Purpose: Cancer-associated fibroblasts (CAFs) in the tumor microenvironment (TME) play a central role in tumor progression. We investigated whether CAFs can regulate tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) and their role in tumor immunosuppression.Experimental Design: A total of 140 cases of esophageal cancer were analyzed for CAFs and CD8+ or forkhead box protein 3 (FoxP3+) TILs by IHC. We analyzed cytokines using murine or human fibroblasts and cancer cells. Murine-derived fibroblasts and cancer cells were also inoculated into BALB/c or BALB/c-nu/nu mice and the tumors treated with recombinant IL6 or anti-IL6 antibody.Results: CD8+ TILs and CAFs were negatively correlated in intratumoral tissues (P < 0.001), whereas FoxP3+ TILs were positively correlated (P < 0.001) in esophageal cancers. Cocultured Colon26 cancer cells and fibroblasts resulted in accelerated tumor growth in BALB/c mice, along with decreased CD8+ and increased FoxP3+ TILs, compared with cancer cells alone. In vitro, IL6 was highly secreted in both murine and human cancer cell/fibroblast cocultures. IL6 significantly increased Colon26 tumor growth in immune-competent BALB/c (P < 0.001) with fewer CD8+ TILs than untreated tumors (P < 0.001), whereas no difference in BALB/c-nu/nu mice. In contrast, FoxP3+ TILs increased in IL6-treated tumors (P < 0.001). IL6 antibody blockade of tumors cocultured with fibroblasts resulted not only in regression of tumor growth but also in the accumulation of CD8+ TILs in intratumoral tissues.Conclusions: CAFs regulate immunosuppressive TIL populations in the TME via IL6. IL6 blockade, or targeting CAFs, may improve preexisting tumor immunity and enhance the efficacy of conventional immunotherapies. Clin Cancer Res; 24(19); 4820-33. ©2018 AACR.

Summary In animal development, most cell types stop dividing before terminal differentiation; thus, cell cycle control is tightly linked to cell differentiation programs. Although cell cycle control in animal development has been studied extensively, such links are not well understood. In ascidian embryos, cell lineages do not vary among individuals, and rounds of the cell cycle are determined according to cell lineages. In the present study, we first showed that maternal factors promote approximately 10 rounds of cell division without zygotic gene expression. Notochord and muscle cells stop dividing after fewer than 10 rounds of cell division, and we show that a Cdk inhibitor ( Cdkn1.b ) is responsible. Cdkn1.b is also necessary for epidermal cells to stop dividing. In contrast, mesenchymal and endodermal cells divided more than 10 times, and Myc , which encodes a proto-oncogenic transcription factor, is responsible for maintaining cell cycle progression in these tissues. Expression of Cdkn1.b in notochord and muscle is controlled by the same developmental programs that specify the developmental fate of notochord and muscle. Likewise, expression of Myc in mesenchyme and endoderm was under control of the same developmental programs that specify the developmental fate of mesenchyme and endoderm. Because these transcription factors that regulate Cdkn1.b and Myc are essential factors for fate specification of these tissues, cell fate specification and cell cycle control are linked by those transcription factors. In other words, ectodermal, mesodermal, and endodermal tissues in ascidian embryos control the cell cycle through Cdkn1.b and Myc , which are under the control of transcription factors that specify cell fate.

The purpose of this study was to investigate the effects of dynamic stretching (DS) performed before and between the sets of exercises on vertical jump performance. Twelve healthy adult males performed DS on their lower limb muscles, with 10 repetitions on each side before and between four sets of three repetitions of vertical jumps. Vertical jump height was measured. Additionally, the percent change in jump height for each set was determined based on the baseline score from set 1. Heart rate was also measured at rest, before exercise, and before each set of vertical jumps. Vertical jump height was significantly higher in the latter half of the sets (p < .05) compared to the condition in which DS was only performed before exercise and to the control condition in which the participants were refrained from performing DS throughout. In addition, when DS was only performed before exercise, vertical jump height was significantly lower in set 4 compared to set 1 (p = .001). These findings suggest that DS performed between sets, in addition to performing before the exercise, produces a higher power output in vertical jump performance in the latter half of multiple sets.