossref PubMed Scopus (62) Google Scholar Eosinophils produce and store a number of biologically active molecules in their granules, such as eosinophil peroxidase, eosinophil cationic protein, major basic protein, and numerous cytokines, including TGF-β.4Gleich G.J. Mechanisms of eosinophil-associated inflammation.J Allergy Clin Immunol. 2000; 105: 651-663Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (689) Google Scholar, 5Ackerman S.J. Bochner B.S. Mechanisms of eosinophilia in the pathogenesis of hypereosinophilic disorders.Immunol Allergy Clin North Am. 2007; 27: 357-375Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (89) Google Scholar, 6Hogan S.P. Rosenberg H.F. Moqbel R. Phipps S. Foster P.S. Lacy P. et al.Eosinophils: biological properties and role in health and disease.Clin Exp Allergy. 2008; 38: 709-750Crossref PubMed Scopus (650) Google Scholar Under various conditions, eosinophils are activated to release their mediators and thereby influence tissue homeostasis and integrity. In the setting of massive and persistent activation, eosinophils cause profound changes in the microenvironment, often with resultant fibrosis, thrombosis, or both and thus severe organ damage.4Gleich G.J. Mechanisms of eosinophil-associated inflammation.J Allergy Clin Immunol. 2000; 105: 651-663Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (689) Google Scholar, 5Ackerman S.J. Bochner B.S. Mechanisms of eosinophilia in the pathogenesis of hypereosinophilic disorders.Immunol Allergy Clin North Am. 2007; 27: 357-375Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (89) Google Scholar, 6Hogan S.P. Rosenberg H.F. Moqbel R. Phipps S. Foster P.S. Lacy P. et al.Eosinophils: biological properties and role in health and disease.Clin Exp Allergy. 2008; 38: 709-750Crossref PubMed Scopus (650) Google Scholar In patients with such persistent eosinophil activation, tissue specimens might show marked deposition of eosinophil granule proteins, even in the absence of a massive eosinophil infiltrate.4Gleich G.J. Mechanisms of eosinophil-associated inflammation.J Allergy Clin Immunol. 2000; 105: 651-663Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (689) Google Scholar, 5Ackerman S.J. Bochner B.S. Mechanisms of eosinophilia in the pathogenesis of hypereosinophilic disorders.Immunol Allergy Clin North Am. 2007; 27: 357-375Abstract Full Text Full Text PDF PubMed Scopus (89) Google Scholar, 6Hogan S.P. Rosenberg H.F. Moqbel R. Phipps S. Foster P.S. Lacy P. et al.Eosinophils: biological properties and role in health and disease.Clin Exp Allergy. 2008; 38: 709-750Crossref PubMed Scopus (650) Google Scholar Recommended stains for visualization and enumeration of eosinophils in organ sections are May-Grunwald-Giemsa and Wright-Giemsa. In the normal BM the eosinophil count ranges between 1% and 6%. Eosinophils are also detectable in the normal mucosal layers of the stomach, small and large bowels, uterus, thymus, spleen, and lymph nodes, but only a few robust studies comparing eosinophil numbers in normal and inflamed organs are available. Other healthy tissues do not contain eosinophils, and no eosinophil-derived proteins can be detected.15Kato M. Kephart G.M. Talley N.J. Wagner J.M. Sarr M.G. Bonno M. et al.Eosinophil infiltration and degranulation in normal human tissue.Anat Record. 1998; 252: 418-425Crossref PubMed Scopus (177) Google Scholar Traditionally, peripheral blood eosinophilia has been divided into mild (0.5-1.5 × 109/L), marked (>1.5 × 109/L), and massive (>5.0 × 109/L) eosinophilia. As noted previously, eosinophilia can be transient, episodic, or persistent (chronic). The proposal of this expert panel is that the term HE should be used when marked and persistent eosinophilia has been documented or marked tissue eosinophilia is observed (Table I). The faculty also agreed that the term persistent applies to peripheral blood eosinophilia recorded on at least 2 occasions with a minimum time interval of 4 weeks (except when immediate therapy is required because of HE-related organ dysfunction). Because no data from clinical trials are available, further studies will be required to validate this time point against other (traditional) time points regarding duration of eosinophilia. Similarly, further investigations will be required to validate the proposed cutoff level to define blood HE (1.5 × 109/L). Tissue HE should apply when 1 or more of the following is fulfilled: (1) the percentage of eosinophils exceeds 20% of all nucleated cells in BM sections; (2) a pathologist is of the opinion that tissue infiltration by eosinophils is extensive (massive) when compared with the normal physiologic range, compared with other inflammatory cells, or both; or (3) a specific stain directed against an established eosinophil granule protein (eg, major basic protein) reveals extensive extracellular deposition