Panzootic chytrid fungus out of Asia Species in the fungal genus Batrachochytrium are responsible for severe declines in the populations of amphibians globally. The sources of these pathogens have been uncertain. O'Hanlon et al. used genomics on a panel of more than 200 isolates to trace the source of the frog pathogen B. dendrobatidis to a hyperdiverse hotspot in the Korean peninsula (see the Perspective by Lips). Over the past century, the trade in amphibian species has accelerated, and now all lineages of B. dendrobatidis occur in traded amphibians; the fungus has become ubiquitous and is diversifying rapidly. Science , this issue p. 621 ; see also p. 604

ABSTRACT Parasitic chytrid fungi have emerged as a significant threat to amphibian species worldwide, necessitating the development of techniques to isolate these pathogens into sterile culture for research purposes. However, early methods of isolating chytrids from their hosts relied on killing amphibians. We modified a pre-existing protocol for isolating chytrids from infected animals to use toe clips and biopsies from toe webbing rather than euthanizing hosts, and distributed the protocol to interested researchers worldwide as part of the BiodivERsA project RACE – here called the RML protocol. In tandem, we developed a lethal procedure for isolating chytrids from tadpole mouthparts. Reviewing a database of use a decade after their inception, we find that these methods have been widely applied across at least 5 continents, 23 countries and in 62 amphibian species, and have been successfully used to isolate chytrids in remote field locations. Isolation of chytrids by the non-lethal RML protocol occured in 18% of attempts with 207 fungal isolates and three species of chytrid being recovered. Isolation of chytrids from tadpoles occured in 43% of attempts with 334 fungal isolates of one species ( Batrachochytrium dendrobatidis ) being recovered. Together, these methods have resulted in a significant reduction and refinement of our use of threatened amphibian species and have improved our ability to work with this important group of emerging fungal pathogens.

The emerging fungal pathogen, Batrachochytrium salamandrivorans (Bsal) is responsible for the catastrophic decline of European salamanders and poses a threat to amphibians globally. The amphibian skin microbiome is strongly associated with disease outcome for several host-pathogen systems, yet its role in Bsal infection remains unresolved. In addition, many in-vivo Bsal studies to date have relied on specimens that have been kept in captivity for long periods without considering the influence of environment on the microbiome and how this may impact the host response to pathogen exposure. We characterised the impact of captivity and exposure to Bsal on the skin bacterial and fungal communities of two co-occurring European newt species, the smooth newt (Lissotriton vulgaris) and the great-crested newt (Triturus cristatus). Bsal infection and subsequent mortality in both newt species was associated with perturbation of the skin microbiome and possible dysbiosis. In addition, reduced microbial diversity and changes in microbiome structure accompanied the transition of newts from the wild to captivity, suggesting a possible decline in microbe-associated protection and increased risk of infection by opportunistic pathogens. Our findings advance current understanding of the role of host-associated microbiota in Bsal infection and highlight important considerations for ex-situ amphibian conservation programmes.