Abstract Recently increasing reported data have suggested that only a small subset of cancer cells possess capability to initiate malignancies including leukemia and solid tumors, which was based on investigation in these cells displaying a distinct surface marker pattern within the primary cancers. CD133 is a putative hematopoietic and neuronal stem‐cell marker, which was also considered as a tumorigenic marker in brain and prostate cancer. We hypothesized that CD133 was a marker closely correlated with tumorigenicity, since it was reported that CD133 expressed in human fetal liver and repairing liver tissues, which tightly associated with hepatocarcinogenesis. Our findings showed that a small population of CD133 positive cells indeed exists in human hepatocellular carcinoma (HCC) cell lines and primary HCC tissues. From SMMC‐7721 cell line, CD133 + cells isolated by MACS manifested high tumorigenecity and clonogenicity as compared with CD133 − HCC cells. The implication that CD133 might be one of the markers for HCC cancer stem‐like cells needed further investigation. © 2006 Wiley‐Liss, Inc.

Abstract The precise regulation of Ca 2+ signals plays a crucial role in the physiological functions of neurons. Here, we investigated the rapid effect of glucocorticoids on Ca 2+ signals in hippocampal neurons. In cultured hippocampal neurons, glucocorticoids inhibited the spontaneous somatic Ca 2+ spikes generated by Kv2.1-organized Ca 2+ microdomains. Furthermore, glucocorticoids rapidly reduced the cell surface expressions of Kv2.1 and Ca V 1.2 channels in hippocampal neurons. In HEK293 cells transfected with Kv2.1 alone, glucocorticoids significantly reduced the surface expression of Kv2.1 with little effect on K + currents. Glucocorticoids inhibited Ca V 1.2 currents but had no effect on the cell surface expression of Ca V 1.2 in HEK293 cells transfected with Ca V 1.2 alone. Notably, in the presence of wild-type Kv2.1, glucocorticoids caused a decrease in the surface expression of Ca V 1.2 channels in HEK293 cells. However, this effect was not observed in the presence of non-clustering Kv2.1S586A mutant channels. Live cell imaging showed that glucocorticoids rapidly decreased Kv2.1 clusters on the plasma membrane. Correspondingly, western blot results indicated a significant increase in the cytoplasmic level of Kv2.1, suggesting the endocytosis of Kv2.1 clusters. Glucocorticoids rapidly decreased the intracellular cAMP concentration and the phosphorylation level of PKA in hippocampal neurons. The PKA inhibitor H89 mimicked the effect of glucocorticoids on Kv2.1, while the PKA agonist forskolin abrogated the effect. In conclusion, glucocorticoids rapidly regulate Ca V 1.2-mediated Ca 2+ signals in hippocampal neurons by promoting the endocytosis of Kv2.1 channel clusters through reducing PKA activity. Significance Statement The rapid non-genomic effect of glucocorticoids on the central nervous system is not fully understood. Ca V 1.2-mediated Ca 2+ signaling microdomains control somatic Ca 2+ signals and regulate excitation-transcription coupling in hippocampal neurons. Here, we demonstrate that glucocorticoids rapidly inhibit Ca V 1.2-mediated somatic Ca 2+ spikes in hippocampal neurons. Glucocorticoids reduce the surface expression of Kv2.1 clusters but do not affect the surface expression of non-clustering Kv2.1. Moreover, glucocorticoids induce the endocytosis of Ca V 1.2 channels through wild-type Kv2.1. However, glucocorticoids cannot induce the endocytosis of Ca V 1.2 channels through Kv2.1S586A mutant channels, which cannot form clusters. This study sheds light on the intricate interplay between glucocorticoids, Kv2.1 channels, and Ca V 1.2 channels, unraveling a dual mechanism that influences both overall Ca 2+ signaling and the intricate organization of neural microdomains.

The electrochemical CO