Abstract Keloid is a benign dermal fibrotic disorder with some features similar to malignant tumors such as hyper-proliferation, apoptosis resistance and invasion. keloid remains a therapeutic challenge in terms of high recurrence rate and lack of satisfactory medical therapies, which is partially due to the incomplete understanding of keloid pathogenesis. A thorough understanding of the cellular and molecular mechanism of keloid pathogenesis would facilitate the development of novel medical therapies for this disease. Here, we performed single-cell RNA-seq of 28,064 cells from keloid skin tissue and adjacent relatively normal tissue. Unbiased clustering revealed substantial cellular heterogeneity of the keloid tissue, which included 21 cell clusters assigned to 11 cell lineages. Differential proportion analysis revealed significant expansion for fibroblasts and vascular endothelial cells in keloid compared with control, reflecting their strong association with keloid pathogenesis. We then identified five previously unrecognized subpopulations of keloid fibroblasts and four subpopulations of vascular endothelial cells. Comparative analyses were performed to identify the dysregulated pathways, regulators and ligand-receptor interactions for keloid fibroblasts and vascular endothelial cells, the two important cell lineages in keloid pathogenesis and for medical interventions. Our results highlight the roles of transforming growth factor beta and Eph-ephrin signaling pathways in both the aberrant fibrogenesis and angiogenesis of keloid. Critical regulators and signaling receptors implicated in the fibrogenesis of other fibrotic disorders, such as TWIST1, FOXO3, SMAD3 and EPHB2 , ranked at the top in the regulatory network of keloid fibroblasts. In addition, tumor-related pathways such as negative regulation of PTEN transcription were found to be activated in keloid fibroblasts and vascular endothelial cells, which may be responsible for the malignant features of keloid. Our study put novel insights into the pathogenesis of keloid, and provided potential targets for medical therapies. Our dataset also constitutes a valuable resource for further investigations of the mechanism of keloid pathogenesis.

Abstract Lymphedema is a chronic tissue edema that frequently occurs following lymph node resection for cancer treatment, and is characterized by progressive swelling, chronic inflammation, excessive fibrosis and adipose deposition in the affected limbs. We still lack targeted medical therapies for this disease due to the incomplete understanding of the mechanism underlying the pathogenesis. Here, we performed single-cell RNA-seq of 70,209 cells of the stromal vascular fraction (SVF) of subcutaneous adipose tissue from patients with cancer-related lymphedema and healthy donors. Unbiased clustering revealed 21 cell clusters, which were assigned to 10 cell lineages. One of the four ASC subpopulations, c3, was significantly expanded in lymphedema, which may be related to the fibrosis and pathologic mineralization of adipose tissues in lymphedema. Dysregulated pathways and genes of ASCs in lymphedema were identified through gene set enrichment analysis and differential regulatory network analysis, which reflect the pathophysiological changes in ASCs in lymphedema: enhanced fibrosis, mineralization and proliferation as well as compromised immunosuppression capacity. In addition, we characterized the three subpopulations of macrophages, and found that the adipose tissue of lymphedema displayed immunological dysfunction characterized by a striking depletion of anti-inflammatory macrophages, i.e., LYVE + resident-like macrophages. Cell-cell communication analysis revealed a perivascular ligand-receptor interaction module among ASCs, macrophages and vascular endothelial cells in adipose tissue. Communication changes for ASCs in lymphedema were identified. For example, PDGFD-PDGFR complex interactions were significantly enhanced between a number of lineages and ASCs, reflecting the role of PDGFD signaling in the pathophysiological changes in ASCs. Finally, we mapped the previously reported candidate genes predisposing to cancer-related lymphedema to cell subpopulations in the SVF, and found that GJC2 , the most likely causal gene was highly expressed in the lymphedema-associated ASC subpopulation c3. In summary, we provided the first comprehensive analysis of cellular heterogeneity, lineage-specific regulatory changes and intercellular communication alterations of the SVF in adipose tissues from cancer-related lymphedema at a single-cell resolution. The lymphedema-associated cell subpopulations and dysregulated pathways may serve as potential targets for medical therapies. Our large-scale dataset constitutes a valuable resource for further investigations of the mechanism of cancer-related lymphedema.