of eosinophil-derived proteins indicative of local eosinophil activation (Table I). This third criterion applies even in the absence of massive local eosinophil infiltration and can be regarded as a sign of marked and persistent eosinophil activation in local tissue sites. However, because the proposed criteria of tissue HE are not based on robust quantitative markers, additional studies will be required to improve the definition and criteria of HE by introducing more quantitative measures and objective parameters in the future. Tissue HE can occur in the absence of blood HE, although in most instances blood HE, or at least eosinophilia, is also present.Table IDefinition of HE and HESProposed termProposed abbreviationDefinition and criteriaBlood eosinophilia—>0.5 Eosinophils × 109/L bloodHypereosinophiliaHE>1.5 Eosinophils × 109/L blood on 2 examinations (interval ≥1 month∗In the case of evolving life-threatening end-organ damage, the diagnosis can be made immediately to avoid delay in therapy.) and/or tissue HE defined by the following†Validated quantitative criteria for tissue HE do not exist for most tissues at the present time. Consequently, tissue HES is defined by a combination of qualitative and semiquantitative findings that will require revision as new information becomes available.:1.Percentage of eosinophils in BM section exceeds 20% of all nucleated cells and/or2.Pathologist is of the opinion that tissue infiltration by eosinophils is extensive and/or3.Marked deposition of eosinophil granule proteins is found (in the absence or presence of major tissue infiltration by eosinophils).Hypereosinophilic syndromeHES1.Criteria for peripheral blood HE fulfilled∗In the case of evolving life-threatening end-organ damage, the diagnosis can be made immediately to avoid delay in therapy. and2.Organ damage and/or dysfunction attributable to tissue HE‡HE-related organ damage (damage attributable to HE): organ dysfunction with marked tissue eosinophil infiltrates and/or extensive deposition of eosinophil-derived proteins (in the presence or absence of marked tissue eosinophils) and 1 or more of the following: (1) fibrosis (lung, heart, digestive tract, skin, and others); (2) thrombosis with or without thromboembolism; (3) cutaneous (including mucosal) erythema, edema/angioedema, ulceration, pruritus, and eczema; and (4) peripheral or central neuropathy with chronic or recurrent neurologic deficit. Less commonly, other organ system involvement (liver, pancreas, kidney, and other organs) and the resulting organ damage can be judged as HE-related pathology, so that the clinician concludes the clinical situation resembles HES. Note that HES can manifest in 1 or more organ systems. and3.Exclusion of other disorders or conditions as major reason for organ damage.Eosinophil-associated single-organ diseases1.Criteria of HE fulfilled and2.Single-organ disease (see Table III and Tables E4 and E5 for specific entities)∗ In the case of evolving life-threatening end-organ damage, the diagnosis can be made immediately to avoid delay in therapy.† Validated quantitative criteria for tissue HE do not exist for most tissues at the present time. Consequently, tissue HES is defined by a combination of qualitative and semiquantitative findings that will require revision as new information becomes available.‡ HE-related organ damage (damage attributable to HE): organ dysfunction with marked tissue eosinophil infiltrates and/or extensive deposition of eosinophil-derived proteins (in the presence or absence of marked tissue eosinophils) and 1 or more of the following: (1) fibrosis (lung, heart, digestive tract, skin, and others); (2) thrombosis with or without thromboembolism; (3) cutaneous (including mucosal) erythema, edema/angioedema, ulceration, pruritus, and eczema; and (4) peripheral or central neuropathy with chronic or recurrent neurologic deficit. Less commonly, other organ system involvement (liver, pancreas, kidney, and other organs) and the resulting organ damage can be judged as HE-related pathology, so that the clinician concludes the clinical situation resembles HES. Note that HES can manifest in 1 or more organ systems. Open table in a new tab On the basis of the initial patient evaluation, HE can be divided into variant types: a hereditary (familial) HE variant,16Klion A.D. Law M.A. Riemenschneider W. McMaster M.L. Brown M.R. Horne M. et al.Familial eosinophilia: a benign disorder?.Blood. 