One promising approach for in vivo studies of cell proliferation is the FUCCI system (fluorescent ubiquitination-based cell cycle indicator).Here, we report the development of a Drosophila-specific FUCCI system (Fly-FUCCI) that allows one to distinguish G1, S, and G2 phases of interphase.Fly-FUCCI relies on fluorochrome-tagged degrons from the Cyclin B and E2F1 proteins, which are degraded by the ubiquitin E3-ligases APC/C and CRL4 Cdt2 , during mitosis or the onset of S phase, respectively.These probes can track cell-cycle patterns in cultured Drosophila cells, eye and wing imaginal discs, salivary glands, the adult midgut, and probably other tissues.To support a broad range of experimental applications, we have generated a toolkit of transgenic Drosophila lines that express the Fly-FUCCI probes under control of the UASt, UASp, QUAS, and ubiquitin promoters.The Fly-FUCCI system should be a valuable tool for visualizing cell-cycle activity during development, tissue homeostasis, and neoplastic growth.

Human cancers frequently harbour mutations in DNA repair genes, rendering the use of DNA damaging agents as an effective therapeutic intervention. As therapy-resistant cells often arise, it is important to better understand the molecular pathways that drive resistance in order to facilitate the eventual targeting of such processes. We employ repair-defective diploid yeast as a model to demonstrate that, in response to genotoxic challenges, nearly all cells eventually undergo checkpoint adaptation, resulting in the generation of aneuploid cells with whole chromosome losses that have acquired resistance to the initial genotoxic challenge. We demonstrate that adaptation inhibition, either pharmacologically, or genetically, drastically reduces the occurrence of resistant cells. Additionally, the aneuploid phenotypes of the resistant cells can be specifically targeted to induce cytotoxicity. We provide evidence that TORC1 inhibition with rapamycin, in combination with DNA damaging agents, can prevent both checkpoint adaptation and the continued growth of aneuploid resistant cells.