Purkinje cells receive synaptic input from several classes of interneurons. Here, we address the roles of inhibitory molecular layer interneurons in establishing Purkinje cell function in vivo. Using conditional genetics approaches in mice, we compare how the lack of stellate cell versus basket cell GABAergic neurotransmission sculpts the firing properties of Purkinje cells. We take advantage of an inducible Ascl1CreER allele to spatially and temporally target the deletion of the vesicular GABA transporter, Vgat, in developing neurons. Selective depletion of basket cell GABAergic neurotransmission increases the frequency of Purkinje cell simple spike firing and decreases the frequency of complex spike firing in adult behaving mice. In contrast, lack of stellate cell communication increases the regularity of Purkinje cell simple spike firing while increasing the frequency of complex spike firing. Our data uncover complementary roles for molecular layer interneurons in shaping the rate and pattern of Purkinje cell activity in vivo.

Ramón y Cajal proclaimed the neuron doctrine based on circuit features he exemplified using cerebellar basket cell projections. Basket cells form dense inhibitory plexuses that wrap Purkinje cell somata and terminate as pinceaux at the initial segment of axons. Here, we demonstrate that HCN1, Kv1.1, PSD95 and GAD67 unexpectedly mark patterns of basket cell pinceaux that map onto Purkinje cell functional zones. Using cell-specific genetic tracing with an Ascl1CreERT2 mouse conditional allele, we reveal that basket cell zones comprise different sizes of pinceaux. We tested whether Purkinje cells instruct the assembly of inhibitory projections into zones, as they do for excitatory afferents. Genetically silencing Purkinje cell neurotransmission blocks the formation of sharp Purkinje cell zones and disrupts excitatory axon patterning. The distribution of pinceaux into size-specific zones is eliminated without Purkinje cell output. Our data uncover the cellular and molecular diversity of a foundational synapse that revolutionized neuroscience.