2004; 103: 4050-4055Crossref PubMed Scopus (56) Google Scholar HE of undetermined significance (HEUS), primary (clonal/neoplastic) HE produced by apparently clonal (neoplastic) eosinophils (HEN), and secondary (reactive) HE (HER, Table II). It is important to note that some of these variants (ie, HEN and HER) do not represent final diagnoses but are meant as secondary decision points to guide further diagnostic evaluation. For example, a patient with HEN might have a PDGFRA-mutated MPN-eo or an overt chronic eosinophilic leukemia (CEL). The other HE variants (hereditary [familial] HE variant and HEUS) are provisional diagnoses but (as is the case for all HE variants) need follow-up investigations to exclude the development of hypereosinophilic syndrome (HES) or an underlying neoplastic or nonneoplastic disorder. The faculty agreed that the term HES should be used for subjects with any HE variant (with blood eosinophilia) and clear evidence of HE-related organ damage, with the exception of certain diseases exemplified by eosinophilic gastroenteritis and eosinophilic pneumonia in which the single-organ involvement is often associated with blood eosinophilia (HE) but the role of eosinophilia in organ damage remains uncertain (see sections below and Table I).Table IIClassification of HEProposed terminologyProposed abbreviationPathogenesis/definitionHereditary (familial) HEHEFAPathogenesis unknown; familial clustering, no signs or symptoms of hereditary immunodeficiency, and no evidence of a reactive or neoplastic condition/disorder underlying HEHE of undetermined significanceHEUSNo underlying cause of HE, no family history, no evidence of a reactive or neoplastic condition/disorder underlying HE, and no end-organ damage attributable to HEPrimary (clonal/neoplastic) HE†HEN and HER are prediagnostic checkpoints that should guide further diagnostic evaluations but cannot serve as final diagnoses.HENUnderlying stem cell, myeloid, or eosinophilic neoplasm, as classified by WHO criteria; eosinophils considered neoplastic cells∗Clonality of eosinophils is often difficult to demonstrate or is not examined. However, if a myeloid or stem cell neoplasm known to present typically with clonal HE is present or a typical molecular defect is demonstrable (eg, PDGFR or FGFR mutations or BCR/ABL1), eosinophilia should be considered clonal.Secondary (reactive) HE†HEN and HER are prediagnostic checkpoints that should guide further diagnostic evaluations but cannot serve as final diagnoses.HERUnderlying condition/disease in which eosinophils are considered nonclonal cells‡In a group of patients, HER might be caused/triggered by other as yet unknown processes because no increase in eosinophilopoietic cytokine levels can be documented.; HE considered cytokine driven in most cases‡In a group of patients, HER might be caused/triggered by other as yet unknown processes because no increase in eosinophilopoietic cytokine levels can be documented.∗ Clonality of eosinophils is often difficult to demonstrate or is not examined. However, if a myeloid or stem cell neoplasm known to present typically with clonal HE is present or a typical molecular defect is demonstrable (eg, PDGFR or FGFR mutations or BCR/ABL1), eosinophilia should be considered clonal.† HEN and HER are prediagnostic checkpoints that should guide further diagnostic evaluations but cannot serve as final diagnoses.‡ In a group of patients, HER might be caused/triggered by other as yet unknown processes because no increase in eosinophilopoietic cytokine levels can be documented. Open table in a new tab In addition to patients with HES, who typically require treatment to prevent disease progression, there are patients with unexplained persistent asymptomatic HE. These patients have an uncertain prognosis. For such cases, the term HEUS is most appropriate. In these patients the criteria for HE are met, but there are no clinical or laboratory signs or symptoms indicative of a hereditary condition, reactive process, underlying immunologic disease, or hematopoietic neoplasm that could lead to and thus explain HE. Furthermore, no signs, symptoms, or other evidence of eosinophil-related organ damage are identified. It is important to state that the designation HEUS is a proposed provisional term and that the clinical implication and value of this new terminology will require validation in forthcoming studies. If clinical manifestations develop in a patient with HEUS, the diagnosis will change to

A complementary DNA encoding a pollen allergen from white birch ( Betula verrucosa ) that was isolated from a pollen complementary DNA library with serum immunoglobulin E from a birch pollen-allergic individual revealed significant sequence homology to profilins. The recombinant protein showed high affinity to poly-L-proline. Immunoglobulin E antibodies from allergic individuals bound to natural and recombinant birch profilin and also to human profilin. In addition, birch and human profilin induced histamine release from blood basophils of profilin-allergic individuals, but not of individuals sensitized to other plant allergens. The structural similarity of conserved proteins might therefore be responsible for maintaining immunoglobulin E antibody titers in type I allergy.

