The course of chronic lymphocytic leukemia (CLL) is variable. In aggressive disease, the CLL cells usually express an unmutated immunoglobulin heavy-chain variable-region gene (IgVH ) and the 70-kD zeta-associated protein (ZAP-70), whereas in indolent disease, the CLL cells usually express mutated IgVH but lack expression of ZAP-70.

Although presentation of antigen to the T cell receptor is necessary for the initiation of an immune response, additional molecules expressed on antigen-presenting cells deliver essential costimulatory signals. T cell activation, in the absence of costimulation, results in T cell anergy. The B7-1 protein is a costimulator molecule that regulates interleukin-2 (IL-2) secretion by signaling through the pathway that uses CD28 and CTLA-4 (hereafter referred to as the CD28 pathway). We have cloned a counter-receptor of CD28 and CTLA-4, termed B7-2. Although only 26 percent identical to B7-1, B7-2 also costimulates IL-2 production and T cell proliferation. Unlike B7-1, B7-2 messenger RNA is constitutively expressed in unstimulated B cells. It is likely that B7-2 provides a critical early costimulatory signal determining if the T cell will contribute to an immune response or become anergic.

Diffuse large B cell lymphoma (DLBCL) is the most common form of blood cancer and is characterized by a striking degree of genetic and clinical heterogeneity. This heterogeneity poses a major barrier to understanding the genetic basis of the disease and its response to therapy. Here, we performed an integrative analysis of whole-exome sequencing and transcriptome sequencing in a cohort of 1,001 DLBCL patients to comprehensively define the landscape of 150 genetic drivers of the disease. We characterized the functional impact of these genes using an unbiased CRISPR screen of DLBCL cell lines to define oncogenes that promote cell growth. A prognostic model comprising these genetic alterations outperformed current established methods: cell of origin, the International Prognostic Index comprising clinical variables, and dual MYC and BCL2 expression. These results comprehensively define the genetic drivers and their functional roles in DLBCL to identify new therapeutic opportunities in the disease.

Abstract Since the publication of the Revised European-American Classification of Lymphoid Neoplasms in 1994, subsequent updates of the classification of lymphoid neoplasms have been generated through iterative international efforts to achieve broad consensus among hematopathologists, geneticists, molecular scientists, and clinicians. Significant progress has recently been made in the characterization of malignancies of the immune system, with many new insights provided by genomic studies. They have led to this proposal. We have followed the same process that was successfully used for the third and fourth editions of the World Health Organization Classification of Hematologic Neoplasms. The definition, recommended studies, and criteria for the diagnosis of many entities have been extensively refined. Some categories considered provisional have now been upgraded to definite entities. Terminology for some diseases has been revised to adapt nomenclature to the current knowledge of their biology, but these modifications have been restricted to well-justified situations. Major findings from recent genomic studies have impacted the conceptual framework and diagnostic criteria for many disease entities. These changes will have an impact on optimal clinical management. The conclusions of this work are summarized in this report as the proposed International Consensus Classification of mature lymphoid, histiocytic, and dendritic cell tumors.

The use of autologous bone marrow transplantation is increasing in the management of advanced cancers. Many investigators have attempted to "purge" autologous marrow of residual tumor cells because of concern that reinfused tumor cells might contribute to relapse. The efficacy of purging remains unproved.

Jessica Okosun, Csaba Bödör and colleagues performed whole-genome or whole-exome sequencing on 10 follicular lymphoma and transformed follicular lymphoma pairs, followed by deep sequencing of 28 target genes in an additional 122 cases. They identify recurrent mutations in linker histone genes and genes involved in JAK-STAT signaling, NF-κB signaling and B cell development. Follicular lymphoma is an incurable malignancy1, with transformation to an aggressive subtype representing a critical event during disease progression. Here we performed whole-genome or whole-exome sequencing on 10 follicular lymphoma–transformed follicular lymphoma pairs followed by deep sequencing of 28 genes in an extension cohort, and we report the key events and evolutionary processes governing tumor initiation and transformation. Tumor evolution occurred through either a 'rich' or 'sparse' ancestral common progenitor clone (CPC). We identified recurrent mutations in linker histone, JAK-STAT signaling, NF-κB signaling and B cell developmental genes. Longitudinal analyses identified early driver mutations in chromatin regulator genes (CREBBP, EZH2 and KMT2D (MLL2)), whereas mutations in EBF1 and regulators of NF-κB signaling (MYD88 and TNFAIP3) were gained at transformation. Collectively, this study provides new insights into the genetic basis of follicular lymphoma and the clonal dynamics of transformation and suggests that personalizing therapies to target key genetic alterations in the CPC represents an attractive therapeutic strategy.

