Ifosfamide and other oxazaphosphorines can result in hemorrhagic cystitis, a constellation of complications caused by acrolein metabolites. We previously showed that a single dose of IPSE, a schistosome-derived host modulatory protein, can ameliorate ifosfamide-related cystitis; however, the exact mechanisms underlying this urotoxic effect and its prevention are not fully understood. To provide insights into IPSE's protective mechanism, we undertook transcriptional profiling of bladders from ifosfamide-treated mice, with or without IPSE pretreatment. Following ifosfamide challenge, there was upregulation of a range of pro-inflammatory genes. The pro-inflammatory pathway involving the IL-1β, TNF-α and IL-6 triad via NF-κB and STAT3 signaling pathways was identified as the key driver of inflammation. The NRF2-mediated oxidative stress response pathway, which regulates both Hmox1-mediated heme homoeostasis and expression of antioxidant enzymes, was highly activated. Anti-inflammatory and cellular proliferation cascades implicated in tissue repair, namely Wnt, Hedgehog and PPAR pathways, were downregulated. IPSE administration before ifosfamide injection resulted in significant downregulation of major proinflammatory pathways including the triad of IL-1β, TNF-α and IL-6 pathways, the interferon signaling pathway, and less apparent reduction in oxidative stress responses. Taken together, we have identified signatures of acute phase inflammation and oxidative stress responses in the ifosfamide-injured bladder, which are reversed by pretreatment with IPSE, a parasite derived anti-inflammatory molecule. In addition to providing new insights into the underlying mechanism of IPSE's therapeutic effects, this work has revealed several pathways that could be therapeutically targeted to prevent and treat ifosfamide-induced hemorrhagic cystitis.

Chemotherapy-induced hemorrhagic cystitis is characterized by bladder pain and voiding dysfunction caused by hemorrhage and inflammation. Of currently available therapies, prophylactic 2-mercaptoethanesulfonic acid (MESNA) has limited efficacy and cannot treat pre-existing lesions. Therefore, novel therapeutic options to treat hemorrhagic cystitis are needed. We previously reported that systemic administration of the Schistosomiasis haematobium-derived protein H-IPSEH06 (IL-4-inducing principle from Schistosoma mansoni eggs), is superior to 3 doses of MESNA in alleviating hemorrhagic cystitis. Based on prior reports by others on S. mansoni IPSE and additional work by our group, we reasoned that H-IPSEH06 mediates its effects on hemorrhagic cystitis by binding IgE on basophils and inducing IL-4 expression, promoting urothelial proliferation, and translocating to the nucleus to modulate expression of genes implicated in relieving bladder dysfunction. We speculated that local bladder injection of the S. haematobium IPSE ortholog IPSEH03, hereafter called H-IPSEH03, might be more efficacious in preventing hemorrhagic cystitis compared to systemic administration of IPSEH06. We demonstrate herein that H-IPSEH03 is a promising therapeutic for the treatment of voiding dysfunction and bladder pain in hemorrhagic cystitis. Namely, it attenuates ifosfamide-induced increases in bladder wet weight in an IL-4-dependent fashion. H-IPSEH03 relieves hemorrhagic cystitis-associated allodynia. Finally, H-IPSEH03 drives increased urothelial cell proliferation. This indicates that IPSE induces bladder healing mechanisms, which suggests that it may be a novel non-opioid analgesic to treat bladder pain syndromes.

The genus Amblyomma contains the highest percentage of reptile-associated ticks, and comprises approximately nine subgenera. One of these subgenera is Adenopleura, which also encompasses Amblyomma javanense, and its type species Amblyomma compressum. This study describes a new Amblyomma species associated with Bengal monitor lizards (Varanus bengalensis) based on morphology and its mitogenome in Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan. Reptiles belonging to different genera were examined for Amblyomma ticks and only the monitor lizard was infested with ticks in the District Bajaur. Collected Amblyomma cf. javanense ticks were analyzed and formally described as a new species. Overall, 57 A. cf. javanense ticks were collected on monitor lizards (4/27) with a 15% prevalence of infestation, 2.1 mean abundance, and 14.3 mean intensity. Ticks comprised males (n = 23, 40%), females (n = 14, 25%) and nymphs (n = 20, 35%), while no larvae were found. BLAST analysis of A. cf. javanense sequences showed the following maximum identities; 98.25% with undetermined Amblyomma species based on 12S rRNA, 96.07% with A. javanense based on 16S rRNA, 99.56% and 90.95% with an Amblyomma sp. and A. javanense, respectively, based on ITS2. Moreover, the mitochondrial genome of A. cf. javanense showed maximum identities of 80.75%, 80.48% and 79.42% with Amblyomma testudinarium, A. javanense, and Amblyomma sp., respectively. The phylogenetic analysis of A. cf. javanense revealed that its 12S rRNA and 16S rRNA are closely related to an Amblyomma sp. and A. javanense, respectively, from Sri Lanka, its ITS2 is closely related to A. javanense from China and an Amblyomma sp. from Sri Lanka, and its mitogenome is closely related to A. javanense and Amblyomma sp. from China. The pairwise distance analysis resulted in divergence of 0-1.71% (12S rRNA), 0-17.5% (16S rRNA), 0-9.1% (ITS2) and 0-20.5% (mitochondrial genome). We also contributed the full-length mitochondrial genome sequence of A. compressum and showed that this species does not share a most recent common ancestor with A. javanense. As the subgenus Adenopleura is paraphyletic, this study could help to understand the systematics and phylogeny of this taxon.