LZ
Lei Zheng
Author with expertise in Zebrafish as a Model Organism for Multidisciplinary Research
Achievements
This user has not unlocked any achievements yet.
Key Stats
Upvotes received:
0
Publications:
3
(33% Open Access)
Cited by:
0
h-index:
39
/
i10-index:
113
Reputation
Biology
< 1%
Chemistry
< 1%
Economics
< 1%
Show more
How is this calculated?
Publications
0

Measuring aptamer folding energy using a molecular clamp

Hao Qu et al.Feb 10, 2020
Folding energy offers a useful metric for characterizing the stability and function of aptamers. However, experimentally measuring the folding energy is challenging and there is currently no general technique to measure this parameter directly. In this work, we present a simple approach for measuring aptamer folding energy. First, the aptamer is stretched under equilibrium conditions with a double-stranded DNA "molecular clamp" that is coupled to the aptamer ends. We then measure the total internal energy of stressed DNA molecules using time-lapse gel electrophoresis and compare the folding and unfolding behavior of molecular clamp-stressed molecules that incorporate either the aptamer or unstructured random single-stranded DNA in order to derive the aptamer folding energy. Using this approach, we measured a folding energy of 10.40 kJ/mol for the HD22 thrombin aptamer, which is consistent with other predictions and estimates. We also analyzed a simple hairpin structure, generating a folding energy result of 9.05 kJ/mol, consistent with the value predicted by computational models (9.24 kJ/mol). We believe our strategy offers an accessible and generalizable approach for obtaining such measurements with virtually any aptamer.