Osteoporosis results from an imbalance in skeletal remodeling that favors bone resorption over bone formation. Bone matrix is degraded by osteoclasts, which differentiate from myeloid precursors in response to the cytokine RANKL. To gain insight into the transcriptional regulation of bone resorption during growth and disease, we generated a conditional knockout of the transcription factor nuclear factor of activated T cells c1 (Nfatc1). Deletion of Nfatc1 in young mice resulted in osteopetrosis and inhibition of osteoclastogenesis in vivo and in vitro. Transcriptional profiling revealed NFATc1 as a master regulator of the osteoclast transcriptome, promoting the expression of numerous genes needed for bone resorption. In addition, NFATc1 directly repressed osteoclast progenitor expression of osteoprotegerin, a decoy receptor for RANKL previously thought to be an osteoblast-derived inhibitor of bone resorption. “Cherubism mice”, which carry a gain-of-function mutation in SH3-domain binding protein 2 (Sh3bp2), develop osteoporosis and widespread inflammation dependent on the proinflammatory cytokine, TNF-α. Interestingly, deletion of Nfatc1 protected cherubism mice from systemic bone loss but did not inhibit inflammation. Taken together, our study demonstrates that NFATc1 is required for remodeling of the growing and adult skeleton and suggests that NFATc1 may be an effective therapeutic target for osteoporosis associated with inflammatory states.

Background This manuscript presents evidence-based guidance on the use of 38% silver diamine fluoride (SDF) for dental caries management in children and adolescents, including those with special health care needs. A guideline workgroup formed by the American Academy of Pediatric Dentistry developed guidance and an evidence-based recommendation regarding the application of 38% SDF to arrest cavitated caries lesions in primary teeth.Types of studies reviewed The basis of the guideline's recommendation is evidence from an existing systematic review "Clinical trials of silver diamine fluoride in arresting caries among children: A systematic review." (JDR Clin Transl Res 2016;1[3]:201–10). A systematic search was conducted in PubMed/MEDLINE, Embase, Cochrane Central Register of Controlled Trials and gray literature databases to identify randomized controlled trials and systematic reviews reporting on the effect of silver diamine fluoride and address peripheral issues such as adverse effects and cost. The Grading of Recommendations Assessment, Development and Evaluation (GRADE) approach was used to assess the quality of the evidence and the evidence-to-decision framework was employed to formulate a recommendation.Results The panel made a conditional recommendation regarding the use of 38% SDF for the arrest of cavitated caries lesions in primary teeth as part of a comprehensive caries management program. After taking into consideration the low cost of the treatment and the disease burden of caries, panel members were confident that the benefits of SDF application in the target populations outweigh its possible undesirable effects. Per GRADE, this is a conditional recommendation based on low-quality evidence.Conclusions and practical implications The guideline intends to inform the clinical practices involving the application of 38% SDF to enhance dental caries management outcomes in children and adolescents, including those with special health care needs. These recommended practices are based upon the best available evidence to-date. A 38% SDF protocol is included in Appendix II (Pediatr Dent 2017;39(5):E135–E145).