The maximal T-cell response to its antigen requires presentation of the antigen by a major histocompatibility complex class II molecule as well as the delivery of one or more costimulatory signals provided by the antigen-presenting cell (APC). Although a number of candidate molecules have been identified that are capable of delivering a costimulatory signal, increasing evidence suggests that one such critical pathway involves the interaction of the T-cell surface antigen CD28 with its ligand B7, expressed on APCs. In view of the number of potential costimulatory molecules that might be expressed on the cell surface of APCs, artificial APCs were constructed by stable transfection of NIH 3T3 cells with HLA-DR7, B7, or both. Here, we show that in a human antigen-specific model system, when tetanus toxoid peptide antigen is presented by cells cotransfected with HLA-DR7 and B7, optimal T-cell proliferation and interleukin 2 production result. In contrast, antigen presentation, in the absence of B7 costimulation, results in T-cell clonal anergy. These results demonstrate that it is possible to induce antigen-specific clonal tolerance in human T cells that have been previously sensitized to antigen. The artificial antigen-presenting system provides a useful model for the investigation of the biochemical events involved in the generation of tolerance and for the study of signals necessary to overcome tolerance.

Cancer is associated with immune deficiency, but the biologic basis of this is poorly defined. Here we demonstrate that impaired actin polymerization results in CD4+ and CD8+ T cells from patients with chronic lymphocytic leukemia (CLL) exhibiting defective immunological synapse formation with APCs. Although this synapse dysfunction was in part a result of the CLL cells having poor APC function, defective actin polymerization was also identified in T cells from patients with CLL. We further demonstrate that, following contact with CLL cells, defects in immune synapse formation were induced in healthy allogeneic T cells. This required direct contact and was inhibited by blocking adhesion molecules on CLL B cells. In T cells from patients with CLL and in T cells from healthy individuals that had been in contact with CLL cells, recruitment of key regulatory proteins to the immune synapse was inhibited. Treatment of autologous T cells and CLL cells with the immunomodulating drug lenalidomide resulted in improved synapse formation. These results define what we believe to be a novel immune dysfunction in T cells from patients with CLL that has implications for both autologous and allogeneic immunotherapy approaches and identifies repair of immune synapse defects as an essential step in improving cancer immunotherapy approaches.

Both single-agent ibrutinib and chlorambucil plus obinutuzumab have shown superior efficacy to chlorambucil monotherapy and are standard first-line treatments in chronic lymphocytic leukaemia. We compared the efficacy of the combination of ibrutinib plus obinutuzumab with chlorambucil plus obinutuzumab in first-line chronic lymphocytic leukaemia or small lymphocytic lymphoma.iLLUMINATE is a multicentre, randomised, open-label, phase 3 trial done at 74 academic and community hospitals in Australia, Canada, Israel, New Zealand, Russia, Turkey, the EU, and the USA in patients with previously untreated chronic lymphocytic leukaemia or small lymphocytic lymphoma, either aged 65 years or older or younger than 65 years with coexisting conditions. Patients were randomly assigned (1:1) using a blocked randomisation schedule, stratified by Eastern Cooperative Oncology Group performance status and cytogenetics, to receive ibrutinib plus obinutuzumab (oral ibrutinib [420 mg once daily continuously] combined with intravenous obinutuzumab [100 mg on day 1, 900 mg on day 2, 1000 mg on day 8, and 1000 mg on day 15 of cycle 1 and on day 1 of subsequent 28-day cycles, for a total of six cycles]) or chlorambucil plus obinutuzumab (oral chlorambucil [0·5 mg/kg bodyweight on days 1 and 15 of each 28-day cycle for six cycles] combined with the same obinutuzumab regimen). Allocation concealment was achieved using an interactive web response system. Patients and investigators were not masked to treatment assignment. The primary endpoint was progression-free survival assessed by a masked independent review committee in the intention-to-treat population. Safety was assessed in all patients who received at least one dose of study treatment. This study is registered with ClinicalTrials.gov (NCT02264574), and patient enrolment is complete.Between Oct 6, 2014, and Oct 12, 2015, 229 patients were enrolled and randomly assigned to receive ibrutinib plus obinutuzumab (n=113) or chlorambucil plus obinutuzumab (n=116). After a median follow-up of 31·3 months (IQR 29·4-33·2), median progression-free survival was significantly longer in the ibrutinib plus obinutuzumab group (median not reached [95% CI 33·6-non-estimable]) than in the chlorambucil plus obinutuzumab group (19·0 months [15·1-22·1]; hazard ratio 0·23; 95% CI 0·15-0·37; p<0·0001). Estimated 30-month progression-free survival was 79% (95% CI 70-85) in the ibrutinib plus obinutuzumab group and 31% (23-40) in the chlorambucil plus obinutuzumab group. The most common grade 3 or 4 adverse events in both groups were neutropenia and thrombocytopenia. Serious adverse events occurred in 65 (58%) of 113 patients treated with ibrutinib plus obinutuzumab and 40 (35%) of 115 patients treated with chlorambucil plus obinutuzumab. Ibrutinib or chlorambucil treatment-related deaths were reported in one (1%) of 113 patients in the ibrutinib plus obinutuzumab group (sudden death) and one (1%) of 115 patients in the chlorambucil plus obinutuzumab group (neuroendocrine carcinoma of the skin).Ibrutinib plus obinutuzumab is an efficacious and safe chemotherapy-free combination treatment in previously untreated patients with chronic lymphocytic leukaemia or small lymphocytic lymphoma independent of high-risk features and provides an alternative first-line treatment option for these patients.Pharmacyclics LLC, an AbbVie Company, and Janssen Research and Development.

