GR
Glenn Rhodes
Author with expertise in Diagnosis, Treatment, and Epidemiology of Nontuberculous Mycobacterial Diseases
Achievements
Cited Author
Open Access Advocate
Key Stats
Upvotes received:
0
Publications:
3
(67% Open Access)
Cited by:
395
h-index:
23
/
i10-index:
32
Reputation
Biology
< 1%
Chemistry
< 1%
Economics
< 1%
Show more
How is this calculated?
Publications
0

Detection and Verification of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis in Fresh Ileocolonic Mucosal Biopsy Specimens from Individuals with and without Crohn's Disease

Tim Bull et al.Jul 1, 2003
ABSTRACT Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis is a robust and phenotypically versatile pathogen which causes chronic inflammation of the intestine in many species, including primates. M. avium subsp. paratuberculosis infection is widespread in domestic livestock and is present in retail pasteurized cows' milk in the United Kingdom and, potentially, elsewhere. Water supplies are also at risk. The involvement of M. avium subsp. paratuberculosis in Crohn's disease (CD) in humans has been uncertain because of the substantial difficulties in detecting this pathogen. In its Ziehl-Neelsen staining-negative form, M. avium subsp. paratuberculosis is highly resistant to chemical and enzymatic lysis. The present study describes the development of optimized sample processing and DNA extraction procedures with fresh human intestinal mucosal biopsy specimens which ensure access to M. avium subsp. paratuberculosis DNA and maximize detection of these low-abundance pathogens. Also described are two nested PCR methodologies targeted at IS 900 , designated IS 900 [L/AV] and IS 900 [TJ1-4], which are uniquely specific for IS 900 . Detection of M. avium subsp. paratuberculosis in mucosal biopsy specimens was also evaluated by using mycobacterial growth indicator tube (MGIT) cultures (Becton Dickinson). IS 900 [L/AV] PCR detected M. avium subsp. paratuberculosis in 34 of 37 (92%) patients with CD and in 9 of 34 (26%) controls without CD (noninflammatory bowel disease [nIBD] controls) ( P = 0.0002; odds ratio = 3.47). M. avium subsp. paratuberculosis was detected by IS 900 [L/AV] PCR in MGIT cultures after 14 to 88 weeks of incubation in 14 of 33 (42%) CD patients and 3 of 33 (9%) nIBD controls ( P = 0.0019; odds ratio = 4.66). Nine of 15 (60%) MGIT cultures of specimens from CD patients incubated for more than 38 weeks were positive for M. avium subsp. paratuberculosis . In each case the identity of IS 900 from M. avium subsp. paratuberculosis was verified by amplicon sequencing. The rate of detection of M. avium subsp. paratuberculosis in individuals with CD is highly significant and implicates this chronic enteric pathogen in disease causation.
0
Citation395
0
Save
0

Influenza C incidence and herd immunity in Lancaster, UK, in the winter of 2014-2015

Kate Atkinson et al.Nov 10, 2016
Influenza C is not included in the annual seasonal influenza vaccine, and has historically been regarded as a minor respiratory pathogen. However, recent work has highlighted its potential role as a cause of pneumonia in infants. We performed nasopharyngeal or nasal swabbing and/or serum sampling (n=148) in Lancaster, UK, over the winter of 2014-2015. Using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), we estimated a seropositivity of 77%. By contrast, only 2 individuals, both asymptomatic adults, were influenza C-positive by polymerase chain reaction (PCR). Deep sequencing of nasopharyngeal samples produced partial sequences for 4 genome segments in one of these patients. Bayesian phylogenetic analysis demonstrated that the influenza C genome from this individual is evolutionarily distant to those sampled in recent years and represents a novel genome constellation, indicating that it is a product of a decades-old reassortment event. Although we find no evidence that influenza C was a significant respiratory pathogen during the winter of 2014-2015 in Lancaster, we confirm previous observations of seropositivity in the majority of the population. We calculate that this level of herd immunity would be sufficient to suppress epidemics of influenza C and restricts the virus to sporadic endemic spread.