Abstract To determine if megakaryocytes are targeted by immune thrombocytopenic purpura (ITP) autoantibodies, as are platelets, we have studied the effects of ITP plasma on in vitro megakaryocytopoiesis. Umbilical cord blood mononuclear cells were incubated in the presence of thrombopoietin and 10% plasma from either ITP patients (n = 53) or healthy donors. The yield of megakaryocytic cells, as determined by flow cytometry, was significantly reduced in the presence of ITP plasma containing antiplatelet glycoprotein Ib (GPIb) autoantibodies (P < .001) as compared with both the control and patient plasma with no detectable anti-GPIIb/IIIa or anti-GPIb autoantibodies. Platelet absorption of anti-GPIb autoantibodies in ITP plasmas resulted in double the megakaryocyte production of the same plasmas without absorption, whereas platelet absorption of control plasma had no effect on megakaryocyte yield. Furthermore, 2 human monoclonal autoantibodies isolated from ITP patients, 2E7, specific for human platelet glycoprotein IIb heavy chain, and 5E5, specific for a neoantigen on glycoprotein IIIa expressed on activated platelets, had significant inhibitory effects on in vitro megakaryocytopoiesis (P < .001). Taken together, these data indicate that autoantibodies against either platelet GPIb or platelet GPIIb/IIIa in ITP plasma not only are involved in platelet destruction, but may also contribute to the inhibition of platelet production.

We analyzed the antibody and cytokine responses of twenty-three patients with multisystem inflammatory syndrome of children (MIS-C) that appeared with a three-to-six-week delay following a mild or asymptomatic SARS-CoV-2 infection. These responses were compared to healthy convalescent pediatric COVID-19 patients approximately twenty-eight days after the onset of symptoms. Both groups had strong IgG responses to SARS-CoV-2 spike (S) and nucleocapsid (N) proteins, but the MIS-C patients had weaker antibody responses to certain epitopes in the SARS-CoV-2 S and N proteins and to the S and N proteins of endemic human coronaviruses (HCoV) compared to pediatric convalescent COVID patients. HCoV antibody reactivity was correlated with age. In contrast, MIS-C patients had elevated serum levels of several proinflammatory cytokines compared to convalescent COVID patients, including interleukins IL-6, IL-8, IL-18 and chemokines CCL2, CCL8, CXCL5, CXCL9 and CXCL10 as well as tumor necrosis factor alpha and interferon gamma. Moreover, many cytokine responses of MIS-C patients were positively correlated with antibody responses to the SARS-CoV-2 S, N, membrane and ORF3a proteins while pediatric convalescent COVID patient cytokine responses were more often negatively correlated with antibody responses to the S, N and ORF3a proteins of SARS-CoV-2.