ABSTRACT Background Human noroviruses are a leading cause of acute and sporadic gastroenteritis worldwide. The evolution of human noroviruses in immunocompromised persons has been evaluated in many studies. Much less is known about the evolutionary dynamics of human norovirus in healthy adults. Methods We used sequential samples collected from a controlled human infection study with GI.1/Norwalk/US/68 virus to evaluate intra- and inter-host evolution of a human norovirus in healthy adults. Up to 12 samples from day 1 to day 56 post-challenge were sequenced using a norovirus-specific capture probe method. Results Complete genomes were assembled, even in samples that were below the limit of detection of standard RT-qPCR assays, up to 28 days post-challenge. Analysis of 123 complete genomes showed changes in the GI.1 genome in all persons, but there were no conserved changes across all persons. Single nucleotide variants resulting in non-synonymous amino acid changes were observed in all proteins, with the capsid VP1 and nonstructural protein NS3 having the largest numbers of changes. Conclusions These data highlight the potential of a new capture-based sequencing approach to assemble human norovirus genomes with high sensitivity and demonstrate limited conserved immune pressure-driven evolution of GI.1 virus in healthy adults.

Gut microbiota produce tryptophan metabolites (TMs) important to homeostasis. However, measuring TM levels in stool and determining their microbial sources can be difficult. Here, we measured TMs from the indole pathway in fecal samples from 21 healthy adults with the goal to: 1) determine fecal TM concentrations in healthy individuals; 2) link TM levels to bacterial abundance using 16S and whole genome shotgun (WGS) sequencing data; and 3) predict likely bacterial sources of TM production. Within our samples, we identified 151 genera (16S) and 592 bacterial species (WGS). Eight TMs were found in ≥17 fecal samples, including four in all persons. To our knowledge, we are the first to report fecal levels for indole-3-lactate, indole-3-propionate, and 3-indoleacrylate levels in healthy persons. Overall, indole, indole-3-acetate (IAA), and skatole accounted for 86% of the eight TMs measured. Significant correlations were found between seven TMs and 29 bacterial species. Predicted multiple TM sources support the notion of a complex network of TM production and regulation. Further, the data suggest key roles for Collinsella aerofaciens and IAA, a metabolite reported to maintain intestinal homeostasis through enhanced barrier integrity and anti-inflammatory/antioxidant activities. These findings extend our understanding of TMs and their relationship to the microbial species that act as effectors and/or regulators in the healthy intestine and may lead to novel strategies designed to manipulate tryptophan metabolism to prevent disease and/or restore health to the dysbiotic gut.