Bone marrow stromal cells (MSCs) have the capability under specific conditions of differentiating into various cell types such as osteocytes, chondrocytes, and adipocytes. Here we demonstrate a highly efficient and specific induction of cells with neuronal characteristics, without glial differentiation, from both rat and human MSCs using gene transfection with Notch intracellular domain (NICD) and subsequent treatment with bFGF, forskolin, and ciliary neurotrophic factor. MSCs expressed markers related to neural stem cells after transfection with NICD, and subsequent trophic factor administration induced neuronal cells. Some of them showed voltage-gated fast sodium and delayed rectifier potassium currents and action potentials compatible with characteristics of functional neurons. Further treatment of the induced neuronal cells with glial cell line–derived neurotrophic factor (GDNF) increased the proportion of tyrosine hydroxylase–positive and dopamine-producing cells. Transplantation of these GDNF-treated cells showed improvement in apomorphine-induced rotational behavior and adjusting step and paw-reaching tests following intrastriatal implantation in a 6-hydroxy dopamine rat model of Parkinson disease. This study shows that a population of neuronal cells can be specifically generated from MSCs and that induced cells may allow for a neuroreconstructive approach.

Bone marrow stromal cells (MSCs) have the capability under specific conditions of differentiating into various cell types such as osteocytes, chondrocytes, and adipocytes. Here we demonstrate a highly efficient and specific induction of cells with neuronal characteristics, without glial differentiation, from both rat and human MSCs using gene transfection with Notch intracellular domain (NICD) and subsequent treatment with bFGF, forskolin, and ciliary neurotrophic factor. MSCs expressed markers related to neural stem cells after transfection with NICD, and subsequent trophic factor administration induced neuronal cells. Some of them showed voltage-gated fast sodium and delayed rectifier potassium currents and action potentials compatible with characteristics of functional neurons. Further treatment of the induced neuronal cells with glial cell line–derived neurotrophic factor (GDNF) increased the proportion of tyrosine hydroxylase–positive and dopamine-producing cells. Transplantation of these GDNF-treated cells showed improvement in apomorphine-induced rotational behavior and adjusting step and paw-reaching tests following intrastriatal implantation in a 6-hydroxy dopamine rat model of Parkinson disease. This study shows that a population of neuronal cells can be specifically generated from MSCs and that induced cells may allow for a neuroreconstructive approach.

We found adult human stem cells that can generate, from a single cell, cells with the characteristics of the three germ layers. The cells are stress-tolerant and can be isolated from cultured skin fibroblasts or bone marrow stromal cells, or directly from bone marrow aspirates. These cells can self-renew; form characteristic cell clusters in suspension culture that express a set of genes associated with pluripotency; and can differentiate into endodermal, ectodermal, and mesodermal cells both in vitro and in vivo. When transplanted into immunodeficient mice by local or i.v. injection, the cells integrated into damaged skin, muscle, or liver and differentiated into cytokeratin 14-, dystrophin-, or albumin-positive cells in the respective tissues. Furthermore, they can be efficiently isolated as SSEA-3(+) cells. Unlike authentic ES cells, their proliferation activity is not very high and they do not form teratomas in immunodeficient mouse testes. Thus, nontumorigenic stem cells with the ability to generate the multiple cell types of the three germ layers can be obtained through easily accessible adult human mesenchymal cells without introducing exogenous genes. These unique cells will be beneficial for cell-based therapy and biomedical research.

The stochastic and elite models have been proposed for the mechanism of induced pluripotent stem (iPS) cell generation. In this study we report a system that supports the elite model. We previously identified multilineage-differentiating stress-enduring (Muse) cells in human dermal fibroblasts that are characterized by stress tolerance, expression of pluripotency markers, self-renewal, and the ability to differentiate into endodermal-, mesodermal-, and ectodermal-lineage cells from a single cell. They can be isolated as stage-specific embryonic antigen-3/CD105 double-positive cells. When human fibroblasts were separated into Muse and non-Muse cells and transduced with Oct3/4 , Sox2 , Klf4 , and c-Myc , iPS cells were generated exclusively from Muse cells but not from non-Muse cells. Although some colonies were formed from non-Muse cells, they were unlike iPS cells. Furthermore, epigenetic alterations were not seen, and some of the major pluripotency markers were not expressed for the entire period during iPS cell generation. These findings were confirmed further using cells transduced with a single polycistronic virus vector encoding all four factors. The results demonstrate that in adult human fibroblasts a subset of preexisting adult stem cells whose properties are similar in some respects to those of iPS cells selectively become iPS cells, but the remaining cells make no contribution to the generation of iPS cells. Therefore this system seems to fit the elite model rather than the stochastic model.

