Picornavirus RNAs are uncapped messengers and have unusually long 5' nontranslated regions (5'NTRs) which contain many noninitiating AUG triplets. The translational efficiency of different picornavirus RNAs varies between different cell-free extracts and even in the same extract, such as micrococcal nuclease-treated rabbit reticulocyte lysates. The effect of the poliovirus 5'NTR on in vitro translation was compared with that of the 5'NTR of encephalomyocarditis virus by the use of synthetic mRNAs, micrococcal nuclease-treated HeLa cell extracts, and rabbit reticulocyte lysates. Artificial mono- and dicistronic mRNAs synthesized with T7 RNA polymerase were used to investigate whether the 5'NTR of encephalomyocarditis virus RNA contains a potential internal ribosomal entry site. The sequence between nucleotides 260 and 484 in the 5'NTR of encephalomyocarditis RNA was found to play a critical role in the efficient translation in both mono- and dicistronic mRNAs. Our data suggest that an internal ribosomal entry site resides in this region.

The p53 gene is frequently mutated in a wide variety of human cancers. However, the role of the wild-type p53 gene in growth control is not known. Hybrid proteins that contain the DNA binding domain of yeast GAL4 and portions of p53 have been used to show that the p53 protein contains a transcription-activating sequence that functions in both yeast and mammalian cells. The NH2-terminal 73 residues of p53 activated transcription in mammalian cells as efficiently as the herpes virus protein VP16, which contains one of the strongest known activation domains. Combined with previous data that showed p53 is localized to the nucleus and can bind to DNA, these results support the idea that one function of p53 is to activate the transcription of genes that suppress cell proliferation.

Advanced MaterialsVolume 18, Issue 6 p. 709-712 Communication Nanoporous Membranes with Ultrahigh Selectivity and Flux for the Filtration of Viruses† S. Y. Yang, S. Y. Yang Departments of Environmental Science and Engineering and Chemical Engineering, Pohang University of Science and Technology, Kyungbuk 790-784, KoreaSearch for more papers by this authorI. Ryu, I. Ryu Department of Life Sciences, Pohang University of Science and Technology, Kyungbuk 790-784, KoreaSearch for more papers by this authorH. Y. Kim, H. Y. Kim Departments of Environmental Science and Engineering and Chemical Engineering, Pohang University of Science and Technology, Kyungbuk 790-784, KoreaSearch for more papers by this authorJ. K. Kim, J. K. Kim jkkim@postech.ac.kr Departments of Environmental Science and Engineering and Chemical Engineering, Pohang University of Science and Technology, Kyungbuk 790-784, KoreaSearch for more papers by this authorS. K. Jang, S. K. Jang sungkey@postech.ac.kr Department of Life Sciences, Pohang University of Science and Technology, Kyungbuk 790-784, KoreaSearch for more papers by this authorT. P. Russell, T. P. Russell Department of Polymer Science and Engineering, University of Massachusetts at Amherst, Amherst, MA 01003, USASearch for more papers by this author S. Y. Yang, S. Y. Yang Departments of Environmental Science and Engineering and Chemical Engineering, Pohang University of Science and Technology, Kyungbuk 790-784, KoreaSearch for more papers by this authorI. Ryu, I. Ryu Department of Life Sciences, Pohang University of Science and Technology, Kyungbuk 790-784, KoreaSearch for more papers by this authorH. Y. Kim, H. Y. Kim Departments of Environmental Science and Engineering and Chemical Engineering, Pohang University of Science and Technology, Kyungbuk 790-784, KoreaSearch for more papers by this authorJ. K. Kim, J. K. Kim jkkim@postech.ac.kr Departments of Environmental Science and Engineering and Chemical Engineering, Pohang University of Science and Technology, Kyungbuk 790-784, KoreaSearch for more papers by this authorS. K. Jang, S. K. Jang sungkey@postech.ac.kr Department of Life Sciences, Pohang University of Science and Technology, Kyungbuk 790-784, KoreaSearch for more papers by this authorT. P. Russell, T. P. Russell Department of Polymer Science and Engineering, University of Massachusetts at Amherst, Amherst, MA 01003, USASearch for more papers by this author First published: 16 February 2006 https://doi.org/10.1002/adma.200501500Citations: 497 † We thank Dr. Y. S. Kang from KIST for stimulating discussions on the morphology of the asymmetric membranes. This work was supported by the Creative Research Initiative Program, Grant Systems-BioDynamics-National Core Research Center (R15-2004-033-01001-0) from the Korea Research Foundation, and the U.S. Department of Energy, Office of Science. Supporting Information is available online from Wiley InterScience or from the author. AboutPDF ToolsRequest permissionExport citationAdd to favoritesTrack citation ShareShare Give accessShare full text accessShare full-text accessPlease review our Terms and Conditions of Use and check box below to share full-text version of article.I have read and accept the Wiley Online Library Terms and Conditions of UseShareable LinkUse the link below to share a full-text version of this article with your friends and colleagues. Learn more.Copy URL Share a linkShare onFacebookTwitterLinked InRedditWechat Abstract A double-layered nanoporous membrane suitable for virus filtration has been fabricated. The top layer has cylindrical pores with diameters of 15 nm and a narrow pore size distribution (see figure). The bottom support layer is a conventional microfiltration membrane. This asymmetric membrane completely blocks human rhinovirus type 14 (colored green) from penetrating into pores, while proteins such as bovine serum albumin (colored yellow) freely pass through the pores. Citing Literature Supporting Information Supporting information for this article is available on the WWW under http://www.wiley-vch.de/contents/jc_2089/2006/c1500_s.pdf or from the author. Please note: The publisher is not responsible for the content or functionality of any supporting information supplied by the authors. Any queries (other than missing content) should be directed to the corresponding author for the article. Volume18, Issue6March, 2006Pages 709-712 RelatedInformation