The role of bacteria in the etiology of dental caries is long established, while the role of fungi has only recently gained more attention. The microbial invasion of dentin in advanced caries especially merits additional research. We evaluated the fungal and bacterial community composition and spatial distribution within carious dentin. Amplicon 16S rRNA gene sequencing together with quantitative PCR was used to profile bacterial and fungal species in caries-free children (n = 43) and 4 stages of caries progression from children with severe early childhood caries (n = 32). Additionally, healthy (n = 10) and carious (n = 10) primary teeth were decalcified, sectioned, and stained with Grocott’s methenamine silver, periodic acid Schiff (PAS) and calcofluor white (CW) for fungi. Immunolocalization was also performed using antibodies against fungal β-D-glucan, gram-positive bacterial lipoteichoic acid, gram-negative endotoxin, Streptococcus mutans , and Candida albicans . We also performed field emission scanning electron microscopy (FESEM) to visualize fungi and bacteria within carious dentinal tubules. Bacterial communities observed included a high abundance of S . mutans and the Veillonella parvula group, as expected. There was a higher ratio of fungi to bacteria in dentin-involved lesions compared to less severe lesions with frequent preponderance of C . albicans , C . dubliniensis , and in one case C . tropicalis . Grocott’s silver, PAS, CW and immunohistochemistry (IHC) demonstrated the presence of fungi within carious dentinal tubules. Multiplex IHC revealed that fungi, gram-negative, and gram-positive bacteria primarily occupied separate dentinal tubules, with rare instances of colocalization. Similar findings were observed with multiplex immunofluorescence using anti- S . mutans and anti- C . albicans antibodies. Electron microscopy showed monomorphic bacterial and fungal biofilms within distinct dentin tubules. We demonstrate a previously unrecognized phenomenon in which fungi and bacteria occupy distinct spatial niches within carious dentin and seldom co-colonize. The potential significance of this phenomenon in caries progression warrants further exploration.

The role of bacteria in the etiology of dental caries is long established, while the role of fungi has only recently gained more attention. The microbial invasion of dentin in advanced caries especially merits additional research. We evaluated the fungal and bacterial community composition and spatial distribution within carious dentin. Amplicon 16S rRNA gene sequencing together with quantitative PCR was used to profile bacterial and fungal species in caries-free children (n=43) and 4 stages of caries progression from children with severe early childhood caries (n=32). Additionally, healthy (n=10) and carious (n=10) primary teeth were decalcified, sectioned, and stained with Grocott’s methenamine silver, periodic acid Schiff (PAS) and calcofluor white (CW) for fungi. Immunolocalization was also performed using antibodies against fungal β-D-glucan, gram-positive bacterial lipoteichoic acid, Streptococcus mutans, and Candida albicans. We also performed field emission scanning electron microscopy (FESEM) to visualize fungi and bacteria within carious dentinal tubules. Bacterial communities observed included a high abundance of S. mutans and the Veillonella parvula group, as expected. There was a higher ratio of fungi to bacteria in dentin-involved lesions compared to less severe lesions with frequent preponderance of C. albicans, C. dubliniensis, and in one case C. tropicalis. Grocott’s silver, PAS, CW and immunohistochemistry (IHC) demonstrated the presence of fungi within carious dentinal tubules. Multiplex IHC revealed that fungi and gram-positive bacteria primarily occupied separate dentinal tubules, with rare instances of colocalization. Similar findings were observed with multiplex immunofluorescence using anti-S. mutans and anti-C. albicans antibodies. Electron microscopy showed monomorphic bacterial and fungal biofilms within distinct dentin tubules. We demonstrate a previously unrecognized phenomenon in which fungi and bacteria occupy distinct spatial niches within carious dentin and seldom co-colonize. The potential significance of this phenomenon in caries progression warrants further exploration.

In this work, we exploit recent advances in metagenomic assembly and bacteriophage identification to describe the phage content of saliva from 5 mother-baby pairs sampled twice 7 - 11 months apart during the first year of the babies' lives. We identify 25 phage genomes that are comprised of one to 71 contigs, with 16 having a single contig. At the detectable level, phage were sparsely distributed with the most common one being present in 4 of the 20 samples, derived from two mothers and one baby. However, if they were present in the early time point sample from an individual, they were also present in the later sample from the same person more frequently than expected by chance. The nucleotide diversity (π) in phage from the same sample or the same person was much lower than between different individuals, indicating dominance of one strain in each person. This was different from bacterial genomes, which had higher diversity indicating the presence of multiple strains within an individual. We identify likely bacterial hosts for 16 of the 25 phage, including an apparent inovirus that is capable of integrating in the dif site of Haemophilus species. It appears that phage in the oral cavity are sparsely distributed, but can be maintained for months once acquired.