Abstract Background Merkel cell carcinoma (MCC) is a rare and highly aggressive form of skin cancer. However, there is limited research on the clinicopathological features of early‐onset MCC (EOMCC) and the differences between EOMCC and late‐onset MCC (LOMCC). Our objective was to evaluate the clinicopathological features and cancer‐specific survival (CSS) of EOMCC. Methods Our cohort study analyzed data from the Surveillance, Epidemiology, and End Results (SEER) database from January 1, 2018, to December 31, 2020. Data from 1941 patients who were diagnosed with primary cutaneous MCC were included. We then divided the patients with MCC into two groups: those with EOMCC (526 patients) and those with LOMCC (1415 patients). CSS is used as the primary outcome. Results The EOMCC group exhibited trends toward advanced tumor progression, an expanded surgical scope, increased lymph node retrieval, intensified radiotherapy, greater utilization of systemic therapy, and a better prognosis. Multivariate analysis revealed that LOMCC (HR 3.305 [2.002–5.456], P < 0.001), advanced T stage (HR 1.430 [1.139–1.797], P = 0.002), advanced N stage (HR 1.522 [1.221–1.897], P < 0.001), M1 stage (HR 2.587 [1.480–4.521], P < 0.001), and radiation (HR 0.586 [0.410–0.837], P = 0.003) were significantly associated with CSS. Among these factors, EOMCC/LOMCC was most strongly associated with CSS, indicating that LOMCC is an independent risk factor for CSS. Interestingly, we found that regional EOMCC and localized or in situ LOMCC had almost completely overlapping survival curves ( P log‐rank = 0.620). Additionally, we observed that the TNM staging + age model was a more accurate predictor of CSS among MCC patients than using TNM staging alone. Conclusions We found that EOMCC has distinct clinicopathological features compared to LOMCC. EOMCC is associated with better CSS. The combination of TNM staging and age was more accurate for predicting patient outcomes than TNM staging alone.

Introduction Keloids, benign fibroproliferative tumours characterised by excessive fibroblast proliferation and over-deposition of extracellular matrix, pose a therapeutic challenge with high recurrence rates. Betamethasone (diprospan) injection (BI) is one of the most common non-invasive therapies for keloids. Pulsed dye laser (PDL) has the function of closing microvessels, which may become one of the auxiliary treatment methods of BI and may enhance its curative effect. Some studies suggest that the combination of a dual-wavelength dye laser (DWL) and BI may offer superior efficacy. This randomised controlled trial aims to evaluate whether the combined therapy of DWL+BI outperforms BI alone in treating keloids. Methods and analysis This single-centre, parallel positive control, randomised trial evaluates the efficacy and safety of DWL (585 nm PDL+1064 nm neodymium-doped yttrium aluminium garnet) combined with BI for keloid treatment. Enrolling 66 adult patients, participants are randomised into DWL+BI or BI groups in a 1:1 ratio. Over 12 weeks, each group undergoes four treatment sessions, ensuring blinding for outcome assessors. Data collection occurs at multiple time points (4, 12, 24 and 52 weeks), with primary outcomes assessing the Vancouver Scar Scale (VSS) improvement rate 24 weeks after the last intervention. Secondary outcomes include VSS improvement rates, changes in keloid volume, changes in relative perfusion index measured by laser speckle contrast imaging, Patient and Observer Scar Assessment Scale results and patient satisfaction. Safety assessments include vital signs, laboratory tests, pregnancy tests and self-reports of adverse reactions. Ethics and dissemination The results will be presented in peer-reviewed journals and at international conferences. This study is approved by the Ethics Committee of Peking Union Medical College Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences. Trial registration number Chinese Clinical Trial Register (ChiCTR2400080148).

Diabetic foot ulcers (DFUs) pose a critical medical challenge, significantly im-pairing the quality of life of patients. Adipose-derived stem cells (ADSCs) have been identified as a promising therapeutic approach for improving wound healing in DFUs. Despite extensive exploration of the mechanical aspects of ADSC therapy against DFU, its clinical applications remain elusive. In this review, we aimed to bridge this gap by evaluating the use and advancements of ADSCs in the clinical management of DFUs. The review begins with a discussion of the classification and clinical management of diabetic foot conditions. It then discusses the current landscape of clinical trials, focusing on their geographic distribution, reported efficacy, safety profiles, treatment timing, administration techniques, and dosing considerations. Finally, the review discusses the preclinical strategies to enhance ADSC efficacy. This review shows that many trials exhibit biases in study design, unclear inclusion criteria, and intervention protocols. In conclusion, this review underscores the potential of ADSCs in DFU treatment and emphasizes the critical need for further research and refinement of therapeutic approaches, with a focus on improving the quality of future clinical trials to enhance treatment outcomes and advance the field of diabetic wound care.