Abstract Long considered an accessory tubule of the male reproductive system, the epididymis is proving to be a key determinant of male fertility. In addition to its secretory role in ensuring functional maturation and survival of spermatozoa, the epididymis has a complex immune function. Indeed, it must manage both peripheral tolerance to sperm antigens foreign to the immune system and the protection of spermatozoa as well as the organ itself against pathogens ascending the epididymal tubule. Although our knowledge of the immunobiology of this organ is beginning to accumulate at the molecular and cellular levels, the organization of blood and lymphatic networks of this tissue, important players in the immune response, remains largely unknown. In the present report, we have taken advantage of a VEGFR3:YFP transgenic mouse model. Using high-resolution three-dimensional (3D) imaging and organ clearing coupled with multiplex immunodetections of lymphatic (LYVE1, PDPN, PROX1) and/or blood (PLVAP/Meca32) markers, we provide for the first time a simultaneous deep 3D view of the lymphatic and blood epididymal vasculature in the mature adult mouse as well as during postnatal development. Graphical abstract Summary of the expansion of the conventional and hybrid lymphatic vasculature during postnatal development of the murine epididymis.

Abstract Gap junctions allow the exchange of small molecules between cells. How this function could be used to promote cell growth has never been explored. During Drosophila ovarian follicle development, germ cells, which are surrounded by epithelial somatic cells, undergo massive growth. We found that this growth depends on gap junctions between these cell populations, with a requirement for Innexin4 and Innexin2, in the germ cells and the somatic cells, respectively. Somatic cells express enzymes and transporters involved in amino acid metabolism that are absent in germ cells. Among them, we identified a proline transporter required for germline growth. Its ectopic expression in the germline can compensate for its absence in somatic cells, confirming the metabolic exchange between these cell types. Moreover, in somatic cells, innexin2 expression and gap junction assembly are regulated by the insulin receptor/PI3K kinase pathway. Altogether these data illustrate how metabolic exchange through gap junctions can promote cell growth and how such mechanism can be integrated into a developmental programme, coupling growth control by extrinsic systemic signals with the intrinsic coordination between cell populations. Summary statement We demonstrate that gap junction-dependent metabolic flow from a cell population to another promotes cell growth and can be regulated to coordinate cell growth.