Abstract The obturator nerve variably gives off the anterior, posterior, and hip articular branches along its course; however, all branches invariably pass through the obturator canal. Herein, we describe our obturator nerve block technique, which promises to deliver local anesthetic directly into the obturator canal. We performed the obturator nerve block in six patients undergoing transurethral resection of bladder tumor under spinal anesthesia. We also evaluated the spread of dye in a cadaver. With patient placed in the lithotomy position, a linear ultrasound transducer was placed on the anterior part of the genitofemoral sulcus, oriented cephalad, to observe the external orifice of the obturator canal, which is present immediately posterior to the posterior end of the inferior margin of the superior pubic ramus and just medial to the body of the ischium. The needle tip was guided to this location, and 10 ml of 1.5% lidocaine was injected into the obturator canal. The procedure was repeated using 10-ml dye in a cadaver. No obturator jerks were observed during the transurethral resection of bladder tumors in all six cases. Cadaver examination confirmed the dye stained the obturator nerve, with retrograde spread into the pelvic cavity via the obturator canal.

肺癌病巣と病理診断が乖離したリンパ節転移所見により,他の肺内病変が発見されることがある.一方で,肺門リンパ節転移の診断を契機に中咽頭癌が発見された報告はない.症例は73歳,男性.胸部CT検査で右肺底部に腫瘤を認めた.経気管支肺生検の結果,腺癌の診断となった.右肺下葉切除術+リンパ節郭清術が施行された.病理組織学的検査で腫瘍部位は腺癌であったが,右側主気管支周囲リンパ節(#Rt10)は扁平上皮癌であった.術後に施行された喉頭ファイバーで右中咽頭側壁に腫瘍性病変を認めた.生検の結果,高~中分化な扁平上皮癌の診断となり中咽頭腫瘍摘出術が施行された.病理組織学的検査で#Rt10の病変と形態的に類似の像を認めた.腫瘍とリンパ節転移の病理診断との乖離により多発肺癌の発見は経験するが,本症例の如く,他臓器に発見された重複癌の報告は少ない.また,癌高リスク症例に対する術前診断はより慎重に行う必要がある.

Abstract In embryonic stem cells (ESCs) and induced pluripotent stem cells (iPSCs), the expression of an RNA-binding pluripotency-relevant protein, LIN28, and the absence of its antagonist, the tumor-suppressor microRNA (miRNA) let-7, play a key role in maintaining pluripotency. Muse cells are non-tumorigenic pluripotent-like stem cells residing in the bone marrow, peripheral blood, and organ connective tissues as pluripotent surface marker SSEA-3(+). They express pluripotency genes, differentiate into triploblastic-lineage cells, and self-renew at the single cell level. Muse cells do not express LIN28 but do express let-7 at higher levels than in iPSCs. In Muse cells, we demonstrated that let-7 inhibited the PI3K-AKT pathway, leading to sustainable expression of the key pluripotency regulator KLF4 as well as its downstream genes, POU5F1 , SOX2 , and NANOG . Let-7 also suppressed proliferation and glycolysis by inhibiting the PI3K-AKT pathway, suggesting its involvement in non-tumorigenicity. Furthermore, the MEK/ERK pathway is not controlled by let-7 and may have a pivotal role in maintaining self-renewal and suppression of senescence. The system found in Muse cells, in which the tumor suppressor let-7, but not LIN28, tunes the expression of pluripotency genes, might be a rational cell system conferring both pluripotency-like properties and a low risk for tumorigenicity.

Malnutrition is a common problem among hospitalized older patients. Peripheral parenteral nutrition (PN) can improve patient outcomes but can also lead to complications that affect future treatment. Older inpatients, in particular, are expected to be prone to these catheter-related complications. However, the impact of peripheral PN on older inpatients has been rarely investigated. In the current study, the impact of PN on short peripheral catheters (SPCs) was evaluated by comparing signs and symptoms at the time of catheter removal between 22 patients with PN and 27 without. In addition to external clinical assessment, sonographic investigations of the SPC site were performed. The prevalence of external signs and symptoms of complications was similar between the patients (all P > 0.05). However, subcutaneous edema was found by ultrasound in > 80% of patients with PN, compared with 55.6% of those without PN (P = 0.051). Unlike cases without PN, all patients with PN who presented with external signs and symptoms developed subcutaneous edema (P = 0.022). Multivariate analysis demonstrated that administration of PN was independently associated with subcutaneous edema (adjusted odds ratio = 6.88, 95% confidence interval = 1.083-75.486, P = 0.040). For several decades, phlebitis has been the primary focus of complications related to peripheral PN in clinical settings. However, our results imply that peripheral PN causes subcutaneous edema, which can lead to catheter failure in older inpatients. This study contributes to understanding the etiology of catheter failure during peripheral PN in this population.