Translation of encephalomyocarditis virus (EMCV) mRNA occurs by ribosomal internal entry into the 5'-nontranslated region (5' NTR) rather than by ribosomal scanning. The internal ribosomal entry site (IRES) in the EMCV 5' NTR was determined by in vitro translation with RNAs that were generated by in vitro transcription of EMCV cDNAs containing serial deletions from either the 5' or 3' end of the EMCV 5' NTR. Regions downstream of nucleotide 403 and upstream of nucleotide 811 of EMCV were required for efficient translation. Site-directed mutagenesis revealed that a stem-loop structure (400 nucleotides upstream of the initiation codon) was essential for IRES function. We discovered a 57-kD cellular protein whose specific interaction with this stem-loop appears to be prerequisite for IRES function. A A pyrimidine-rich stretch proximal to the initiation codon was also crucial for efficient translation of EMCV mRNA. We propose that ribosomes bind directly to the initiating AUG without scanning.

Expression vectors that yield mono-, di-, and tricistronic mRNAs upon transfection of COS-1 cells were used to assess the influence of the 5' nontranslated regions (5'NTRs) on translation of reporter genes. A segment of the 5'NTR of encephalomyocarditis virus (EMCV) allowed translation of an adjacent downstream reporter gene (CAT) regardless of its position in the mRNAs. A deletion in the EMCV 5'NTR abolishes this effect. Poliovirus infection completely inhibits translation of the first cistron of a dicistronic mRNA that is preceded by the capped globin 5'NTR, whereas the second cistron preceded by the EMCV 5'NTR is still translated. We conclude that the EMCV 5'NTR contains an internal ribosomal entry site that allows cap-independent initiation of translation. mRNA containing the adenovirus tripartite leader is also resistant to inhibition of translation by poliovirus.

15-deoxy-delta 12,14-prostaglandin J2 (15d-PGJ2) is anti-inflammatory/anti-neoplastic prostaglandin which functions through covalent binding to cysteine residues of various target proteins. We previously showed that 15d-PGJ2 mediated anti-inflammatory responses are dependent on the translational inhibition through its interaction with eIF4A. Binding of 15d-PGJ2 to eIF4A specifically blocks the interaction between eIF4G and eIF4A leads to the formation of stress granules (SGs), which cluster mRNAs with inhibited translation. Here we show that the binding between 15d-PGJ2 and eIF4A specifically blocks the interaction between the MIF4G domain of eIF4G and eIF4A. To reveal the mechanism of this interaction, we used computational simulation-based docking studies and identified that the carboxyl tail of 15d-PGJ2 could stabilize the binding of 15d-PGJ2 to eIF4A through arginine 295 of eIF4A, which is the first suggestion that the 15d-PGJ2 tail play a physiological role. Interestingly, the putative 15d-PGJ2 binding site on eiF4A is conserved across many species, suggesting a biological role. Our data propose that studying 15d-PGJ2 and its targets will may uncover new therapeutic approaches in anti-inflammatory drug discovery.