Abstract BaxΔ2 is a pro-apoptotic isoform of the Bax family. We have previously shown that BaxΔ2 protein expression is low in most healthy human tissues with the protein mainly scattered in the connective tissues. Surprisingly, in skin tissue, the BaxΔ2-positive staining was strikingly strong, especially in the basal layer of the epidermis. It has been documented that melanin in the basal cells displays a brown color that could give false-positive staining in the commonly used DAB-based (3-3’-diaminobenzidine) immunostaining. To avoid the false-positive staining from DAB-melanin, we performed immunofluorescent staining on the same set of tissues which were positive for BaxΔ2 in the DAB immunostaining. The results from co-immunofluorescent staining of BaxΔ2 and a basal cell marker CK-14 showed that the previously detected DAB-stained BaxΔ2-positive epidermal cells were CK-14 positive but BaxΔ2 negative. Consistent with our previous finding, the BaxΔ2-positive cells in the dermis connective tissues are positive in both DAB-based and fluorescence-based immunostainings. These data indicate that the DAB-stained BaxΔ2 positive cells in the basal layer of skin tissue are false-positive due to a misinterpretation of the melanin color, but the dermal connective tissue still presents real BaxΔ2 positive staining.

ABSTRACT Creatine (Cr) is recognized for its role in enhancing cognitive functions through the phosphocreatine (pCr)–creatine kinase system involved in brain energy homeostasis. It is reversibly converted into pCr by creatine kinase (CK). A brain‐specific isoform of CK, known as CK‐BB, is implicated in the brain's energy metabolism. The objective of this research is to ascertain the impact of Cr supplementation on learning and memory skills as well as on structural synaptic plasticity, by modulating CK‐BB. First, we utilized various concentrations of D‐galactose (D‐gal) to create an aging mouse model. Our findings indicated that D‐gal injections at 100 and 1000 mg/kg could lead to cognitive decline, oxidative stress, and damage to structural synaptic plasticity. CK‐BB expression and its activity were reduced at least by approximately 20% in mice injected with 100 and 1000 mg/kg D‐gal compared with control group. Next, an adeno‐associated virus directed against CKB was employed to reduce CK‐BB levels by 34% in the brain. The reduction of CK‐BB in the brain resulted in deficits in learning and memory, oxidative stress, and morphological harm to the hippocampal spines of mice. Finally, the diet of the D‐gal‐induced aging model was enriched with 3% Cr. Mice that received 3% Cr supplementation exhibited a 36% increase in CK‐BB activity and a 14.3% increase in CK‐BB expression following prolonged D‐gal administration. In addition, Cr supplementation mitigated the cognitive impairment, oxidative stress, and hippocampal structural plasticity damage caused by chronic D‐gal injections. Overall, our study revealed that CK‐BB has a critical role in mediating structural plasticity in D‐gal‐induced cognitive impairment. Moreover, it showed that supplementary Cr could serve as a potent neuroprotective substance, preventing or delaying the course of age‐related cognitive deficits.

This study investigated the association between NAFLD and liver fibrosis and the ratio of gamma-glutamyl transferase to high-density lipoprotein cholesterol (GGT/HDL-C). In this cross-sectional study, we included 4764 subjects who participated in the National Health and Nutrition Examination Survey (NHANES) during 2017–2018. Adjusted multivariate logistic regression analysis was utilized to evaluate the relationships between GGT/HDL-C levels and NAFLD, fatty liver degree, and liver fibrosis. The non-linear link between NAFLD and the GGT/HDL-C ratio was examined using generalized additive models. There was a non-linear association between GGT/HDL-C and the risk of NAFLD, and all regression models demonstrated a strong relationship between GGT/HDL-C levels and the risk of liver fibrosis, the degree of hepatic steatosis, and the prevalence of NAFLD. Subgroup analyses revealed a significant correlation between the risk of NAFLD and the GGT/HDL-C ratio among Mexican Americans and young people in the 20–40 age range. The receiver operating characteristic (ROC) study showed that GGT/HDL-C was a more accurate predictor of NAFLD than GGT or HDL-C alone. In the U.S. population, an increased risk of NAFLD, the severity of hepatic steatosis, and the risk of liver fibrosis are independently correlated with an elevated GGT/HDL-C ratio.