Patients with inflammatory bowel disease (IBD) have an increased risk of colon cancer. However, the immune cells and cytokines that mediate the transition from intestinal inflammation to cancer are poorly understood. We show that bacteria-induced colon cancer is accompanied by differential accumulation of IL-17(+)IL-22(+) colonic innate lymphoid cells (cILCs), which are phenotypically distinct from LTi and NK-22 cells, and that their depletion in mice with dysplastic inflammation blocks the development of invasive colon cancer. Analysis of the functional role of distinct Type 17 cytokines shows that although blockade of IL-17 inhibits some parameters of intestinal inflammation, reduction in dysplasia and colorectal cancer (CRC) requires neutralization of IL-22 indicating a unique role for IL-22 in the maintenance of cancer in this model. Mechanistic analyses showed that IL-22 selectively acts on epithelial cells to induce Stat3 phosphorylation and proliferation. Importantly, we could detect IL-22(+)CD3(+) and IL-22(+)CD3(−) cells in human CRC. Our results describe a new activity of IL-22 in the colon as a nonredundant mediator of the inflammatory cascade required for perpetuation of CRC, highlighting the IL-22 axis as a novel therapeutic target in colon cancer.

Abstract Objective It is believed that intestinal recruitment of monocytes from Crohn’s Disease (CD) patients who carry NOD2 risk alleles may repeatedly give rise to recruitment of pathogenic macrophages. We investigated an alternative possibility that NOD2 may rather inhibit their differentiation from intravasating monocytes. Design The monocyte fate decision was examined by using germ-free mice, mixed bone marrow chimeras and a culture system yielding macrophages and monocyte-derived dendritic cells (mo-DCs). We next asked whether Nod2 in either monocytes or tissue macrophages have distinct resolving properties in colitis. Results Despite a similar abundance of monocytes, the intestinal frequency of mo-DCs from Nod2 -deficient mice was lowered independently of the changes in the gut microbiota that are caused by Nod2 deficiency. Similarly, the pool of mo-DCs was poorly reconstituted with mobilized bone marrow Nod2 -deficient cells. The use of pharmacological inhibitors revealed that activated NOD2 at an early stage of development dominantly inhibits mTOR-mediated macrophage differentiation in a TNFalpha-dependent manner. These observations were supported by the identification of a TNFalpha-dependent response to MDP that is specifically lost in CD14-expressing blood cells bearing the frameshift mutation in NOD2. Accordingly, loss of NOD2 in monocytes lowers glycolytic reserve, CD115 expression and pro-resolving features. Dietary intake of aryl hydrocarbon receptor (AHR) agonists that promotes mo-DCs generation improves colitis in Nod2 -deficient mice to the same extent as what is observed upon macrophage ablation of Nod2. Conclusion NOD2 negatively regulates a macrophage developmental program through a feed-forward loop that could be exploited for overcoming resistance to anti-TNF therapy in CD. Significance of this study What is already known about this subject? Loss of NOD2 function is predisposing to Crohn’s disease. Rapamycin, a serine/THR kinase inhibitor of mammalian target (mTOR) has been reported as potentially effective treatment in discrete subset of CD patients with refractory colitis. The NOD2 protein promotes the chemokine CCL2-dependent recruitment of inflammatory monocytes in response to tissue injury. An accumulation of CCR2-expressing monocytes and inflammatory macrophages is observed within the intestinal mucosa of CD patients including those resistant to anti-TNF therapy. Activated NOD2 enhances proinflammatory activity of CX3CR1 int Ly6C hi effector monocytes. The monocyte fate toward mo-DCs is orchestrated by the aryl hydrocarbon receptor. What are the new findings? NOD2 has a hierarchically dominant negative role on the mTORC-driven monocyte conversion to inflammatory macrophages independently of the changes in the gut microbiota that are caused by Nod2 deficiency. A defect in monocytes fate at the early stage allow the expansion of pathogenic macrophages in Nod2-deficient mice at the expense of mo-DC. Adoptive transfer of Nod2 -deficient monocytes into wild-type mice was sufficient to exacerbate DSS-induced intestinal damage. The glycolytic reserve of monocytes and their ability to respond to M-CSF is lowered upon loss of NOD2 signalling. Deletion of NOD2 in macrophage improves colitis to the same extent as dietary supplementation of AHR agonist in mice. The recognition of the gut microbiota by NOD2 is required for de novo reconstitution of mo-DCs in the lamina propria of the murine intestine, while having minimal effect on the mobilization of their precursors to the intestinal mucosa. How might it impact on clinical practice in the foreseeable future? This study might contribute to the development of novel mTORC-based therapeutic strategies for improving the response to biologics by restoring the ability of circulating monocytes to reconstitute the pool of mo-DCs during homeostatic turnover and upon tissue injury. It may thereby prevent the accumulation of pathogenic macrophages in patients with loss-of-function NOD2 alleles, which fail to respond to anti-TNF and are at greater risk of developing stricturing disease.

ABSTRACT Intratumoral bacteria locally contribute to cellular and molecular tumor heterogeneity that support cancer stemness through poorly understood mechanisms. This study aims to explore how Colibactin-producing Escherichia coli (CoPEC) flexibly alters the tumor microenvironment in right-sided colorectal cancer (CRC). Metabolomic and transcriptomic spatial profiling uncovered that CoPEC colonization establishes a high-glycerophospholipid microenvironment within the tumor that is conducive to exhaustion of infiltrated CD8 + T cell and has a lowered prognostic value in right-sided CRC. Mechanistically, the accumulation of lipid droplets in infected cancer cells relied on the production of colibactin as a measure to limit genotoxic stress and supply with sufficient energy for sustaining cell survival and lowering tumor immunogenicity. Specifically, a heightened phosphatidylcholine remodeling of CoPEC-infected cancer cells by the enzyme of the Land’s cycle coincided with a lowered accumulation of proapoptotic ceramide and lysophosphatidylcholine. Consequently, a reduced infiltration of CD8 + T lymphocytes that produce the cytotoxic cytokines IFN-γ was found where invading bacteria have been geolocated. By contrast, such an immunosuppressive dysmetabolic process was not observed when human colon cancer cells were infected with the mutant strain that did not produce colibactin (11G5δClbQ). This work revealed an unexpected property of CoPEC on lipid overload within tumors that could locally provide an inflammatory environment leading to immunosuppressive mechanisms and tumor expansion. This may pave the way for improving chemoresistance and subsequently outcome of CRC patients who are colonized by CoPEC.