Background & AimsPancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is characterized by a prominent desmoplastic microenvironment that contains many different immune cells. Activated pancreatic stellate cells (PSCs) contribute to the desmoplasia. We investigated whether distinct stromal compartments are differentially infiltrated by different types of immune cells.MethodsWe used tissue microarray analysis to compare immune cell infiltration of different pancreaticobiliary diseased tissues (PDAC, ampullary carcinoma, cholangiocarcinoma, mucinous cystic neoplasm, chronic inflammation, and chronic pancreatitis) and juxtatumoral stromal (<100 μm from tumor) and panstromal compartments. We investigated the association between immune infiltrate and patient survival times. We also analyzed T-cell migration and tumor infiltration in LSL-KrasG12D/+; LSL-Trp53R172H/+; Pdx-1-Cre (KPC) mice and the effects of all-trans retinoic acid (ATRA) on these processes.ResultsJuxtatumoral compartments in PDAC samples from 2 independent groups of patients contained increased numbers of myeloperoxidase+ and CD68+ cells compared with panstromal compartments. However, juxtatumoral compartments of PDACs contained fewer CD8+, FoxP3+, CD56+, or CD20+ cells than panstromal compartments, a distinction absent in ampullary carcinomas and cholangiocarcinomas. Patients with PDACs that had high densities of CD8+ T cells in the juxtatumoral compartment had longer survival times than patients with lower densities. In KPC mice, administration of ATRA, which renders PSCs quiescent, increased numbers of CD8+ T cells in juxtatumoral compartments. We found that activated PSCs express cytokines, chemokines, and adhesion molecules that regulate T-cell migration. In vitro migration assays showed that CD8+ T cells, from patients with PDAC, had increased chemotaxis toward activated PSCs, which secrete CXCL12, compared with quiescent PSCs or tumor cells. These effects could be reversed by knockdown of CXCL12 or treatment of PSCs with ATRA.ConclusionsBased on studies of human PDAC samples and KPC mice, activated PSCs appear to reduce migration of CD8+ T cells to juxtatumoral stromal compartments, preventing their access to cancer cells. Deregulated signaling by activated PSCs could prevent an effective antitumor immune response. Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is characterized by a prominent desmoplastic microenvironment that contains many different immune cells. Activated pancreatic stellate cells (PSCs) contribute to the desmoplasia. We investigated whether distinct stromal compartments are differentially infiltrated by different types of immune cells. We used tissue microarray analysis to compare immune cell infiltration of different pancreaticobiliary diseased tissues (PDAC, ampullary carcinoma, cholangiocarcinoma, mucinous cystic neoplasm, chronic inflammation, and chronic pancreatitis) and juxtatumoral stromal (<100 μm from tumor) and panstromal compartments. We investigated the association between immune infiltrate and patient survival times. We also analyzed T-cell migration and tumor infiltration in LSL-KrasG12D/+; LSL-Trp53R172H/+; Pdx-1-Cre (KPC) mice and the effects of all-trans retinoic acid (ATRA) on these processes. Juxtatumoral compartments in PDAC samples from 2 independent groups of patients contained increased numbers of myeloperoxidase+ and CD68+ cells compared with panstromal compartments. However, juxtatumoral compartments of PDACs contained fewer CD8+, FoxP3+, CD56+, or CD20+ cells than panstromal compartments, a distinction absent in ampullary carcinomas and cholangiocarcinomas. Patients with PDACs that had high densities of CD8+ T cells in the juxtatumoral compartment had longer survival times than patients with lower densities. In KPC mice, administration of ATRA, which renders PSCs quiescent, increased numbers of CD8+ T cells in juxtatumoral compartments. We found that activated PSCs express cytokines, chemokines, and adhesion molecules that regulate T-cell migration. In vitro migration assays showed that CD8+ T cells, from patients with PDAC, had increased chemotaxis toward activated PSCs, which secrete CXCL12, compared with quiescent PSCs or tumor cells. These effects could be reversed by knockdown of CXCL12 or treatment of PSCs with ATRA. Based on studies of human PDAC samples and KPC mice, activated PSCs appear to reduce migration of CD8+ T cells to juxtatumoral stromal compartments, preventing their access to cancer cells. Deregulated signaling by activated PSCs could prevent an effective antitumor immune response.