ABSTRACT Neuroinflammation in utero may result in life-long neurological disabilities. Microglia play a pivotal role, but the mechanisms are poorly understood. No early postnatal treatment strategies exist to enhance neuroprotective potential of microglia. We hypothesized that agonism on α7 nicotinic acetylcholine receptor (α7nAChR) in fetal microglia will augment their neuroprotective transcriptome profile, while the antagonistic stimulation of α7nAChR will achieve the opposite. Using an in vivo - in vitro model of developmental programming of neuroinflammation induced by lipopolysaccharide (LPS), we validated this hypothesis in primary fetal sheep microglia cultures re-exposed to LPS in presence of a selective α7nAChR agonist or antagonist. Our RNAseq and protein level findings show that a pro-inflammatory microglial phenotype acquired in vitro by LPS stimulation is reversed with α7nAChR agonistic stimulation. Conversely, antagonistic α7nAChR stimulation potentiates the pro-inflammatory microglial phenotype. Surprisingly, under conditions of LPS double-hit an interference of a postulated α7nAChR - ferroportin signaling pathway may impede this mechanism. These results suggest a therapeutic potential of α7nAChR agonists in early re-programming of microglia in neonates exposed to in utero inflammation via an endogenous cerebral cholinergic anti-inflammatory pathway. Future studies will assess the role of interactions between inflammation-triggered microglial iron sequestering and α7nAChR signaling in neurodevelopment.

Information is needed on vaccination protocols used by veterinarians and dairy producers to prevent and control infections in dairy herds. This observational study described farm's vaccination standard operating procedures (SOP) developed by veterinarians in collaboration with dairy producers in Québec. Data pertaining to vaccination protocols and dairy producer practices were collected as part of the biosecurity component of the National Mandatory Quality Assurance Certification Program (proAction). Generalized statistical mixed-effects models were used to assess associations between dairy herd characteristics and the vaccination SOP, encompassing various vaccination types. These included any vaccination, core vaccines only (bovine respiratory syncytial virus, infectious bovine rhinotracheitis herpesvirus, parainfluenza virus type 3, bovine viral diarrhea virus type 1 and type 2) and vaccination against diarrhea, mastitis, or clostridial diseases. These models accounted for random variations related to clustering by veterinarians and veterinary clinics. Furthermore, the variance of the outcome was partitioned into producer, veterinarian, and veterinary clinic levels to explore the proportion of the total variance attributable to each group. A total of 3,759 standardized vaccination procedures completed between 2018 and 2021 were analyzed. At least one vaccination target was included in the vaccination SOP in 89% of the dairy herds. The most frequently included vaccine in the SOP was core vaccines, comprising 88%, followed by mastitis (22%), neonatal diarrhea (18%), and clostridial diseases (15%). The vaccination SOPs, particularly core, mastitis, and diarrhea vaccinations, mainly varied due to the veterinarian's characteristics, followed by the clinic's characteristics. In contrast, the decision to included clostridial vaccination primarily varied with the veterinary clinic (76%). Organic producers generally included fewer vaccinations in their SOPs, including core vaccines, than conventional producers. In addition, producers who were providing access to pasture had fewer vaccination SOP for vaccination against mastitis and neonatal diarrhea but more vaccination SOP for clostridial vaccination.

Abstract Aim Chronically instrumented non-anesthetized fetal sheep (CINAFS) have been the mainstay model of human fetal development for 60 years. As a large “two for one” animal model, with instrumentation of the ewe and her fetus, the model poses challenges to implement de novo and to maintain overtime at the highest standards of operating procedures to ensure its ongoing performance. A common, yet conventionally underreported issue researchers face is the rate of animal loss. Here, we investigate what determines the success of the pregnant sheep model. Methods We conducted a retrospective cohort study consisting of 82 experiments spanning the course of six years. Our team identified ten variables that we anticipated were likely to influence the experimental outcome, such as the time of year, animal size, and surgical complexity. Results The single variable identified in this study as determining the successful outcome of the experiments is the experience level of the team. Conclusion The CINAFS model offers enormous potential to further our understanding of human fetal development and to create interventional technologies. However, to improve the outcomes of CINAFS models, improved communication and training are needed. We discuss the implications of our findings for the successful implementation of this challenging yet scientifically advantageous animal model of human physiology. Key points The fetal sheep model closely mirrors the physiology of human fetal development In addition to its high translational potential, this model is known to have some generally not reported rate of experimental failure We show that factors such as animal characteristics & surgical complexity do not influence the experimental outcomes Instead, the key factor in model experimental success is the level of the research team’s experience The key factors to improve the animal model outcomes are an intra- and inter-team communication