Abstract The gaseous hormone ethylene participates in many physiological processes of plants. It is well known that ethylene-inhibited root elongation involves basipetal auxin delivery requiring PIN2. However, the molecular mechanism how ethylene regulates PIN2 is not well understood. Here, we report that the ethylene-responsive HD-Zip gene HB52 is involved in ethylene-mediated inhibition of primary root elongation. Using biochemical and genetic analyses, we demonstrated that HB52 is ethylene-responsive and acts immediately downstream of EIN3. HB52 knock-down mutants are insensitive to ethylene in primary root elongation while the overexpression lines have dramatically shortened roots like ethylene treated plants. Moreover, HB52 upregulates PIN2, WAG1 , and WAG2 by directly binding to their promoter, leading to an enhanced basipetal auxin delivery to the elongation zone and thus inhibiting root growth. Our work uncovers HB52 as an important crosstalk node between ethylene signaling and auxin transport in root elongation.

Drought is one of the most severe environmental factors limiting plant growth and productivity. Plants respond to drought by closing stomata to reduce water loss. The molecular mechanisms underlying plant drought resistance are very complex and yet to be fully understood. While much research attention has been focused on the positive regulation of stomatal closure, less is known about its negative regulation, equally important in this reversible process. Here we show that the MADS-box transcriptional factor AGL16 acts as a negative regulator in drought resistance by regulating both stomatal density and movement. Loss-of-function mutant agl16 was more resistant to drought stress with higher relative water content, which was attributed to a reduced leaf stomatal density and more sensitive stomatal closure due to a higher leaf ABA level compared with wild type, while AGL16 overexpression lines displayed the opposite phenotypes. AGL16 is preferentially expressed in guard cells and down regulated in response to drought stress. The expression of CYP707A3 and AAO3 in ABA metabolism and SDD1 in stomatal development was altered by AGL16 as shown in agl16 and overexpression lines. Chromatin immunoprecipitation, transient transactivation, and yeast-one-hybrid assays demonstrated that AGL16 bound the CArG motif in the promoter of the CYP707A3, AAO3, and SDD1 to regulate their transcription, and therefore alter leaf stomatal density and ABA level. Taken together, AGL16 acts as a negative regulator of drought resistance by modulating leaf stomatal density and ABA accumulation.

Seed germination is a crucial checkpoint for plant survival under unfavorable environmental conditions. Abscisic acid (ABA) and its signaling play a vital role in integrating environmental information to regulate seed germination. MCM1/AGAMOUS/DEFICIENS/SRF (MADS)-box transcription factors are mainly known as key regulators of seed and flower development in Arabidopsis. However, their functions in seed germination are still poorly understood. Here we report that MADS-box transcription factor AGL21 negatively modulates seed germination and post-germination growth by controlling the expression of ABA-INSENSITIVE 5 (ABI5) in Arabidopsis. AGL21 responds to multiple environmental stresses and plant hormones. The AGL21-overexpressing plants are hypersensitive to ABA, salt and osmotic stresses during seed germination and early post-germination growth, whereas agl21 mutants are less sensitive. AGL21 positively regulates ABI5 expression in seeds. Genetic analyses reveal that AGL21 is epistatic to ABI5 in controlling seed germination. Chromatin immunoprecipitation assays further demonstrate that AGL21 could directly bind to the ABI5 promoter in plant cells. Taken together, our results suggest that AGL21 acts as a surveillance integrator that incorporates environmental cues and endogenous hormonal signals into ABA signaling to regulate seed germination and early post-germination growth.