Background Clinical application of mesenchymal stromal cells (MSCs) usually requires an in vitro expansion step to reach clinically relevant numbers. In vitro cell expansion necessitates supplementation of basal mammalian cell culture medium with growth factors. To avoid using supplements containing animal substances, human platelet lysates (hPL) produced from expired and pathogen inactivated platelet concentrates can be used in place of fetal bovine serum. Due to lack of experience and global diversity in bacterial detection strategies, most transfusion units are currently not pathogen inactivated. As blood banks are the sole source of platelet concentrates for hPL production, it is important to ensure product safety and standardized production methods. To achieve these aims, we assessed the quality of hPL produced from expired platelet concentrates with pathogen inactivation applied after platelet lysis, as well as its ability to support MSC proliferation and tri-lineage differentiation. Methodology/principal findings Bone marrow-derived MSCs (BM-MSCs) were expanded and differentiated using hPL derived from pathogen inactivated platelet lysates (hPL-PIPL), with pathogen inactivation applied after lysis of expired platelets. Results were compared to those using hPL produced from conventional expired pathogen inactivated human platelet concentrates (hPL-PIPC), with pathogen inactivation applied after soon after blood donation. hPL-PIPL treatment had lower concentrations of soluble growth factors and cytokines than hPL-PIPC treatment. When used as supplementation in cell culture, BM-MSCs proliferated at a reduced rate, but more consistently, in hPL-PIPL than in hPL-PIPC. The ability to support tri-lineage differentiation was comparable between lysates. Conclusion/significance These results suggest that functional hPL can be produced from expired and untreated platelet lysates by applying pathogen inactivation after platelet lysis. When carried out post-expiration, pathogen inactivation can provide a valuable tool to further standardize global hPL production methods, increase the pool of starting material, and meet the future demand for animal-free supplements in human cell culturing.

Organisms adapt their metabolism and growth to the availability of nutrients and oxygen, which are essential for normal development. This requires the ability to sense these environmental factors and respond by regulation of growth-controlling signals, yet the mechanisms by which this adaptation occurs are not fully understood. To identify novel growth-regulatory mechanisms, we conducted a global RNAi-based screen in Drosophila for size differences and identified 89 positive and negative regulators of growth. Among the strongest hits was the FGFR homologue breathless necessary for proper development of the tracheal airway system. Breathless deficiency results in tissue hypoxia (low oxygen), sensed primarily in this context by the fat tissue. The fat, in response, relays this information through release of one or more humoral factors that remotely inhibit insulin secretion from the brain, thereby restricting systemic growth. Thus our findings show that the fat tissue acts as an oxygen sensor that allows the organism to reduce its growth in adaptation to limited oxygen conditions.

In adult tissues, stem cells (SCs) reside in specialized niches, where they are maintained in a quiescent state until activated by injury. Once activated, they migrate towards injured sites, where they proliferate and differentiate to replenish lost or damaged cells. Although effective tissue repair relies critically on the ability of SCs to reach and populate damaged sites, mechanisms guiding SCs towards these sites are not well understood. This is largely due to the technical challenges involved in monitoring SC dynamics in real time in vivo. Here, we devised an experimental framework that allows for real-time tracking of the spatiotemporal dynamics of intestinal SCs (ISCs) during the early phases of gut regeneration. Our data show that ISC migration is rapidly induced following injury and precedes ISC divisions and differentiation. We identify the Drosophila PDGF-VEGF-related receptor, Pvr, as a critical regulator of the migratory response to epithelial damage. ISC-specific Pvr depletion strongly suppresses ISC migration towards affected sites as well as the regenerative response. We further show that the Pvr ligand, PDGF-VEGF-related factor 1 (Pvf1), is produced by the trachea/vasculature in response to intestinal damage and acts as a guidance signal to direct ISC migration towards affected areas. Our work highlights a critical role of gut-trachea/vasculature crosstalk in guiding ISC migration during regeneration. As neovascularization of injured sites is a key feature of tissue repair in both flies and mammals, these findings could be relevant to regenerative processes in a wide range of adult tissues.