Purpose The karyotype is a strong independent prognostic factor in myelodysplastic syndromes (MDS). Since the implementation of the International Prognostic Scoring System (IPSS) in 1997, knowledge concerning the prognostic impact of abnormalities has increased substantially. The present study proposes a new and comprehensive cytogenetic scoring system based on an international data collection of 2,902 patients. Patients and Methods Patients were included from the German-Austrian MDS Study Group (n = 1,193), the International MDS Risk Analysis Workshop (n = 816), the Spanish Hematological Cytogenetics Working Group (n = 849), and the International Working Group on MDS Cytogenetics (n = 44) databases. Patients with primary MDS and oligoblastic acute myeloid leukemia (AML) after MDS treated with supportive care only were evaluated for overall survival (OS) and AML evolution. Internal validation by bootstrap analysis and external validation in an independent patient cohort were performed to confirm the results. Results In total, 19 cytogenetic categories were defined, providing clear prognostic classification in 91% of all patients. The abnormalities were classified into five prognostic subgroups (P < .001): very good (median OS, 61 months; hazard ratio [HR], 0.5; n = 81); good (49 months; HR, 1.0 [reference category]; n = 1,809); intermediate (26 months; HR, 1.6; n = 529); poor (16 months; HR, 2.6; n = 148); and very poor (6 months; HR, 4.2; n = 187). The internal and external validations confirmed the results of the score. Conclusion In conclusion, these data should contribute to the ongoing efforts to update the IPSS by refining the cytogenetic risk categories.

Type I allergy is a major health problem in industrialized countries where up to 15% of the population suffer from allergic symptoms (rhinitis, conjunctivitis, and asthma). Previously, we identified a cDNA clone that encoded a birch pollen allergen as profilin. Profilins constitute a ubiquitous family of proteins that control actin polymerization in eukaryotic cells; in particular, profilin participates in the acrosomal reaction of animal sperm cells. Although profilins had been unknown in plants so far, our finding led to the assumption that profilins might have similar functions in pollens during plant fertilization and therefore represent allergenic components in almost all pollens. We show that profilins are prominent allergens that can be isolated from tree pollens (Betula verrucosa, birch), from pollens of grasses (Phleum pratense, timothy grass), and weeds (Artemisia vulgaris, mugwort). About 20% of all pollen allergic patients tested (n = 65) displayed immunoglobulin E (IgE) reactivity to recombinant birch profilin that was expressed in pKK223-3. An IgE inhibition experiment performed with recombinant birch profilin and purified natural profilins from timothy grass and mugwort indicates common IgE epitopes. Moreover, all pollen profilins purified from these far distantly related plant species, and likewise the purified recombinant birch profilin, are able to elicit dose-dependent histamine release via high affinity Fc epsilon receptor of blood basophils from profilin allergic patients. The presence of profilin and possibly related proteins as crossreacting allergenic components in various plants therefore provides an explanation as to why certain allergic patients display type I allergic reactions with pollens and even food from distantly related plants. A functional pan-allergen, like profilin, available as purified recombinant protein, may be a useful diagnostic and probably therapeutic reagent.

Abstract The BCR-ABL tyrosine kinase inhibitor imatinib represents the current frontline therapy in chronic myeloid leukemia. Because many patients develop imatinib resistance, 2 second-generation drugs, nilotinib and dasatinib, displaying increased potency against BCR-ABL were developed. To predict potential side effects and novel medical uses, we generated comprehensive drug-protein interaction profiles by chemical proteomics for all 3 drugs. Our studies yielded 4 major findings: (1) The interaction profiles of the 3 drugs displayed strong differences and only a small overlap covering the ABL kinases. (2) Dasatinib bound in excess of 30 Tyr and Ser/Thr kinases, including major regulators of the immune system, suggesting that dasatinib might have a particular impact on immune function. (3) Despite the high specificity of nilotinib, the receptor tyrosine kinase DDR1 was identified and validated as an additional major target. (4) The oxidoreductase NQO2 was bound and inhibited by imatinib and nilotinib at physiologically relevant drug concentrations, representing the first nonkinase target of these drugs.

Activation of tissue mast cells (MCs) and their abnormal growth and accumulation in various organs are typically found in primary MC disorders also referred to as mastocytosis. However, increasing numbers of patients are now being informed that their clinical findings are due to MC activation (MCA) that is neither associated with mastocytosis nor with a defined allergic or inflammatory reaction. In other patients with MCA, MCs appear to be clonal cells, but criteria for diagnosing mastocytosis are not met. A working conference was organized in 2010 with the aim to define criteria for diagnosing MCA and related disorders, and to propose a global unifying classification of all MC disorders and pathologic MC reactions. This classification includes three types of ‘MCA syndromes’ (MCASs), namely primary MCAS, secondary MCAS and idiopathic MCAS. MCA is now defined by robust and generally applicable criteria, including (1) typical clinical symptoms, (2) a substantial transient increase in serum total tryptase level or an increase in other MC-derived mediators, such as histamine or prostaglandin D₂, or their urinary metabolites, and (3) a response of clinical symptoms to agents that attenuate the production or activities of MC mediators. These criteria should assist in the identification and diagnosis of patients with MCAS, and in avoiding misdiagnoses or overinterpretation of clinical symptoms in daily practice. Moreover, the MCAS concept should stimulate research in order to identify and exploit new molecular mechanisms and therapeutic targets.

BET bromodomain inhibitors are being explored as potential therapeutics in cancer; here, AML cells are shown to evade sensitivity to BET inhibition through rewiring the transcriptional regulation of BRD4 target genes such as MYC in a process that is facilitated by suppression of PRC2 and WNT signalling activation. BET inhibitors that target bromodomain chromatin readers such as BRD4 are being explored as potential therapeutics in cancer. Two papers published in this issue of Nature identify mechanisms that may be involved in resistance to BET inhibition in models of leukaemia. In an MLL–AF9 model, Mark Dawson and colleagues find that resistance emerges from leukaemic stem cells and is, in part, a consequence of increased Wnt signalling. Johannes Zuber and colleagues find that suppression of the PRC2 complex renders acute myeloid leukaemia cells resistant to BET inhibition by rewiring the transcriptional regulation of BRD4 target genes such as MYC. Wnt signalling is also implicated as a key driver of resistance. Following the discovery of BRD4 as a non-oncogene addiction target in acute myeloid leukaemia (AML)1,2, bromodomain and extra terminal protein (BET) inhibitors are being explored as a promising therapeutic avenue in numerous cancers3,4,5. While clinical trials have reported single-agent activity in advanced haematological malignancies6, mechanisms determining the response to BET inhibition remain poorly understood. To identify factors involved in primary and acquired BET resistance in leukaemia, here we perform a chromatin-focused RNAi screen in a sensitive MLL–AF9;NrasG12D-driven AML mouse model, and investigate dynamic transcriptional profiles in sensitive and resistant mouse and human leukaemias. Our screen shows that suppression of the PRC2 complex, contrary to effects in other contexts, promotes BET inhibitor resistance in AML. PRC2 suppression does not directly affect the regulation of Brd4-dependent transcripts, but facilitates the remodelling of regulatory pathways that restore the transcription of key targets such as Myc. Similarly, while BET inhibition triggers acute MYC repression in human leukaemias regardless of their sensitivity, resistant leukaemias are uniformly characterized by their ability to rapidly restore MYC transcription. This process involves the activation and recruitment of WNT signalling components, which compensate for the loss of BRD4 and drive resistance in various cancer models. Dynamic chromatin immunoprecipitation sequencing and self-transcribing active regulatory region sequencing of enhancer profiles reveal that BET-resistant states are characterized by remodelled regulatory landscapes, involving the activation of a focal MYC enhancer that recruits WNT machinery in response to BET inhibition. Together, our results identify and validate WNT signalling as a driver and candidate biomarker of primary and acquired BET resistance in leukaemia, and implicate the rewiring of transcriptional programs as an important mechanism promoting resistance to BET inhibitors and, potentially, other chromatin-targeted therapies.